傅博
- 作品数：5 被引量：51H指数：5
- 供职机构：中国人民解放军更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 血管紧张素Ⅱ2型受体基因缺失抑制诱导的成纤维细胞凋亡被引量：5
- 1998年
- 目的探讨血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）２型受体（ＡＴ２）基因表达与成纤维细胞凋亡的关系。方法分别从正常（ＡＴ２＋／＋）和ＡＴ２受体基因缺失（ＡＴ２／）胎鼠培养皮肤成纤维细胞，经ＡｎｇⅡ诱导后，采用ＲＴＰＣＲ检测成纤维细胞ＡｎｇⅡ的ＡＴ１和ＡＴ２受体ｍＲＮＡ表达，分别用基因组ＤＮＡ电泳、ＴＵＮＥＬ染色和流式细胞仪等定性和定量方法检测细胞的凋亡改变。结果经１０８、１０７、１０６和１０５ｍｏｌ／Ｌ浓度的ＡｎｇⅡ刺激４８小时，成纤维细胞的ＡＴ１和ＡＴ２受体基因表达均有显著增强，并与浓度呈正相关。经１０６和１０５ｍｏｌ／Ｌ浓度的ＡｎｇⅡ诱导７２小时，ＡＴ２＋／＋成纤维细胞出现了明显的标志着细胞凋亡的基因组ＤＮＡ片段化，凋亡细胞分别是（１２３±２７）％和（２１７±６７）％，而ＡＴ２／成纤维细胞则未出现明显的细胞凋亡改变。结论ＡＴ２受体基因缺失后，抑制了ＡｎｇⅡ介导的成纤维细胞凋亡。
- 李文歌陈香美叶一舟傅博傅博傅博
- 关键词：受体成纤维细胞细胞凋亡
- 血管紧张素Ⅱ2型受体抑制成纤维细胞增殖和纤维连接蛋白分泌被引量：13
- 1998年
- 目的研究血管紧张素Ⅱ２型受体（ＡＴ２）对１型受体（ＡＴ１）介导的细胞增殖和纤维连接蛋白分泌的影响。方法分别从ＡＴ２受体基因缺失和正常基因型的１６天孕龄胎鼠培养皮肤成纤维细胞，观察两种成纤维细胞在血管紧张素Ⅱ（１０－８ｍｏｌ／Ｌ）刺激下细胞增殖和产生纤维连接蛋白的情况。结果在血管紧张素Ⅱ刺激下，ＡＴ２受体缺失组的成纤维细胞（０４６２±００２６）增殖能力明显强于正常组成纤维细胞（０３８９±００２１，Ｐ＜００１），纤维连接蛋白基因及蛋白质表达与正常组成纤维细胞比较显著增加，（３４１±４１）％、（１６２±２３）％（Ｐ＜００１）。
- 李文歌陈香美叶一舟傅博
- 关键词：成纤维细胞血管紧张素IIAT2受体
- 白介素1β对肾小球系膜细胞表达纤维蛋白溶解酶原激活物抑制物-1和纤维连接蛋白的影响被引量：16
- 1999年
- 目的探讨白介素１β（ＩＬ１β）对人肾小球系膜细胞表达纤维蛋白溶解酶原（纤溶酶原）激活物抑制物１（ＰＡＩ１）和纤维连接蛋白（ＦＮ）的影响。方法应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交检测体外培养的肾小球系膜细胞在ＩＬ１β刺激后ＰＡＩ１和ＦＮ的ｍＲＮＡ表达，采用纤维蛋白平板法检测系膜细胞培养上清中ＰＡＩ１的活性，利用ＥＬＩＳＡ法检测ＦＮ的水平。结果ＩＬ１β刺激组系膜细胞ＰＡＩ１和ＦＮｍＲＮＡ的表达显著增高（与对照组比，Ｐ＜００５），细胞培养上清中ＰＡＩ１的活性和ＦＮ的水平亦明显增加（与对照组比，Ｐ＜００１）。结论ＩＬ１β可以上调系膜细胞ＰＡＩ１和ＦＮ蛋白质及ｍＲＮＡ的表达，提示ＩＬ１β可能通过抑制细胞外基质降解和增加细胞外基质合成而导致细胞外基质的积聚。
- 林洪丽陈香美程庆砾叶一舟傅博于力方
- 关键词：肾小球疾病IL-1ΒPAI-1纤维连接蛋白
- 人TIMP-1 cDNA克隆、真核表达载体构建及在COS-7细胞中的表达被引量：8
- 2000年
- 根据 Gen Bank中 TIMP- 1基因的碱基序列 ,用 RT- PCR方法从人的正常肾组织中克隆出包含信号肽在内的 TIMP- 1全长 c DNA序列 .采用 T- A克隆的方法将之插入 p CRR2 .1中间载体 ,DNA测序证实该片段序列与文献报告的完全一致 .利用亚克隆的方法将 TIMP- 1 c DNA片段克隆到 pc DNA3载体上 ,构建出 pc DNA3/ TIMP- 1的真核表达载体 ,通过脂质体 DOTAP转染至 COS-7细胞 ,Northern印迹及原位杂交证实在 COS- 7细胞上获得人 TIMP- 1的高效表达 ,细胞增殖实验表明 TIMP- 1的高产表达可促进 COS- 7细胞的增殖 ,证实了所转染人 TIMP-
- 林洪丽陈香美于志恒李文歌傅博public.bta.net.cn
- 关键词：TIMP-1基因克隆糖蛋白
- 正、反义组织金属蛋白酶抑制剂1基因转染对肾小球系膜细胞凋亡及相关基因表达的影响被引量：10
- 2001年
- 目的 探讨正、反义组织金属蛋白酶抑制剂 1(TIMP 1)对肾小球系膜细胞凋亡的影响。方法 利用前期工作中克隆出的人TIMP 1全长cDNA ,分别构建出表达正义及反义TIMP 1的重组真核表达载体pcDNA3 TIMP 1(PTs)、pcDNA3 ATIMP 1(PTas) ,并将上述重组质粒转染至大鼠的肾小球系膜细胞中 ,Northern杂交检测正、反义TIMP 1的表达。无血清诱导大鼠系膜细胞凋亡 ,利用DNA缺口末端标记 (TUNEL)分析、DNA电泳技术在无血清后的不同时间点检测细胞凋亡 ,RT PCR的方法检测凋亡相关基因的表达。结果 转染PTas的大鼠系膜细胞可以高效表达反义TIMP 1,于无血清诱导 12h开始发生凋亡 ;无外源基因转染及空载体转染的大鼠系膜细胞在无血清 48h发生凋亡 ;而转染正义TIMP 1的大鼠系膜细胞可高效表达正义TIMP 1,在无血清 4d时才发生凋亡。TIMP 1的高表达或低表达可引起大鼠系膜细胞bax的下调或上调 ,但并不影响bcl 2的表达。结论 TIMP 1可以抑制无血清诱导的大鼠系膜细胞的凋亡 ,反义TIMP 1对之则有促进作用。这提示TIMP 1在肾脏除了抑制细胞外基质的作用外还具有新的功能。
- 林洪丽陈香美傅博于志恒李文歌王建中
- 关键词：金属蛋白酶1组织抑制剂脱噬作用基因转染肾小球系膜
