秦倩倩
- 作品数：4 被引量：20H指数：2
- 供职机构：四川大学华西公共卫生学院更多>>
- 发文基金：达能营养中心膳食营养研究与宣教基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肠道细菌Akkermansia muciniphila及其与宿主疾病的关系被引量：2
- 2017年
- Akkermansia muciniphila(A.muciniphila)是肠道菌群的重要成员,于2004年首次从人类粪便样品中分离得到。A.muciniphila定植于肠道黏液层,其丰富度与肥胖、Ⅱ型糖尿病等代谢性疾病呈负相关。本文对A.muciniphila的基本特征、在肠道中的分布和变化情况、对宿主健康的影响及其与宿主代谢性疾病、免疫性疾病、肠道癌症、孤独症、酒精性肝病的关系等方面进行综述。
- 秦倩倩张玲王国庆
- 关键词：黏蛋白
- 肠道细菌Akkermansia muciniphila核酸适配体的筛选
- 2017年
- 目的筛选能高效特异结合Akkermansia muciniphlia(A.muciniphlia)的核酸适配体,为后续利用适配子进行A.muciniphlia的检测和鉴定奠定基础。方法合成83bp随机ssDNA文库,运用指数富集配体系统进化技术,筛选A.muciniphlia的核酸适配体,并对其进行序列测定、结构分析、解离常数(KD值)测定及特异性验证。结果经8轮筛选后,随机ssDNA文库的亲和力从5.23上升56.99,筛选出的适配体富集库经克隆、测序后得到16条不同的核酸序列,根据同源性分成3个家族,最终筛选到2条对A.muciniphlia有较高亲和力的高频适配体,相应的KD值分别为34.8nmol/L和12.8nmol/L(P<0.05)。结论本文首次筛选出了对A.muciniphlia具有较高亲和力和特异性的适配体,有望用于A.muciniphila的鉴定和检测。
- 张玲陈雯杰秦倩倩王国庆
- 关键词：核酸适配体解离常数
- 实时荧光PCR定量检测粪便中Akkermansia muciniphila方法研究被引量：9
- 2018年
- 目的建立实时荧光PCR定量检测粪便中Akkermansia muciniphila(A.muciniphila)的方法,为A.muciniphila的定量检测及深入研究提供技术支持。方法建立SYBR GreenⅠ荧光PCR定量检测A.muciniphila的方法,利用A.muciniphila标准品制备标准曲线,评价该方法的灵敏度、特异性、抗干扰性及重复性,并对30例人粪便样本进行检测。结果标准曲线线性关系良好(R2=0.999);方法灵敏度可达到1.0×102 CFU/mL;该方法可特异性扩增A.muciniphila,不受其他肠道细菌的影响;组内和组间重复性较好,Ct值的变异系数均小于2%;30例人粪便样品中A.muciniphila阳性率为73%,Ct值为17.40~31.77。结论本研究建立的实时荧光PCR定量检测粪便中A.muciniphila的方法简便、快速、经济,且具有良好的灵敏度、特异性、抗干扰性和重复性,适用于实际粪便样品的检测。
- 秦倩倩张玲王国庆
- 关键词：SYBRI
- 基于PCR-DGGE技术分析中老年人肠道菌群结构与免疫功能的关系被引量：9
- 2017年
- 目的通过检测中老年人的各项免疫指标和肠道菌群组成,分析中老年人免疫功能与其肠道菌群结构的关系,探索高龄引起的肠道菌群结构变化对中老年人免疫功能可能的影响。方法选取50~75周岁,健康中老年人99人作为研究对象,抽取空腹静脉血,检测CD3^+T细胞数、CD4^+T细胞数、CD8^+T细胞数及血清中的IgA、IgM、IgG。收集各研究对象的粪便,提取粪便细菌基因组DNA,采用细菌16S rRNA V6~V8区通用引物进行PCR扩增,对扩增产物进行变性梯度凝胶电泳。采用聚类分析、主成分分析、方差分析等解析研究对象肠道菌群结构特征及与其免疫指标的相关性。结果研究对象肠道菌群组成表现出高度多态性和显著的个体差异,CD3^+T细胞和CD4^+/CD8^+水平与肠道菌群结构有相关性,CD4^+/CD8^+偏高的人群与CD4^+/CD8^+偏低和正常人群相比肠道菌群丰富度(S)偏低,但是未观察到IgA、IgM、IgG与肠道菌群结构存在明显相关。结论中老年人肠道菌群结构与免疫水平相关,肠道菌群多样性的减少可能会影响其机体CD8^+T细胞为中心的非特异性自然免疫功能。
- 秦倩倩苗俊杰王舒悦余倩李鸣何方王国庆
- 关键词：中老年人肠道菌群免疫
