郭慧琛
- 作品数：257 被引量：307H指数：8
- 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生理学更多>>
- 一种基于ORF2抗原功能区的检测猪圆环病的方法
- 一种基于ORF2抗原功能区的检测猪圆环病的方法，以PCV2 ORF2上的特定氨基酸区段(113-147aa)为目标，将其与GST融合表达得到GST-ORF2-E融合蛋白，利用亲和层析柱将融合蛋白纯化后作为抗原包被ELIS...
- 郭慧琛孙世琪刘湘涛尹双辉尚佑军殷宏才学鹏
- 文献传递
- 基于天蚕素D的新型抗病毒多肽对猪繁殖呼吸综合征病毒的抑制作用被引量：1
- 2025年
- 由猪繁殖呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引发的猪繁殖呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是目前危害养猪业的主要疾病之一。本研究旨在设计优化天然抗菌肽,筛选具有显著抑制PRRSV活性的抗病毒多肽,为PRRS防控制剂的研发提供新思路。以天蚕素D(cecropin D,CD)为母肽,通过氨基酸替换策略设计了CD-2、CD-3、CD-4这3个衍生物,利用固相合成技术合成CD及其衍生物,并使用质谱(mass spectrometry,MS)和反相高效液相色谱(reversed-phase high performance liquid chromatography,RP-HPLC)进行多肽的序列鉴定、纯化和纯度分析。通过圆二色谱研究多肽二级结构,使用CellTiter 96?AQueous单溶液细胞增殖检测试剂盒测定多肽细胞毒性。通过蛋白免疫印迹(Western blotting,WB)、实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)以及间接免疫荧光(indirect immunofluorescence assay,IFA)研究多肽对PRRSV的抗病毒活性及作用阶段。MS以及RP-HPLC结果表明,CD及其衍生物被成功合成,且纯度高达95%。圆二色谱分析结果显示,CD衍生物在细胞膜模拟环境中表现出更稳定且丰富的α螺旋结构。细胞毒性测定结果表明,所有被测多肽在100μg/mL的工作浓度下的细胞毒性可忽略。多肽抗PRRSV的作用阶段试验结果显示,衍生多肽在病毒侵入阶段的抗病毒活性较母肽显著增强,说明通过引入赖氨酸、色氨酸和苯丙氨酸,增强了母肽的阳离子性和疏水性,进而增强了衍生多肽在侵入阶段的抗PRRSV活性。本研究结果为抗病毒多肽的应用及结构优化提供了理论基础,并为PRRSV的防控提供了新的思路。
- 臧浩月彭婕郭慧琛孙世琪曾巧英周静静
- 关键词：抗菌肽抗病毒活性猪繁殖呼吸综合征病毒
- O型口蹄疫病毒中和抗体液相阻断ELISA检测试剂盒及其应用
- 本发明公开了一种O型口蹄疫病毒中和抗体液相阻断ELISA检测试剂盒及其应用。所述的液相阻断ELISA试剂盒中包含用作包被抗体的O型口蹄疫病毒中和抗体Ab1、用作反应抗原的O型口蹄疫病毒样颗粒抗原以及用作检测抗体的生物素标...
- 孙世琪张韵郭慧琛董虎李昊洲白满元尹双辉滕志东谭书桢吴金恩周静静魏甜丁耀忠
- 口蹄疫-塞内卡二联病毒样颗粒疫苗及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种口蹄疫‑塞内卡二联病毒样颗粒疫苗及其制备方法和应用，属于动物疫苗与兽用生物制品技术领域。本发明以口蹄疫(O型和A型)病毒样颗粒和塞内卡A型病毒样颗粒为抗原，制备新型二联病毒样颗粒疫苗，并通过确定配苗工艺、...
- 郭慧琛孙世琪宋河涛白满元丁耀忠尹双辉张韵董虎滕志东周静静吴金恩
- 猪细小病毒VLPs抗体检测试剂盒及其制备方法、应用
- 本发明公开了猪细小病毒VLPs抗体检测试剂盒及其制备方法、应用，其检测试剂盒包括预包被猪细小病毒VLPs的酶标板、封闭液、样品稀释液、酶结合物、浓缩洗涤液、酶底物溶液和终止液。本发明是首次采用猪细小病毒的病毒样颗粒作为包...
- 郭慧琛孙世琪白满元韩世充董虎宋品魏衍全张韵殷宏
- 文献传递
- O型、A型口蹄疫多表位二价病毒样颗粒抗原及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种O型、A型口蹄疫多表位二价病毒样颗粒抗原及其制备方法和应用。所述的病毒样颗粒(VLP)抗原是将A型、O型口蹄疫多表位抗原序列分别融合至噬菌体AP205的N端和C端后得到的。用该VLP抗原与ISA206VG...
- 邵军军刘伟常惠芸郭慧琛
- 口蹄疫病毒多基因重组质粒在BHK-21细胞中的表达被引量：3
- 2003年
- 利用定点突变的原理 ,获得包含有口蹄疫病毒P1,2A ,3C及部分 2B编码区的目的基因片段 ,KpnⅠ和XbaⅠ双酶切后 ,定向克隆于真核表达质粒载体pcDNA3 1(+) ,经筛选、鉴定及DNA序列分析后 ,将重组质粒pcDNA3.1 P12X3C转染BHK 2 1细胞 ,通过双抗体夹心ELISA方法和间接免疫荧光标记方法 ,检测细胞中表达的口蹄疫病毒抗原。结果表明 ,口蹄疫病毒基因片段正确克隆到真核表达质粒载体上 ,重组质粒pcDNA3.1 P12X3C可在BHK 2
- 郭慧琛刘在新孙世琪卢增军周广清祁淑云靳野刘湘涛谢庆阁
- 关键词：口蹄疫病毒真核表达质粒细胞
- O型口蹄疫病毒多基因DNA疫苗的研制
- 为研制带有O型口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth Disease Virus,FMDV)China99株结构蛋白基因及多个非结构蛋白基因的DNA疫苗,该研究通过定点突变方法和 PCR扩增方法,获得包含有FMDV C...
- 郭慧琛
- 关键词：FMDVDNA疫苗基因免疫
- 适于细胞培养的嵌合IBV H120 S1基因膜外区的重组病毒及其构建方法和应用
- 本发明公开了一种适于细胞培养的嵌合IBV H120S1基因膜外区的重组病毒及其构建方法和应用。本发明的重组病毒是通过以下方法构建得到：用IBV H120株的S1基因膜外区片段置换IBV Beaudette毒株S1基因膜外...
- 郭慧琛孙世琪魏衍全董虎王海明孙德惠刘定祥才学鹏殷宏
- 文献传递
- 稳定表达猪瘟病毒完整结构蛋白CHO-K1细胞系的筛选方法
- 本发明公开了一种稳定表达猪瘟病毒完整结构蛋白CHO‑K1细胞系的筛选方法，主要是利用PCR方法扩增猪瘟病毒(石门株)的完整结构蛋白(ShmEs)基因，并将其插入真核表达载体pcDNA3.4中，构建重组表达质粒pcDNA3...
- 尹双辉郭慧琛杨顺利孙世琪尚佑军卢曾军李坤曹钰莹刘湘涛
- 文献传递
