- 基于UPLC-Q-TOF-MS联合网络药理学探讨驱虫斑鸠菊注射液诱导黑色素积累的作用机制被引量：7
- 2023年
- 评价驱虫斑鸠菊注射液(VAI)促黑色素积累的效应机制。建立丙基硫氧嘧啶(PTU)体内脱色素斑马鱼模型,结合B16F10细胞体外模型评价VAI诱导黑色素积累效应。通过UPLC-Q-TOF-MS技术鉴定VAI化学成分,采取网络药理学方法预测VAI的潜在靶点与通路,建立“VAI成分-靶点-通路”网络图,基于拓扑学特征筛选药效分子。分子对接验证药效分子与关键靶点的结合。结果显示VAI呈剂量和时间依赖性促进B16F10细胞酪氨酸酶活性和黑色素生成,且能恢复上述斑马鱼模型体内黑色素。从VAI中共鉴定出56种化合物,其中有黄酮类(15/56)、萜类(10/56)、酚酸类(9/56)、脂肪酸类(9/56)、甾体类(6/56)和其他(7/56)。网络药理学手段分析筛选出芹菜素、金圣草黄素、丁香脂素、紫铆花素4个潜在质量标志物,涉及61个靶点和65条通路,分子对接验证了其与TYR、NFE2L2、CASP3、MAPK1、MAPK8、MAPK14结合并发现VAI能促进B16F10细胞内MITF、TYR、TYRP1、DCT等基因mRNA的表达。该文通过UPLC-Q-TOF-MS和网络药理学技术确定了VAI抗白癜风的物质基础,优选出芹菜素、金圣草黄素、丁香脂素、紫铆花素为其质量标志物,验证了其促黑色素生成的药效和内在机制,为质量控制和进一步临床研究提供依据。
- 罗林张晏源王程黄思露王晓琴张波
- 关键词：驱虫斑鸠菊注射液网络药理学
- 干姜干热药性活性分子的筛选与抗小鼠低温冻伤的甲状腺氧化应激保护作用机制被引量：9
- 2022年
- 目的 探讨干姜干热药性的药理特点及对低温冻伤的保护作用。方法 以甲状腺功能评价为研究内容,建立低温冻伤小鼠模型(-20±1)℃,通过形态学与分子生物学等手段评价干姜醇提物对小鼠低温冻伤的保护作用,通过系统药理学方法筛选出活性成分与关键靶标。建立体外人甲状腺乳头状癌BCPAP细胞氧化损伤模型并评价相关活性分子的保护作用。结果 系统药理方法筛选出姜黄素等代表性成药分子,预测靶标富集在甲状腺激素信号通路、FoxO通路等5条信号通路。干姜醇提物显著延长低温冻伤小鼠的生存时间,升高血清中游离三碘甲状腺原氨酸(free triiodothyronine,FT3)和游离甲状腺素(free thyroxine,FT4)水平(P<0.05、0.01),上调小鼠甲状腺功能相关基因钠/碘协同转运蛋白(sodium/iodide cotransporter,Nis)、甲状腺过氧化物酶(thyroid peroxidase,Tpo)、甲状腺球蛋白(thyroglobulin,Tg)m RNA表达水平(P<0.01),下调促甲状腺素受体(thyroid stimulating hormone receptor,Tshr)m RNA表达水平(P<0.01),改善低温导致的甲状腺滤泡破损。体外实验发现干姜代表成分姜黄素、6-姜酚对H2O2诱导的BCPAP细胞损伤有显著保护作用(P<0.05、0.01)。结论 干姜及其活性成分姜黄素、6-姜酚能够通过抗甲状腺氧化应激、促甲状腺功能从而保护小鼠低温冻伤。
- 苗艳丰卫贺李诚张静李照雪王晓琴张波
- 关键词：干姜干热甲状腺6-姜酚
- CK-MB质量与活性的联合检测在急性心肌梗死早期诊断中的价值被引量：4
- 2022年
- 目的探讨肌酸激酶同工酶(CK-MB)质量与活性的联合检测在急性心肌梗死(AMI)早期诊断中的意义。方法收集2019年1月至10月在成都大学附属医院就诊的80例疑似AMI患者作为研究对象,根据性别分为男性组(46例)和女性组(34例),AMI的确诊参照相关诊断标准。采用免疫抑制酶法检测CK-MB活性,电化学发光技术检测CK-MB质量和肌钙蛋白(cTnI),评估CK-MB质量、CK-MB活性及CK-MB质量与活性的联合检测在不同性别组中的诊断价值,并进一步分析与cTnI的诊断一致性。结果在男性组及女性组中,CK-MB联合检测的诊断准确度均高于单独CK-MB活性和质量检测,误诊率均低于单独CK-MB质量和活性检测,男性组和女性组受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)分别为0.742、0.711。CK-MB质量与活性的联合检测对AMI的诊断与cTnI对AMI的诊断也具有较好的一致性,男性组和女性组中Kappa系数分别为0.781和0.704(P<0.05)。结论CK-MB质量与活性的联合检测可为AMI的早期诊断提供更好的参考依据,具有重要的临床价值。
- 李引钰叶登华张佳婕张波
- 关键词：急性心肌梗死CK-MB质量CK-MB活性
- 阿霉素调控MRP1/Nrf2通路诱导慢性髓细胞白血病细胞自噬
- 2025年
- 目的 探究阿霉素(Adriamycin,ADM)调控MRP1/Nrf2通路诱导慢性髓细胞白血病(Chronic myeloid leukemia,CML)细胞自噬机制。方法 MTT法检测ADM和自噬抑制剂氯喹(Chloroquine,CQ)对K562和K562/ADR细胞增殖抑制的影响;Gene Expression Omnibus(GEO)数据库收集ADM敏感株K562和耐药株K562/ADR的基因集各三组并进行mRNA表达水平分析和差异基因KEGG富集分析;流式细胞术检测细胞内ADM的平均荧光强度(Mean fluorescence intensity,MFI);丹酰戊二胺法检测胞质酸化程度;Western blotting检测耐药和自噬相关蛋白的表达水平。结果 ADM对K562和K562/ADR细胞生长均表现为抑制且量效和时效递增趋势较为一致;GEO数据库结果显示K562和K562/ADR细胞含有较高的LC3-Ⅱ,P62,Nrf2和MRP1 mRNA表达水平;分子对接显示ADM与P62,Nrf2和MRP1呈现较高的结合活性(结合能<-7.0 kcal·mol^(-1));ADM抑制MRP1和Nrf2的蛋白表达水平和促进LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值上升和抑制P62的表达;CQ拮抗自噬后,ADM对耐药株K562/ADR细胞的抑制作用明显增强,细胞内MFI增强。结论 ADM抑制Nrf2和MRP1的表达并诱导细胞自噬,自噬抑制提高K562和K562/ADR细胞对ADM的敏感性,促进了ADM的摄取和减轻细胞耐药性。
- 陈鹏马雨贤昌潇周宗元张波
- 关键词：阿霉素慢性髓细胞白血病MRP1NRF2自噬耐药
- 黑色素代谢途径在香叶木素改善紫外诱导的ARPE-19细胞损伤中的保护作用
- 2024年
- 目的探讨香叶木素对年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration,AMD)保护作用及机制。方法基于GEO数据库分析AMD与正常病例样本视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)细胞差异表达基因。建立302 nm紫外线B(ultraviolet B,UVB)照射人视网膜上皮细胞(human retinal pigment epithelial cells,ARPE-19)细胞损伤模型,评估0.6~40μmol·L^(-1)的香叶木素、10~160μmol·L^(-1)的左旋多巴和1~100μg·L^(-1)的黑色素的药效,并探讨其抗AMD相关通路。检测黑色素含量、酪氨酸酶活性及相关蛋白表达水平。结果经GSE91087筛选发现AMD病例样本组RPE细胞中存在显著差异表达基因,如MCHR1、TYR、TYRP1等,确定黑色素合成及酪氨酸酶代谢通路为AMD的关键通路;100μmol·L^(-1)的黑色素和60μmol·L^(-1)的左旋多巴明显提高紫外照射ARPE-19细胞下的细胞活力,并降低细胞坏死/凋亡的比例;10μmol·L^(-1)的香叶木素提高细胞活力;逆转UVB降低的ARPE-19细胞黑色素含量及酪氨酸酶活性;并提高TYR、TRP-1、TRP-2的蛋白表达,证实了香叶木素在促进黑色素合成方面的作用。结论香叶木素通过酪氨酸代谢途径诱导黑色素的合成,从而改善紫外诱导的ARPE-19细胞损伤。
- 马绍壮冀欣业张晏源张波
- 关键词：年龄相关性黄斑变性黑色素酪氨酸酶
- 温里祛寒中药方剂抗寒活性成分筛选及药效学验证被引量：1
- 2023年
- 目的基于中医“治寒以热”辨证理论和温里祛寒方剂温中散寒的功效,对温里祛寒方中抗寒活性成分筛选并进行体外药效学验证。方法基于大数据分析温里祛寒方剂药材分布特性;通过系统药理学方法进行活性成分的虚拟筛选和关键靶点的富集分析。建立体外BCPAP细胞低温联合缺氧模型,通过代表成分的细胞活力及调控活性氧水平、抗凋亡/坏死情况进行体外药效学验证。结果共收集到温里祛寒方剂147方,涉及中药材153味,药性主要为温/热、辛/苦,归脾肾肝经,具有生热、发散风寒之功效;药材中的化学成分主要参与细胞对外界物质及环境刺激的反应、体温调节等生物过程和HIF-1信号通路、细胞凋亡、甲状腺激素合成等信号通路的调节。体外药效学结果显示,代表成分阿魏酸、姜黄素、肉桂醛、6-姜酚、甘草苷能够有效抑制低温联合缺氧诱导BCPAP细胞活力的降低,改善细胞氧化应激水平和凋亡/坏死情况(P<0.05)。分子对接结果显示活性成分与关键蛋白具有良好的结合活性(结合能<-5.0 kcal·mol^(-1))。结论温里祛寒方剂及其活性成分能够帮助机体应对低温刺激,其抗寒作用与改善包括甲状腺在内的神经内分泌系统损伤相关。
- 卫贺苗艳丰张静李照雪王晓琴张波
- 关键词：抗寒缺氧损伤
- 阿卡宁下调Trx/Akt通路诱导急性髓系白血病细胞凋亡的作用研究被引量：5
- 2023年
- 目的 探讨新疆紫草Lithospermum erythrorhizon代表成分阿卡宁对急性髓系白血病细胞HL-60的抑制作用及机制。方法 取对数生长期HL-60细胞,采用台盼蓝法检测阿卡宁、紫草素处理后的细胞增殖抑制率;Hoechst 33258染色观察细胞形态;流式细胞仪检测细胞凋亡率;通过系统药理学方法筛选出阿卡宁以及急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)的共同靶点并分析得到关键靶点。通过邻苯二甲醛(o-phthalaldehyde,OPA)荧光探针法、差示扫描荧光分析实验在体外分子水平验证化合物与靶点的结合能力。通过Western blotting检测凋亡通路标志分子半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cysteinasparate protease-3,Caspase-3)、cleaved Caspase-3、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2associated X protein,Bax)蛋白表达。结果 阿卡宁呈剂量相关性抑制HL-60细胞增殖。Hoechst染色后荧光显微镜下可见阿卡宁处理后的HL-60细胞呈现细胞缩小、染色质颜色加深、染色质逐渐碎片化等的凋亡形态;与对照组比较,阿卡宁诱导的细胞凋亡率显著升高(P<0.001),Bcl-2蛋白表达水平显著下调(P<0.01),Bax、cleaved Caspase-3蛋白表达水平均显著上调(P<0.01、0.001);通过系统药理学筛选得到阿卡宁和AML共有靶点96个,对共有靶点分析得到蛋白质-蛋白质相互作用网络(protein-protein interaction,PPI)中度值较高的靶点是蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cystein-asparate protease-3,CASP3)、细胞色素C(cytochrome C,CYCS)、硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase,TXNRD)等。基因本体(gene ontology,GO)功能和京都基因与基因百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路分析表明阿卡宁治疗AML主要涉及RNA聚合酶II启动子转录的正调控、细胞凋亡过程的正调控及信号转导等生物学过程,涉及的分子功能有蛋白结合、氧化还原酶活性,信号通路主要包括�
- 徐宏宏昌潇罗琼张波
- 关键词：紫草凋亡急性髓系白血病细胞
- 头孢尼西钠的合成工艺改进被引量：2
- 2015年
- 目的研究头孢尼西钠的合成新工艺。方法 7-氨基头孢烷酸(7-ACA)与5-巯基-1,2,3,4-四氮唑-1-甲基磺酸双钠盐(SMT)反应制备得到7-氨基-3-[[1-磺酸甲基-1-H-四唑-5-基)硫基]甲基]头孢霉烷酸(7-AMT)。7-AMT与D-(-)-甲酰基扁桃酰氯(FMC)发生酰化反应,再用盐酸处理去除甲酰基得头孢尼西酸,而后转化为头孢尼西钠。结果产品总收率70.8%,质量符合中国药典标准。结论 本工艺简单可行,为中试生产提供了依据。
- 陈林石克金李江红张波曹胜华
- 关键词：头孢尼西钠7-ACASMTFMC
- 刺甘草查尔酮下调ASK1-JNK信号通路抗FFA诱导的非酒精性脂肪性肝病被引量：4
- 2023年
- 目的探究刺甘草查尔酮(echinatin,Ech)对游离脂肪酸(free fatty acids,FFA)诱导人肝癌(HepG2)细胞的非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)模型的影响及作用机制。方法实验分组为对照组、FFA模型组、Ech组(0.3、1、3μmol·L^(-1));通过细胞形态学和化学荧光法分析细胞内脂质积累、线粒体损伤、氧化应激以及凋亡情况;分子对接预测Ech与ASK1和JNK蛋白的亲和力;Western blot分析NF-κB p65、BAX以及ASK1-JNK信号通路相关蛋白表达情况。结果相较于FFA模型组,Ech组细胞脂质积累明显减轻,线粒体损伤以及氧化应激情况得到改善,凋亡率明显下降,并且NF-κB p65、BAX、p-ASK1、JNK、p-JNK的蛋白表达量均明显降低。结论Ech改善FFA诱导的HepG2细胞脂质积累、线粒体功能障碍、氧化应激、细胞凋亡以及炎症反应,可能与下调ASK1-JNK信号通路有关。
- 何倞婧黄欣张波张波
- 关键词：非酒精性脂肪性肝病游离脂肪酸HEPG2细胞
- 紫草防治血热证的活性成分挖掘与机制探讨被引量：4
- 2023年
- 目的在血热证小鼠模型上评价紫草清热机理。方法综合网络药理学方法筛选成药性分子,构建2,4-二硝基苯酚(2,4-Dinitrophenol,DNP)诱导的血热证小鼠模型及高温联合脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的血热证小鼠模型,评价药效并分析关联靶标和相关因子。结果收集紫草素相关靶标277个,主要涉及炎症反应、氧化反应和凝血反应等生物过程。代表化合物紫草素显著改善血热证小鼠的主要证候,降低两种模型炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α水平,减少氧化损伤指标LPO、MDA含量;抑制NF-κB p65的表达,上调Nrf2蛋白是主要作用机制。结论紫草素通过抑制炎症和提高抗氧化能力发挥防治血热证的药理作用,提供了紫草防治血热症的理论依据。
- 罗琼李天一张珂冀欣业陈韩英张波
- 关键词：血热证紫草紫草素炎症反应凝血紊乱
