徐伟 作品数:14 被引量:79 H指数:3 供职机构: 浙江大学动物科学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 中国博士后科学基金 北京市重点实验室开放基金 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 化学工程 更多>>
覆盆子多糖调控树突状细胞免疫应答信号通路的研究 2025年 为了探究覆盆子多糖(RFP)对骨髓来源树突状细胞(BMDC)的免疫调节作用及相关作用机制,本研究将不同浓度(10µg/mL~100µg/mL,后同)的RFP分别作用BMDC 24h后收集细胞,采用流式细胞术检测RFP对BMDC吞噬活性、MHCⅠ、MHCⅡ以及共刺激分子表达水平的影响。结果显示:与阴性对照组(NC)相比,10µg/mL~100µg/mL RFP可极显著抑制BMDC的吞噬活性(P<0.01),其中以50µg/mL RFP抑制BMDC的吞噬活性作用最强,且各浓度的RFP均可极显著促进共刺激分子(CD40、CD80、CD86)及MHC I、MHC II的表达(P<0.01)。采用RT-qPCR检测100µg/mLRFP作用BMDC后不同时间细胞中炎症相关因子TNF-α、IL-β、IL-6、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、环加氧酶2(PTGS2)、Toll样受体2(TLR2)mRNA的转录水平。采用ELISA及Griess法检测不同浓度RFP作用BMDC后细胞上清中IL-1β、IL-6、TNF-α、趋化因子CC配体5(CCL5)、趋化因子CXC配体2(CXCL2)及NO的含量。RT-qPCR结果显示:与NC组相比,RFP作用1 h~4 h时,BMDC中TNF-α、IL-1β、IL-6、PTGS2、CXCL2及TLR2 mRNA的转录水平均显著(P<0.05)和极显著升高(P<0.01),且呈先上升后下降的趋势,在作用2 h时达到峰值;iNOS mRNA的转录水平则在RFP作用4 h时极显著升高(P<0.01)。ELISA结果显示:与NC组相比,25µg/mL~100µg/mL RFP作用后的BMDC中IL-1β、IL-6、TNF-α、CCL5、CXCL2的分泌水平均极显著升高(P<0.01),且呈剂量依赖性;而低浓度RFP(10µg/mL)作用的BMDC中仅IL-1β、IL-6、CXCL2的分泌水平极显著升高(P<0.01);各浓度RFP作用的BMDC上清中NO的含量均极显著升高(P<0.01)。分别以RFP处理BMDC 30 min,采用western blot检测p38、JNK、ERK及IKK-β和p65及其磷酸化蛋白的表达水平;采用特异性通路抑制剂(包括JNK、ERK、p38及NF-κB通路的抑制剂)分别与RFP共处理BMDC 24 h,采用ELISA检测细胞上清中TNF-α的含量。Western blot结果显示,与NC组相比,各浓度RFP作用的BMDC中MAPK信号通路关键蛋白p38、JNK和ERK以及NF-κB信号通 郑斯纯 赵明 秦诗越 王家淇 马晓丹 赵凯 徐伟关键词:树突状细胞 免疫调节 信号通路 不同产地白术抗疲劳作用研究 被引量:2 2022年 为比较分析湖南龙山、安徽亳州和浙江磐安3个产地白术抗疲劳作用的差异,分别测定3个产地白术中的白术多糖、挥发油和白术内酯含量,通过水提醇沉法提取白术多糖,分别灌胃ICR小鼠,2周后测定体质量、小鼠力竭游泳时间以及血清中MDA和SOD的含量。结果表明,产自浙江磐安的白术中白术多糖含量最高,粗多糖得率为50.5%,浸出物含量高于湖南龙山和安徽亳州白术;产自湖南龙山的白术中挥发油含量显著高于安徽亳州白术(P<0.05),白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ含量均最高,显著高于浙江产和安徽产白术(P<0.05);与生理盐水组相比,产自浙江磐安和湖南龙山的白术中白术多糖可以显著延长小鼠负重游泳时间(P<0.05),同时还能显著提高小鼠血清中SOD活力,降低MDA含量(P<0.05)。产自浙江磐安和湖南龙山的白术具有较好的抗疲劳效果。 张岑容 方思佳 徐伟 王松琳 何伯伟 胡松华关键词:白术多糖 抗疲劳 SOD MDA 含白术多糖油乳剂对口蹄疫疫苗免疫的增强作用 被引量:9 2016年 从中药白术中提取多糖成分(RAMPS),分别将不同浓度RAMPS水溶液注射小鼠,检测小鼠血清IFN-γ及脾指数、胸腺指数,从中筛选出最适浓度。将灭活口蹄疫(FMD)病毒抗原分别混入RAMPS水溶液、含或者不含RAMPS的植物油乳化剂,皮下注射免疫小鼠后检测血清FMD特异性抗体。结果表明,3种物质均可使小鼠血清抗体水平升高,以含RAMPS的植物油乳化剂促进抗体升高作用最为显著。RAMPS偏向于促进IgG2a的升高,而植物油则偏向于促进IgG1的升高。两者结合后大幅度促进了IgG1和IgG2a水平的升高。血清IFN-γ检测结果表明,只有RAMPS和含RAMPS的植物油乳化剂可促进IFN-γ显著升高,而植物油则不能。考虑到含RAMPS植物油乳化剂对FMD疫苗具有显著免疫增强作用,它作为一种兽用疫苗佐剂值得深入研究。 卢一松 徐伟 张岑容 许晔 关然 胡松华关键词:白术多糖 口蹄疫疫苗 植物油 人参皂甙Rg1对HPV16 L2 E6 E7融合蛋白疫苗的免疫佐剂作用研究 2016年 宫颈癌( cervical carcinoma)是威胁女性健康的第二大恶性肿瘤,其危害程度仅次于乳腺癌。据国际癌症中心( In-ternational Agency for Research on Cancer,IARC)统计,全球每年宫颈癌的新发病例约为49.3万,死亡人数约为27.4万。Papovaviridae科的人乳头瘤病毒( human papillomaviruses, HPV)感染是导致宫颈癌发生的重要原因,目前已发现它有170多种亚型,而75%以上的宫颈癌患者感染了16、18、31和45型的HPV病毒。 苏小艳 王云皓 徐伟 吴洁 关然 何珊珊 陈刚 胡松华关键词:人参皂甙RG1 HPV16 蛋白疫苗 宫颈癌发生 E6 E7 NLRP3炎症复合体的体外构建 为体外构建NLRP3 炎症复合体,利用PCR 方法扩增目的 基因NLRP3、IL-1β、ASC和Pro-Caspase-1,分别连接到相应的载体中,构建重组真核表达质粒p3XFLAG-NLRP3、pEGFP-C1-ASC... 石玉华 郑梦洁 徐伟 师福山关键词:质粒构建 蛋白表达 白术多糖对小鼠淋巴细胞的免疫调节作用 被引量:62 2020年 目的:探讨白术多糖对小鼠脾淋巴细胞的免疫调节作用。方法:将白术多糖和ConA或LPS及小鼠脾淋巴细胞在体外共培养,MTT法检测淋巴细胞转化;ELISA法检测细胞培养上清中细胞因子(IL-2、IL-6、IL-10和TNF-α)和IgG含量;RT-qPCR法检测白术多糖联合ConA或LPS对转录因子T-bet、Gata3和NF-κB mRNA表达的影响;流式细胞术检测白术多糖联合LPS对CD3、CD4、CD8和CD19淋巴细胞亚群比例的影响。结果:白术多糖促进ConA诱导的脾脏T淋巴细胞转化、IL-2、IL-6、IL-10和TNF-α分泌和转录因子(T-bet和Gata3)mRNA表达,抑制LPS对脾脏B淋巴细胞的激活,减少TNF-α和IgG分泌,降低NF-κB mRNA表达水平,降低LPS诱导的CD3、CD4和CD8淋巴细胞亚群比例。结论:白术多糖可促进ConA诱导的淋巴细胞转化,但抑制LPS诱导的淋巴细胞转化。 徐伟 方思佳 关然 张岑容 胡松华关键词:白术多糖 淋巴细胞 免疫调节 转录因子 E515-A对猪流行性腹泻病毒灭活疫苗的佐剂作用 2019年 E515-A是一种含人参茎叶皂苷(GSLS)的白油佐剂。将E515-A和含猪流行性腹泻病毒(PEDV)抗原的水相在低剪切力(转速200r·min^(-1))下混合,形成油乳剂疫苗。为观察E515-A对PEDV灭活疫苗的免疫增强作用,将72只ICR小鼠随机分成6组,分别进行2次(间隔2周)皮下注射:(1)0.9%NaCl溶液,(2)PEDV抗原+0.9%NaCl溶液,(3)PEDV抗原+GSLS,(4)PEDV抗原+白油佐剂,(5)PEDV抗原+E515-A和(6)PEDV抗原+氢氧化铝铝胶。于一免后24h采血检测血清IFN-γ水平和NK细胞杀伤活性;于二免后检测血清特异性IgG及IgG1和IgG2a水平,制备脾淋巴细胞检测细胞增殖能力。结果表明,E515-A对于PEDV疫苗诱导的免疫反应具有显著的促进作用,免疫增强效果优于铝胶佐剂。和对照组比较,E515-A油佐剂可以显著促进免疫小鼠的NK细胞杀伤活性,促进细胞因子IFN-γ的产生,增强脾淋巴细胞对刀豆蛋白A(ConA)和脂多糖(LPS)刺激的增殖应答能力,提高血清IgG及其亚类IgG1和IgG2a水平。为增强猪的疫苗免疫效果,E515-A作为猪疫苗的佐剂值得进一步研究。 麻勇棋 徐伟 王越珉 胡松华关键词:人参茎叶皂甙 佐剂 NLRP3炎症复合体的体外构建 2019年 为体外构建NLRP3炎症复合体,利用PCR方法扩增目的基因NLRP3、IL-1β、ASC和Pro-Caspase-1,分别连接到相应的载体中,构建重组真核表达质粒p3XFLAG-NLRP3、pEGFP-C1-ASC、pEGFP-C1-IL-1β、PCI-CASP-HA,利用Lipofectamine2000试剂转染到HEK293T细胞后,采用Western blot方法验证各蛋白的表达情况;通过质粒共转染体外构建NLRP3炎症复合体,采用ELISA方法检测IL-1β生成情况。结果显示,3XFLAG-NLRP3、pEGFP-C1-ASC、pEGFP-C1-IL-1β、PCI-CASP-HA重组质粒均被成功构建,各蛋白于HEK293T细胞内均被成功表达;质粒共转染后ELISA检测到高水平的IL-1β生成,表明NLRP3炎症复合体体外构建成功。NLRP3炎症复合体在体外的成功构建,为进一步研究其激活机制奠定了基础。 石玉华 郑梦洁 徐伟 师福山关键词:质粒构建 蛋白表达 家禽后海穴注射新城疫、禽流感、传染性法氏囊病三联灭活疫苗的免疫效果观察 1引言后海穴位于动物尾根部与肛门连线的凹陷中。在该穴位注射疫苗可提高免疫效果。金海波等人的研究表明,在后海穴接种疫苗可以激活更多的免疫活性细胞,增强免疫应答。本文以鸡、鸭、鹅、番鸭为研究对象,在后海穴注射新城疫、禽流感、... 李邹澍以 迟晓庆 马晓丹 袁丽佳 王勇 崔雪梅 徐伟 胡松华关键词:三联灭活疫苗 传染性法氏囊病 后海穴 新城疫 禽流感 人参茎叶皂苷和硒对伪狂犬疫苗免疫的增强作用 1引言伪狂犬病(Pr)是阻碍养猪业健康发展的重要疫病。很多情况下,动物接种疫苗后不能产生足够免疫反应,尤其是仔猪,在母源抗体下降后和疫苗诱导的抗体上升前,体内抗体低于保护性水平,处于"易感窗口期",导致动物易发病。本文研... 王勇 袁丽佳 徐伟 迟晓庆 李邹澍以 胡松华关键词:母源抗体 人参茎叶皂苷