李文奇 作品数:9 被引量:29 H指数:2 供职机构: 清华大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 环境科学与工程 更多>>
一种分析外泌体尺寸大小的方法 本发明公开了一种分析外泌体尺寸大小的方法。本发明首次利用SV‑AUC检测外泌体,并且发现利用该方法检测外泌体能够检测出外泌体中的杂质成分;此外,利用此方法还可以分辨出不同来源的外泌体沉降系数的分布差异。本发明为本领域提供... 李文奇 俞小娟 于传飞 王兰 王朝兴 褚文丹 常卿 王飞宇单抗药物分子大小变异体分析超速离心法的建立 2025年 目的建立一种可用于测定单抗药物分子大小变异体的分析超速离心法。方法通过对转速、温度及数据分析参数等关键指标的优化,得到一种测定单抗药物分子大小变异体的方法,对该方法的专属性、重复性、精密度及线性进行方法学验证。结果优化得到的最佳实验条件:转速为50000 r/min,温度为20℃,分析参数“Resolution”为150,“s max”为20。方法学验证结果表明,6次重复性实验的RSD为0.91%,总体精密度RSD为0.78%,在0.2~0.8 mg/mL的浓度条件下线性良好。结论该分析超速离心法的专属性、重复性、精密度和线性良好,可用于单抗药物分子大小变异体的测定。 俞小娟 褚文丹 余启昆 王飞宇 崔永霏 常卿 叶苗 霍德华 李文奇 于传飞 王兰关键词:单克隆抗体 纯度 一种全自动蛋白质分离纯化系统 本实用新型公开了一种全自动蛋白质分离纯化系统,包括支撑模块和位于支撑模块内的样品移动模块、试剂存放模块、试剂管存放模块、超声模块、磁吸分离模块。超声模块包括超声槽、超声温控装置、超声探头、超声探头升降架和超声支撑架。超声... 李文奇 赖鹏飞 芦亚菲 常卿 褚文丹多聚酸性氨基酸对蛋白质性质的影响 2023年 选取碳末端富含酸性氨基酸的拟南芥SnRK2.6(sucrose non-fermenting1-related protein kinase 2.6)和人源PDI(protein disulfide isomerase),以及近球形蛋白拟南芥PYL10 (PYR like protein 10),分别将重复酸性氨基酸序列添加到SnRK2.6(1-332)、PDI(1-440)、PYL10碳末端,利用大肠杆菌BL21重组表达,经过亲和层析,离子交换层析和分子排阻层析进行纯化,综合利用分析超速离心技术,分子排阻层析技术以及多角度静态光散射技术,研究人为设计的多聚氨基酸末端对蛋白质分子排阻行为,聚合状态和其他水力学性质的影响。结果发现,多聚酸性氨基酸末端虽不影响蛋白质分子的聚合状态,但会明显减少分子排阻色谱中蛋白质的洗脱体积,影响蛋白质分子的斯托克斯半径和轴长比等水力学性质。 李亚妃 武沈阳 褚文丹 褚文丹 施清华 周翠燕部分高校生物废弃物处置现状分析与建议 被引量:23 2017年 随着我国生物学领域快速发展,生物废弃物管理压力逐步增大,已成为高校及科研机构日益突出的环境和安全问题。该文在对国内外部分高校调研的基础上,首先分析国内部分实验室生物废弃物处置的现状、目前存在的主要问题,进而对生物废弃物管理工作提出几点建议。 陈璐 冯倩倩 冯倩倩 靳娇 潘勋 李文奇关键词:生物废弃物 管理建议 三种测定蛋白质热稳定性方法的比较 被引量:6 2021年 蛋白质的热稳定性一般使用热变性中点温度(melting temperature,T_(m))来表示,即蛋白质解折叠50%时的温度.测定蛋白质T_(m)值的常用方法有差示扫描量热法(differential scanning calorimetry,DSC)、圆二色光谱法(circular dichroism,CD)和差示扫描荧光法(differential scanning fluorimetry,DSF)等.为了比较不同方法的检测特点和效果,选择了5种具有不同结构特点的蛋白,分别使用上述方法对其T_(m)值进行测定.结果发现,三种方法测得的T_(m)值整体上较为一致,但也存在一定的差异.研究还发现,结构更复杂的蛋白,并不一定具有更多T_(m)值. 周翠燕 周翠燕 李文奇关键词:蛋白质热稳定性 差示扫描量热 圆二色谱 systematic identification of ABA receptor PYLs from Arabidopsis and Zea Mays by AUC Abscisic acid(ABA)is an essential phytohormone that protects plants against biotic andabiotic stress.PYR1/PYL/... 李文奇关键词:ACID RECEPTOR ULTRACENTRIFUGATION 文献传递 融合标签切除工具酶DrICE的制备方法 2025年 提供一种全新的用于融合标签切除的工具酶DrICE的载体构建和表达纯化方法以及含有该蛋白酶特异性酶切位点的表达载体的构建方法。同时对其在重组蛋白纯化过程中融合标签的切除进行应用,表明DrICE可以作为一种专门用于特异性切除重组表达蛋白融合标签的工具酶。 常卿 芦亚菲 杨姊 赖鹏飞 赵紫尧 李文奇关键词:融合标签 重组蛋白表达 工具酶 一种人B淋巴细胞表面抗原的重组表达和纯化 2022年 人源CD20作为B淋巴细胞表面特异性表达的膜蛋白,可以作为B淋巴细胞瘤免疫治疗的有效靶点。通过分子克隆引物设计,将CD20的胞外区以重复串联的方式克隆到pET28a载体上,两者之间通过Linker连接区(-GSSGGSSG-)连接,构建表达载体pET28a-Bi20。测序正确后转化至大肠杆菌Transetta(DE3)中重组表达,优化表达条件为当菌液OD_(600)为0.6~0.8时,以IPTG终浓度1 mmol/L,37℃诱导5 h。表达产物带有C端6个组氨酸的亲和标签,以包涵体形式表达。通过包涵体洗涤条件优化,变性条件下的镍亲和层析纯化,透析复性条件的摸索和优化,最终获得纯度大于95%的可溶CD20胞外区同源二聚体Bi20,建立在大肠杆菌表达系统中规模化量产CD20胞外区多肽的方法。经Western Blot和ELISA检测证实纯化复性后CD20胞外区多肽Bi20具有良好的免疫原性。 常卿 俞敏达 李文奇关键词:细胞治疗