黄玉
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家绒毛用羊产业技术体系建设专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 利用荧光定量PCR法检测转基因绒山羊外源基因整合拷贝数
- 2017年
- 外源基因拷贝数是转基因动物检测中的重要内容。本实验室使用PiggyBac(PB)转座子系统获得Tβ4-GFP、FGF5s-GFP、VEGF164-GFP 3种转基因类型陕北白绒山羊,为研究其外源基因整合情况,利用荧光定量PCR方法对其外源基因copGFP的整合拷贝数进行检测。以Gluc为内参基因,建立外源基因和内参基因的标准曲线方程,对转基因陕北白绒山羊DNA进行荧光定量PCR,将copGFP/Gluc的比率作为外源基因的拷贝数。同时,选取Tβ4-GFP转基因绒山羊对其整合位点进行检测,以验证拷贝数结果。结果显示:copGFP与Gluc的标准曲线方程分别为,y=-3.230 6x+39.216(R^2=0.998 8)、y=-3.564 8x+38.440(R^2=0.996 0);成功得到9只转基因绒山羊的整合拷贝数;Tβ4-GFP转基因绒山羊整合位点数目和拷贝数检测结果一致。结果表明,利用荧光定量PCR检测转基因绒山羊外源基因整合拷贝数,操作简单、灵敏方便,是一种切实可行的检测方法。
- 师丙波黄玉何晓琳朱海鲸于鸿浩金妙函屈雷陈玉林
- 关键词：拷贝数
- 通过CRISPR/Cas9技术创制基因编辑山羊和绵羊模型被引量：4
- 2017年
- 山羊和绵羊不仅是重要的经济动物,更是基因编辑的模式动物。基因编辑山羊、绵羊的研究对动物生产性能改善、生物医学和生物制药的研究都具有重要的意义。羊的基因编辑技术兴起于20世纪80年代,Hamme等将鼠的金属硫蛋白基因和人生长激素基因通过显微注射技术导入绵羊原核期胚胎中,成功获得了世界上第1只用显微注射法制备的转基因绵羊，这种显微注射DNA片段的方法建立了绵羊基因编辑的概念，但该方法的基因编辑效率较低、靶基因的整合具有随机性、表型不可预知。
- 黄玉蔡蓓王小龙陈玉林
- 关键词：人生长激素基因转基因绵羊山羊金属硫蛋白基因显微注射法
