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正、反义组织金属蛋白酶抑制剂1基因转染对肾小球系膜细胞凋亡及相关基因表达的影响被引量：10: 2001年; 目的　探讨正、反义组织金属蛋白酶抑制剂 1(TIMP 1)对肾小球系膜细胞凋亡的影响。方法　利用前期工作中克隆出的人TIMP 1全长cDNA ,分别构建出表达正义及反义TIMP 1的重组真核表达载体pcDNA3 TIMP 1(PTs)、pcDNA3 ATIMP 1(PTas) ,并将上述重组质粒转染至大鼠的肾小球系膜细胞中 ,Northern杂交检测正、反义TIMP 1的表达。无血清诱导大鼠系膜细胞凋亡 ,利用DNA缺口末端标记 (TUNEL)分析、DNA电泳技术在无血清后的不同时间点检测细胞凋亡 ,RT PCR的方法检测凋亡相关基因的表达。结果　转染PTas的大鼠系膜细胞可以高效表达反义TIMP 1,于无血清诱导 12h开始发生凋亡 ;无外源基因转染及空载体转染的大鼠系膜细胞在无血清 48h发生凋亡 ;而转染正义TIMP 1的大鼠系膜细胞可高效表达正义TIMP 1,在无血清 4d时才发生凋亡。TIMP 1的高表达或低表达可引起大鼠系膜细胞bax的下调或上调 ,但并不影响bcl 2的表达。结论　TIMP 1可以抑制无血清诱导的大鼠系膜细胞的凋亡 ,反义TIMP 1对之则有促进作用。这提示TIMP 1在肾脏除了抑制细胞外基质的作用外还具有新的功能。; 林洪丽陈香美傅博于志恒李文歌王建中; 关键词：金属蛋白酶1组织抑制剂脱噬作用基因转染肾小球系膜

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王建中

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