骆丽娜
- 作品数：3 被引量：22H指数：3
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- 融合蛋白PEP-1-SOD1预处理对缺氧/复氧人脐静脉内皮细胞保护作用的实验研究被引量：9
- 2007年
- 目的构建原核表达载体 pET15b-PEP-1-SOD1,观察表达的融合蛋白 PEP-1-SOD1能否转导入人脐静脉内皮细胞,以及转导的 PEP-1-SOD1融合蛋白能否减轻人脐静脉内皮细胞的缺氧/复氧损伤。方法构建原核表达载体 pET15b-SOD1和 pET15b-PEP-1-SOD1,分别转化基因工程菌 BL21(DE3),表达出 N 端带有6个组氨酸"标签"的 SOD1和 PEP-1-SOD1融合蛋白。将纯化后的融合蛋白加入体外培养的人脐静脉内皮细胞,观察这种融合蛋白的转导能力及其在细胞内的活性。采用体外培养的人脐静脉内皮细胞建立缺氧/复氧损伤模型,检测不同浓度的 PEP-1-SOD1对氧化应激损伤的人脐静脉内皮细胞的生存率、乳酸脱氢酶和丙二醛含量的影响。结果 PEP-1-SOD1融合蛋白能高效地转导入体外培养的人脐静脉内皮细胞,并表现出剂量依赖性和时间依赖性的特点,2μmol/L PEP-1-SOD1-30 min 组 SOD1酶活性为(60.88±6.73)U/ml,显著高于对照组酶活性(41.06±4.19)U/ml,P<0.01,转导入细胞内的 PEP-1-SOD1融合蛋白的活性可以维持至24 h。PEP-1-SOD1各浓度组均提高缺氧/复氧人脐静脉内皮细胞的生存率,减少乳酸脱氢酶的释放量,降低丙二醛含量。结论 PEP-1-SOD1融合蛋白能直接以天然有活性的形式转导入人脐静脉内皮细胞内,且能明显减轻人脐静脉内皮细胞的缺氧/复氧损伤。这种蛋白转导方式,为用 SOD1防止在体缺血/再灌注损伤的研究奠定了基础。
- 王家宁丁鹏黄永章骆丽娜郭凌郧孔霞邵芳
- 关键词：再灌注损伤超氧化物歧化酶人脐静脉内皮细胞
- PEP-1-SOD1融合蛋白的表达及纯化被引量：9
- 2006年
- 目的构建原核表达载体pET15bPEP1SOD1,并进行PEP1SOD1融合蛋白表达和纯化。方法以pBluescriptIISKSOD1质粒为模板,PCR扩增SOD1cDNA。经酶切后,分别构建原核表达载体pET15bSOD1和pET15bPEP1SOD1,经测序证实构建成功后,分别转化E.coliBL21(DE3),表达SOD1和PEP1SOD1融合蛋白,并进行鉴定。结果SDSPAGE和Westernblot分析表明,分别在相对分子质量22000和26000处出现SOD1和PEP1SOD1目标表达条带,目的蛋白占菌体总蛋白的30%,两种表达蛋白以天然的、可溶性的形式存在。结论已成功地制备出SOD1和PEP1SOD1融合蛋白。
- 丁鹏王家宁杨波黄永章骆丽娜
- 关键词：原核表达TA克隆融合蛋白
- 紫杉醇联合顺铂治疗难治型小细胞肺癌的疗效观察被引量：4
- 2012年
- 目的观察紫杉醇联合顺铂二线治疗难治型小细胞肺癌(SCLC)的疗效及毒副反应。方法 29例难治型SCLC患者分为治疗组(22例)和对照组(7例)。治疗组给予紫杉醇135 mg·m-2,第1天;顺铂25mg·m-2,第1～3天,每21 d为1周期,2周期化疗后疗效和毒副反应被评价。对照组给予最佳支持治疗。治疗后2组患者生存情况被评价。结果治疗组22例患者化疗有效率为31.82%,中位总生存时间为6.6个月,毒副反应可耐受;对照组7例患者中位生存时间为4.5个月。结论紫杉醇联合顺铂二线治疗难治型SCLC疗效肯定,毒副反应轻。
- 高立伟闫江涛左一凡武素芳骆丽娜兰守丽
- 关键词：紫杉醇二线化疗
