张宇航
- 作品数：8 被引量：15H指数：3
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- 地西他滨对猪圆环病毒2型的体外抑制作用
- 2023年
- 猪圆环病毒2型(PCV2)作为无囊膜单股负链环状DNA病毒,能引起感染猪的免疫抑制,是猪圆环病毒相关疾病的主要病原体,广泛传播于世界各地,给全球养猪业造成了巨大损失。为探究地西他滨(DAC)对PCV2增殖的影响及其作用机制。本研究构建了感染PCV2的PK-15细胞模型,使用CCK-8法检测DAC对PK-15细胞的细胞毒性,进而使用荧光定量PCR、间接免疫荧光和Western blot检测DAC对PCV2增殖水平的影响;通过间接免疫荧光法标记5甲基胞嘧啶表征DAC对细胞基因组DNA全局甲基化的影响;通过RNA干扰技术在PK-15细胞中沉默DAC的作用靶点DNA甲基转移酶1(Dnmt1),进一步探究DAC抑制PCV2增殖的作用机理。结果显示,DAC在20μmol·L^(-1)时才具有轻微的细胞毒性,并在浓度为10μmol·L^(-1)时即表现出明显的抗PCV2活性,可以抑制不同时间的PCV2增殖。DAC处理细胞后能显著降低PK-15细胞基因组DNA的甲基化,并诱导Ⅰ型干扰素(Ⅰ-IFN)和干扰素刺激基因(ISGs)的表达。沉默DAC的作用靶点Dnmt1能显著抑制PCV2的增殖,且同样诱导I-IFN和ISGs的表达。本研究证实DAC能够有效抑制PCV2的增殖,且发现DAC能促进I-IFN和ISGs的表达并抑制DNA的甲基化,推测DAC抗PCV2病毒的功能与I-IFN和ISGs的表达上调有关,提示DAC具备开发成PCV2临床抗病毒药物的潜力,还揭示Dnmt1是激活宿主固有免疫抗病毒通路的潜在靶点,为新的PCV2抗病毒药物研发提供理论依据。
- 范锦全张宇航唐午阳赵欣宇李丕顺郑晓峰
- 关键词：地西他滨猪圆环病毒抗病毒固有免疫
- 猪传染性胸膜肺炎研究进展被引量：7
- 2019年
- 猪传染性胸膜肺炎是由猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)感染引起的以急性出血和慢性纤维素性胸膜肺炎为特征的一种高度传染性疾病,可引起患猪大量死亡,为养猪业的三大呼吸道疾病之一。流行病学研究发现猪传染性胸膜肺炎多呈混合感染,且有一些非典型菌株流行。除毒素外,蛋白酶、尿酶、黏附素、APP的糖基化系统、双组分系统CpxA/CpxR等也参与致病的过程。另外, App的脂多糖(LPS)可使宿主肺部的细胞产生大量的致炎细胞因子,参与肺部炎症的形成。病原与呼吸道上皮细胞吸附的表面分子、新致病因子特别是引起细胞因子暴发的病原分子的鉴定及其诱导的免疫力,将为组合疫苗的研制提供基础。研究APP感染与宿主免疫状况的关系将为免疫调节剂的筛选提供依据。文章对近年来该病的流行情况、发病机制和疫苗研究进展进行了综述,旨在为该病的防治和未来的研究方向提供参考。
- 张宇航黄复深
- 关键词：猪传染性胸膜肺炎胸膜肺炎放线杆菌发病机理疫苗
- 基于ASFV转录报告系统的高通量筛选将臭椿酮鉴定为一种广谱抗病毒化合物
- 非洲猪瘟(ASF)是一种急性、高度传染性和致命的猪病毒性疾病,正在严重危害全球养猪业。但是,目前为止没有可用于ASF防控的权威疫苗和抗病毒药物。非洲猪瘟病毒(ASFV)是ASF的病原体,在ASFV蛋白中,p72是病毒体中...
- 张宇航张振江张帆张继文焦俊侯敏钱年超赵东明郑晓峰谭旭
- 猪胸膜炎放线杆菌重组外膜蛋白LOLA诱导小鼠产生免疫保护力的研究被引量：4
- 2020年
- 为筛选出具有广谱抗猪传染性胸膜肺炎作用的疫苗候选分子,本研究利用PCR技术从血清1型猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(App)基因组克隆外膜蛋白(Omp)lola基因。经生物信息学分析显示,App lola基因由633 bp组成,编码210个氨基酸,不同的血清型之间具有很高的同源性。将App lola克隆至pET-32a(+),转化大肠杆菌,表达重组蛋白rLOLA。取4周龄小鼠60只,随机分为6组,分别于0、2、4周经皮下免疫:弗氏不完全佐剂(IFA)+10μg rLOLA(低剂量组)、IFA+30μg rLOLA(中剂量组)、IFA+50μg rLOLA(高剂量组)、30μg rLOLA(rLOLA组)、IFA(对照组)和生理盐水(对照组)。ELISA检测结果显示,第3次免疫接种后相较于对照组(IFA组和生理盐水组),实验组小鼠血清IgG水平均明显升高,尤以高剂量组小鼠(IFA+50μg rLOLA)更显著(p<0.01)。于第3次免疫后2周,利用10×LD50 App对小鼠腹腔注射攻毒,5 d后对照组小鼠全部死亡,30μg rLOLA、IFA+50μg rLOLA、IFA+30μg rLOLA、IFA+10μg rLOLA免疫组小鼠存活率分别为20%、40%、20%和10%。上述结果表明,IFA+rLOLA可以诱导部分抗App攻击感染的免疫保护作用。本研究为进一步研究广谱抗猪传染性胸膜肺炎疫苗积累了基础资料。
- 张宇航张雨龙杨婷婷黄复深
- 关键词：小鼠
- AKT三种亚型基因敲除对小鼠胚胎干细胞自我更新和分化的影响
- 2025年
- AKT,又称为蛋白质激酶B(protein kinase B, PKB),在细胞增殖和代谢过程中发挥关键作用。AKT有3种亚型:AKT1、AKT2和AKT3,这3种亚型对小鼠胚胎干细胞(mouse embryonic stem cells, mESCs)多能性和分化的影响尚不明确。本研究旨在探讨AKT亚型缺失对小鼠胚胎干细胞自我更新和分化的影响。本文利用CRISPR/Cas9基因编辑技术建立AKT的3种亚型基因敲除的细胞系,通过蛋白质印迹(Western blot)、流式细胞术、qRT-PCR、CCK-8、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, AP)染色和RNA-seq对其表型和分子变化进行分析。Akt的3种亚型基因敲除的细胞系构建成功,Akt1和Akt2的缺失会抑制小鼠胚胎干细胞的增殖,Akt任意一种亚型的缺失不会影响多能性基因在mRNA水平和蛋白质水平的表达,但在拟胚体形成过程中,Akt的3种亚型的缺失均会影响3个胚层基因的mRNA水平表达。转录物组分析结果表明,与野生型mESCs相比,Akt1、Akt2和Akt3缺失后分别有995、547和429个差异表达基因(|log2FC|≧1,P<0.05),这3种亚型调控的差异表达基因存在部分重叠。综上,Akt的3种亚型的独立缺失不影响小鼠胚胎干细胞干性的维持,但是他们对于分化至关重要。Akt的3种亚型可以共同调控基因的表达,同时也保留了各自的调控特异性。本研究为理解Akt的3种亚型在干细胞生物学中的独特和重叠作用提供了基础,突显了它们在维持干细胞功能和分化中的重要性。
- 杨淇汤帅张林林唐午阳豆澳祥张宇航李丕顺郑晓峰
- 关键词：小鼠胚胎干细胞多能性
- 地西他滨对猪圆环病毒2型的体外抑制作用
- 引言/目的猪圆环病毒2型(PCV2)作为无囊膜单股负链环状DNA病毒,能引起感染猪只的免疫抑制,是猪圆环病毒相关疾病的主要病原体,广泛传播于世界各地,给全球养猪业造成了巨大损失。为探究地西他滨(DAC)对PCV2增殖的影...
- 范锦全张宇航唐午阳赵欣宇李丕顺郑晓峰
- 关键词：地西他滨猪圆环病毒抗病毒固有免疫
