孙涛
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 供职机构：天津师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：天津市应用基础与前沿技术研究计划新疆维吾尔自治区科技支疆项目天津市科技支撑计划重点项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 应用组织芯片技术分析53BP1在结肠癌中的表达及意义被引量：4
- 2019年
- 为了探究p53结合蛋白1(53BP1)与结肠癌发生发展的关系,制备了53BP1多克隆抗体,经蛋白免疫共沉淀(IP)、免疫印迹杂交(WB)、免疫荧光染色(IF)和免疫组织化学染色实验(IHC)验证了抗体的特异性.应用临床结肠癌组织标本,通过免疫组织化学染色实验检测,结合临床病例研究53BP1在结肠癌发生发展中所起的作用.经过比对发现31例结肠癌病患的癌组织与癌旁组织中53BP1的表达存在差异,结合ONCOMINE数据库检索结果,发现53BP1蛋白分子在结肠癌组织中的表达明显高于癌旁组织,这种表达差异与肿瘤大小和TNM分期显著相关.在直径大于等于4 cm的肿瘤中,癌组织的53BP1蛋白表达显著高于癌旁组织(P <0.05);在结肠癌早期(Ⅰ-Ⅱ期),癌组织的53BP1表达比例高于其他分期(P <0.05).这些研究结果表明,53BP1蛋白高表达可作为结肠癌早期(Ⅰ-Ⅱ期)的潜在标志.
- 孙涛孙涛张园
- 关键词：结肠癌癌组织TNM分期
- 应用组织芯片技术分析磷酸化53BP1在结肠癌中的表达及其意义
- 2019年
- p53结合蛋白1(p53 binding protein,53BP1)是一种参与DNA损伤检查点活化和DNA损伤修复的关键蛋白之一。已知在结肠癌中,BRCA1基因的突变会使患结肠癌的风险增加,而磷酸化53BP1是其功能的表现形式。为研究磷酸化53BP1与结肠癌发生发展的关系,我们制备特异性磷酸化53BP1多克隆抗体,经RNA干扰技术、蛋白免疫共沉淀(Co-IP)、蛋白免疫印迹(WB)等实验验证抗体的特异性。随后通过免疫组织化学染色(IHC)方法对31例临床结肠癌组织标本进行染色,并结合临床病例资料进行分析。实验结果表明,磷酸化53BP1在结肠癌组织中的表达明显高于癌旁组织,且在TNM分期Ⅰ-Ⅱ期结肠癌患者中,磷酸化53BP1高表达病例数比例(13/16)显著高于Ⅲ-Ⅳ期患者中的高表达病例数比例(7/15)(p<0.05),同时磷酸化53BP1高表达病例数比例在未发生淋巴结转移和发生淋巴结转移的病例中差异显著(p<0.05)。这些研究结果表明,磷酸化53BP1高表达可作为结肠癌分期(Ⅰ-Ⅱ期)和未发生淋巴结转移的潜在标志。
- 徐蕾徐蕾张壮壮孙涛孙涛孙涛
- 关键词：结肠癌免疫组化组织芯片
- 黏着斑蛋白supervillin对胃癌细胞侵袭的促进作用
- 2017年
- 为了研究黏着斑蛋白supervillin(SVIL)在胃癌细胞(SGC)侵袭转移过程中所发挥的作用,利用脂质体转染的方法,将人源的p QCXIP-supervillin(pQCXIP-SVIL)质粒和pEGFP-C1质粒分别转入SGC细胞中,用G418或嘌呤霉素筛选得到稳定表达的GFP-SVIL(SGC-GFP-SVIL)和GFP(SGC-GFP-C1)细胞株,然后应用蛋白免疫印迹法(Western Blot)对这些细胞株进行鉴定,最后应用细胞侵袭实验对SGC、SGC-GFP-C1及SGC-GFP-SVIL细胞的侵袭能力进行比较,并对细胞SVIL、DNA以及皮层肌动蛋白进行免疫荧光染色.结果证实本研究成功构建了SGC-GFP-SVIL和SGC-GFP-C1细胞株.同SGC和SGC-GFP-C1细胞相比,过表达GFP-SVIL蛋白分子的SGC-GFP-SVIL细胞的侵袭能力更强.GFP-SVIL与皮层肌动蛋白在细胞中存在共定位,皮层肌动蛋白是侵袭性伪足的标志蛋白,与SGC及SGC-GFP-C1细胞相比,SGC-GFP-SVIL细胞中侵袭性伪足数量明显增加.根据这些结果认为,SVIL可能通过调节皮层肌动蛋白的表达和影响该蛋白分子在侵袭性伪足上的定位,从而影响胃癌细胞的侵袭能力.
- 冀美超姜虹羽于东渤孙涛鲍鹏董智雄朱长军
- 关键词：皮层肌动蛋白胃癌细胞细胞侵袭
