张玲
- 作品数:6 被引量:19H指数:3
- 供职机构:四川大学华西公共卫生学院更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 嗜黏蛋白阿克曼菌对大鼠胰岛细胞瘤细胞增殖、凋亡及胰岛素分泌功能的影响被引量:5
- 2020年
- 目的探讨嗜黏蛋白阿克曼菌(Akkermansia muciniphila, A. muciniphila)对大鼠胰岛细胞瘤细胞(INS-1)增殖、凋亡及胰岛素分泌功能的影响。方法将INS-1细胞分为正常组、修复组和保护组,每组均用3种A. muciniphila干预物(活菌、灭活菌和分泌物)处理48 h,并设不干预的空白对照。正常组INS-1细胞直接干预;修复组INS-1细胞先用链脲佐菌素(streptozotocin, STZ)造模再加干预物;保护组INS-1细胞先用干预物作用再加STZ造模。干预结束,用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测细胞增殖;使用葡萄糖刺激,用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测胰岛素分泌水平;实时荧光定量PCR技术检测胰岛素分泌相关基因和凋亡基因表达,Western blot检测Bax凋亡蛋白的表达。结果 A.muciniphila干预物对INS-1细胞作用48 h后,其细胞形态无明显变化。A. muciniphila活菌干预的修复组INS-1细胞增殖活性较空白对照降低(P<0.005)。A. muciniphila干预物对正常组、修复组和保护组INS-1细胞的胰岛素分泌没有影响(P>0.05)。A. muciniphila分泌物可促进正常组、修复组和保护组INS-1细胞葡萄糖转运蛋白2基因(glucose transporter 2,Glut2)和修复组葡萄糖激酶基因(glucokinase, GCK)的表达(P<0.05)。3种A. muciniphila干预物处理后的正常组INS-1细胞Bcl2-associated X基因(Bax)的表达量减少(P<0.001),A. muciniphila死菌干预的修复组INS-1细胞Bax基因表达量减少(P<0.05)。A. muciniphila干预物处理的细胞Bax蛋白表达减少。结论 A. muciniphila可促进INS-1细胞胰岛素分泌相关基因的表达,抑制凋亡基因和凋亡蛋白Bax的表达,为研究如何用A. muciniphila改善2型糖尿病提供了新的方向。
- 刘曼妮张玲董新燕刘敏成果张翔凌何方王国庆
- 关键词:2型糖尿病胰岛素肠道菌群
- 肠道细菌Akkermansia muciniphila及其与宿主疾病的关系被引量:2
- 2017年
- Akkermansia muciniphila(A.muciniphila)是肠道菌群的重要成员,于2004年首次从人类粪便样品中分离得到。A.muciniphila定植于肠道黏液层,其丰富度与肥胖、Ⅱ型糖尿病等代谢性疾病呈负相关。本文对A.muciniphila的基本特征、在肠道中的分布和变化情况、对宿主健康的影响及其与宿主代谢性疾病、免疫性疾病、肠道癌症、孤独症、酒精性肝病的关系等方面进行综述。
- 秦倩倩张玲王国庆
- 关键词:黏蛋白
- 肠道细菌Akkermansia muciniphila核酸适配体的筛选
- 2017年
- 目的筛选能高效特异结合Akkermansia muciniphlia(A.muciniphlia)的核酸适配体,为后续利用适配子进行A.muciniphlia的检测和鉴定奠定基础。方法合成83bp随机ssDNA文库,运用指数富集配体系统进化技术,筛选A.muciniphlia的核酸适配体,并对其进行序列测定、结构分析、解离常数(KD值)测定及特异性验证。结果经8轮筛选后,随机ssDNA文库的亲和力从5.23上升56.99,筛选出的适配体富集库经克隆、测序后得到16条不同的核酸序列,根据同源性分成3个家族,最终筛选到2条对A.muciniphlia有较高亲和力的高频适配体,相应的KD值分别为34.8nmol/L和12.8nmol/L(P<0.05)。结论本文首次筛选出了对A.muciniphlia具有较高亲和力和特异性的适配体,有望用于A.muciniphila的鉴定和检测。
- 张玲陈雯杰秦倩倩王国庆
- 关键词:核酸适配体解离常数
- 实时荧光PCR定量检测粪便中Akkermansia muciniphila方法研究被引量:9
- 2018年
- 目的建立实时荧光PCR定量检测粪便中Akkermansia muciniphila(A.muciniphila)的方法,为A.muciniphila的定量检测及深入研究提供技术支持。方法建立SYBR GreenⅠ荧光PCR定量检测A.muciniphila的方法,利用A.muciniphila标准品制备标准曲线,评价该方法的灵敏度、特异性、抗干扰性及重复性,并对30例人粪便样本进行检测。结果标准曲线线性关系良好(R2=0.999);方法灵敏度可达到1.0×102 CFU/mL;该方法可特异性扩增A.muciniphila,不受其他肠道细菌的影响;组内和组间重复性较好,Ct值的变异系数均小于2%;30例人粪便样品中A.muciniphila阳性率为73%,Ct值为17.40~31.77。结论本研究建立的实时荧光PCR定量检测粪便中A.muciniphila的方法简便、快速、经济,且具有良好的灵敏度、特异性、抗干扰性和重复性,适用于实际粪便样品的检测。
- 秦倩倩张玲王国庆
- 关键词:SYBRI
- 部分公共卫生类期刊调查研究文献中抽样设计的常见问题分析(二)
- 2016年
- 目的分析公共卫生类期刊涉及调查研究文献中抽样设计的常见问题及特点,为建立公共卫生类期刊文献中抽样设计的规范性体系奠定基础。方法设计公共卫生类期刊文献调查研究抽样设计常见问题调查表,随机抽取10种公共卫生类核心及以上级别期刊,查阅其2014年发表的所有文献,采用定性研究方法总结分析其中抽样方法的常见问题类型与特点。结果公共卫生类期刊文献中抽样设计的常见问题总结如下:(1)分层抽样问题;(2)整群抽样问题;(3)系统抽样问题;(4)多阶段抽样问题;(5)抽样方法表述问题;(6)抽样方法使用错误;(7)抽样方法命名错误;(8)抽样方法参考依据问题;(9)样本量问题;(10)抽样框问题。结论选定公共卫生类期刊文献中,抽样设计问题表现较为集中、特点明显,目前文献中抽样设计的表述尚不规范,有待进一步研究以规范化。
- 孙千贺宛小燕张玲徐浩周婷张蕾赵楚宁杨薛玉刘元元
- 关键词:抽样问题
- 部分公共卫生类期刊调查研究文献中抽样设计的常见问题分析(一)被引量:3
- 2016年
- 目的分析总结公共卫生类期刊涉及调查研究文献中抽样设计的常见问题及特点,为建立公共卫生类期刊文献中抽样设计的规范体系奠定基础。方法设计公共卫生类期刊文献调查研究抽样设计常见问题调查表,随机抽取10种公共卫生类核心及以上级别期刊,查阅其2014年发表的所有文献,采用定性研究方法总结分析其中常见抽样方法的问题类型与特点。结果公共卫生类期刊文献中抽样设计的常见问题主要表现为:(1)分层抽样:未对"层"定义;未说明分层标准;未说明所分层数及每层单位数具体大小;未提供上述各点判定依据;(2)整群抽样:未对"群"定义;未说明分群标准;未说明所分群数及每群单位数具体大小;未提供上述各点判定依据;(3)系统抽样问题:未明确抽样间隔;未明确欲抽样样本组数;(4)多阶段抽样问题:各阶段表达过于简单;单阶段抽样表述不完整;多阶段抽样命名问题。结论选定公共卫生类期刊文献中,抽样设计问题表现较为集中、特点明显,目前文献中抽样设计的表述尚不规范,有待进一步研究以规范化。
- 孙千贺周婷李亚茜蔺轲张玲张雪陈晓瑜刘元元宛小燕
- 关键词:抽样问题