体电子显微成像技术(volume electron microscopy)可以在更大三维空间中对样品进行纳米分辨率三维结构分析,获取样品内部结构的三维模型和各结构之间的位置关系、体积比例等信息,更加全面地反映样品的超微结构与功能的关系。本文利用基于聚焦离子束扫描电镜的体电子显微成像技术对人源肝癌细胞的三维超微结构进行分析,获得了多种细胞器包括细胞核、线粒体、内质网和高尔基体等的高分辨率三维结构模型。
以甘油光学清除的小鼠皮肤为研究对象,通过二次谐波(second-harmonic generation,SHG)成像和透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)研究光学清除对组织超微结构的影响.SHG成像结果表明,甘油处理能够显著增大信号强度并提升成像深度,证实其可作为一种有效的光学清除剂.通过TEM对比观察常规化学固定与高压冷冻(high-pressure freezing,HPF)固定样品的超微结构,发现HPF能更好地保持组织自然状态.进一步分析显示,甘油处理虽使胶原纤维直径减小,但其排列周期未发生明显变化,说明光学清除过程未对胶原纤维结构造成损伤.上述结果表明,甘油具有高效、安全的光学清除效果,且在光学清除过程中不会引起组织超微结构的改变.结合SHG无损光学成像技术与HPF的超微结构保留能力,可为相关科学研究提供技术支撑.
