陈晓春
- 作品数：8 被引量：28H指数：4
- 供职机构：沈阳医学院奉天医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 新型人骨形成蛋白2逆转录病毒载体的构建及活性检测
- 2008年
- 目的构建表达重组人骨形成蛋白2（BMP2）基因的重组逆转录病毒，对其在成骨细胞中的生物学作用进行探讨。方法克隆BMP2基因，与pDNR-CMV连接构成pDNR-CMV-BMP2，然后将重组质粒pDNR-CMV-BMP2和逆转录病毒质粒pip-LNCX以loxP位点进行同源重组，构成逆转录病毒载体pLP-LNCX-BMP2，转染包装细胞PT67进行病毒包装，NIH3T3细胞测定病毒滴度；将逆转录病毒感染人成骨细胞，噻唑蓝（MTT）法检测细胞生长变化，Westernblot检测BMP2蛋白表达。结果重组逆转录病毒载体pLP-LNCX-BMP2经鉴定连接正确；病毒载体pLP-LNCX-BMP2转染PT67后，上清液中病毒滴度可达到5×10^8pfu；MTT检测见逆转录病毒组与对照组比，48和72h细胞抑制率（5．1％比5．3％，8．5％比8．3％）差异无统计学意义（P〉0．05），转染48h后Westernb lot可见BMP2蛋白高表达。结论成功构建了BMP2逆转录病毒，为BMP2基因治疗及其功能研究提供了有效的手段。
- 段有文赤人杰陈晓春关景玉白宏治常洪涛
- 关键词：骨形成蛋白2逆转录病毒成骨细胞蛋白表达
- 骨髓间充质干细胞移植对脊髓损伤大鼠脑源性神经营养因子表达的影响(英文)被引量：4
- 2009年
- 背景：近年来关于骨髓间充质干细胞移植对脊髓损伤修复方面的研究较多，但目前相关机制尚不清楚。目的：观察间充质干细胞移植对大鼠脊髓损伤后脑源性神经营养因子表达的影响。设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2003-04／07在中国医科大学神经解剖学实验室完成。材料：选取鼠龄3个月的SD大鼠64只，雌雄不拘，体质量250-300g，随机抽取4只大鼠用于骨髓间充质干细胞的分离与培养。其余60只用于制备脊髓横断损伤模型。方法：60只大鼠随机抽签法分为3组，细胞移植组（n=24）：脊髓损伤后第7天，无菌条件下以微量注射缓慢注入含骨髓问充质干细胞（1×10^9L^-1）的培养液5μL至脊髓损伤区：PBS组（n=24）：注入等量（5uL）磷酸盐缓冲液体：空白对照组（n=12）：注入生理盐水5uL。主要观察指标：分别子造模后7，14，28d取材，观察骨髓间充质干细胞的形态变化：免疫组织化学法检测间充质干细胞移植后大鼠脊髓损伤区脑源性神经营养因子的表达。结果：60只SD大鼠均进入结果分析。10代以后细胞增殖能力有所减弱，胞体变得扁平，若加入碱性成纤维细胞生长因子，则可维持其增殖能力和形态。大鼠脑源性神经营养因子在正常大鼠脊髓组织中有一定表达，细胞移植后第7，14，28天，细胞移植组脑源性神经营养因子表达均高于PBS组和空白对照组（P〈0．05）：空白对照组与PBS组脑源性神经营养因子表达无明显差异（P〉0．05）。结论：骨髓间充质干细胞在移植后通过上调脑源性神经营养因子的表达从而促进轴突的再生，可能是治疗脊髓损伤的重要机制。
- 陈晓春牛庆飞杨爽
- 关键词：脊髓损伤干细胞移植脑源性神经营养因子
- 骨髓间充质干细胞移植对大鼠脊髓损伤后再修复作用的研究被引量：4
- 2008年
- 目的探讨间充质干细胞(MSCS)移植对大鼠脊髓损伤后脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响。方法选取SD大鼠4只作骨髓间充质细胞的分离与培养,提取MSCS;制做脊髓横断损伤模型,细胞移植组24只,PBS(磷酸盐缓冲液)液组24只,空白对照组12只。于脊髓损伤后第7天,无菌条件下,细胞移植组以微量注射器缓慢注入含MSCS的培养液5μl,磷酸盐缓冲液组5μl,对照组未加任何干预因素。分别于术后7d、14d、28d麻醉下行心脏灌流固定取T10节段脊髓,细胞移植组与磷酸盐缓冲组取出损伤节段的脊髓,空白对照组于同一节段取出相应脊髓。应用免疫组化法观察MSCS移植后大鼠脊髓损伤区BDNF的表达变化。结果脑源性神经营养因子在正常大鼠脊髓组织中有一定表达,间充质干细胞移植术后7d、14d及28d,细胞移植组脑源性神经营养因子均高水平表达,与缓冲液组相比较差别明显,具有统计学意义。结论间充质干细胞在移植后通过上调脑源性神经营养因子的表达从而促进轴突的再生,可能是治疗脊髓损伤的重要机制。
- 陈晓春杨爽
- 关键词：脊髓损伤骨髓间充质干细胞细胞移植脑源性神经营养因子
- 四肢骨折D-二聚体的变化与血栓形成相关性及干预性治疗被引量：12
- 2009年
- 目的探讨肢体骨折后D-二聚体的变化与血栓形成的相关性及初步治疗效果。方法对2004年3月～2005年1月间本院的四肢骨折患者伤后4d内D-二聚体进行测定,3d后仍阳性的患者,行肢体血管彩超检查,确诊DVT的发生,对确诊患者给予低分子量肝素治疗。结果110例患者中,48h内D-二聚体阳性患者为91例,发生深静脉血栓形成33例,发生率为36.2%;72h后D-二聚体仍为阳性患者41例,发生DVT仍为33例,发生率80.5%。33例患者给予低分子量肝素(尤尼舒)治疗7～10d,症状逐渐消失,无肺脑栓塞的发生。结论2d内D-二聚体阳性对DVT预测性较差,3d后仍为阳性,可以预测DVT的发生,下肢骨折发生DVT的比率远高于上肢骨折,低分子量肝素对DVT有初步的治疗作用。
- 陈晓春贾乐生杨爽
- 关键词：D-二聚体四肢骨折深静脉血栓
- 低氧诱导因子1α在继发性脊髓损伤中的时序性表达及意义被引量：4
- 2011年
- 目的通过观察大鼠继发性脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)中低氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor lα,HIF-lα)的表达规律,探讨其在继发性SCI发生、发展过程中的作用。方法 SD大鼠66只,雌雄不限,体重(250±20)g,随机分为正常对照组(A组,6只)、假损伤组(B组,6只)和SCI组(C组,54只)。A组不作任何处理;B组大鼠仅行椎板切除术;C组大鼠在椎板切除术后采用脊髓静压法建立T10静压SCI模型。A、B组于术后1h,C组于术后1、3、6、12h及1、2、3、7、14d各处死6只大鼠,取损伤区脊髓组织行HE染色,采用SABC法行免疫组织化学染色观察各组HIF-1α阳性表达情况并计数。结果各组动物均存活至实验完成。HE染色示,A、B组脊髓组织结构致密,细胞核圆而大、染色浅、核仁清晰。C组术后1～12h,损伤局部神经元核固缩,胞体缩小,胞质深伊红染色;1～3d,轴突肿胀,出现空泡,白质内神经髓鞘散乱、崩解破裂;7、14d,胶质细胞增生明显,损伤段脊髓变细,部分灰质崩解坏死,可见囊腔形成。免疫组织化学染色示,A组HIF-1α阳性细胞少,B组稍增多。C组术后1、3h,HIF-1α阳性产物开始增多,主要在脊髓前角神经元和少量胶质细胞中表达;术后1d达峰值,1～3d维持较高水平,此后逐渐减少;14d时仅可见少量白质中的胶质细胞。A、B组间HIF-1α阳性细胞数比较差异无统计学意义(t=1.325,P=0.137)。C组各时间点HIF-1α阳性细胞数均高于A、B组(P<0.05),C组各时间点间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 SCI后HIF-1α表达开始升高,与继发性SCI缺血缺氧密切相关,其表达规律与损伤时间具有相关性。
- 牛庆飞贾长青王楠陈晓春赤仁杰柏树令
- 关键词：低氧诱导因子1Α继发性脊髓损伤缺血缺氧
- 干细胞移植治疗脊髓损伤的研究与应用被引量：1
- 2012年
- 背景:脊髓损伤是中枢神经系统的严重创伤,一些研究认为,干细胞移植可为脊髓损伤治疗提供新的思路。目的:利用Scopus数据库文献检索和深度分析功能,对干细胞移植治疗脊髓损伤研究的6年文献资料进行多角度的探讨分析。设计:文献计量学分析。资料提取:由第一作者以"neural stem cells(干细胞),spinal cord injury or spinal injury(脊髓损伤),cell transplantation(细胞移植),spinal transection(脊髓横断)"为关键词检索Scopus数据库2006-01/2011-12的相关文献,并将分析结果及资料导出,以文字和图表的形式进行统计和计量分析,描述其分布特征。入选标准:纳入标准:检索干细胞移植治疗脊髓损伤研究相关的文献。文献类型包括研究原著、综述、会议记录及摘要、快报文章、编辑素材。排除标准:与文章目的无关的文献,大于6年较陈旧的文献,未发表的文章以及需电话追踪和手工检索逐一分析的文献。主要数据判定指标:以文献的类型、出版时间、发表文献的作者分布、学科类别、机构分布、国家地区分布、来源期刊、及文献被引情况进行相关分析。结果:Scopus数据库2006/2011收录的文献中共检索到1080篇干细胞移植治疗脊髓损伤研究相关的文献,研究原著以607篇位居首位,其中有15篇可以确定为经典文献。在时间分布上,文献数量2006/2011总体呈上升趋势,来源出版物呈分散情况。高被引研究原著类文章主要发表在Journal of Neuroscience(《神经科学杂志》)上,目前已发表文献中以美国为主,占全球相关领域发稿量的28.5%。中国在过去6年间在数据库中收录文章总量中排在第2名,共发表212篇相关文章,占全球相关文章的19.6%。结论:通过文献计量学方法对来源于Scopus数据库关于干细胞移植治疗脊髓损伤研究的文献进行分析,可为了解该领域的概貌、现状和研究者进一步确定该领域研究的热点难点提�
- 陈晓春张洋李治周郦楠
- 关键词：脊髓损伤干细胞脊髓横断细胞移植文献计量学
- 新型骨形态发生蛋白2反转录病毒载体的构建及活性检测被引量：1
- 2010年
- 背景:骨形态发生蛋白是一种具有潜在活性的蛋白质,当骨组织损伤时其迅速增加并活性的增强,与载体复合能修复动物骨缺损,但将其用做基因治疗的研究未见报道。目的:构建表达重组人骨形态发生蛋白2基因的重组反转录病毒载体,探讨其在成骨细胞中的生物学作用。方法:根据Genbank中人骨形态发生蛋白2基因序列设计并合成骨形态发生蛋白2特异性引物,高保真PCR扩增骨形态发生蛋白2基因,同源重组法将骨形态发生蛋白2PCR片段连接与克隆载体pDNR-CMV,构成pDNR-CMV-BMP2,经酶切、PCR和测序鉴定后,将重组质粒pDNR-CMV-BMP2和反转录病毒空质粒pLP-LNCX以loxP位点进行同源重组,构成反转录病毒载体pLP-LNCX-BMP2,转染入包装细胞PT67进行病毒包装,并用NIH3T3细胞进行病毒滴度测定;将反转录病毒感染人成骨细胞,四甲基偶氮唑盐法检测细胞生长变化,转染48h后Westernblotting检测骨形态发生蛋白2蛋白表达。结果与结论:pDNR-CMV-BMP2质粒SalI和EcoRI双酶切、PCR及测序结果均正确,重组质粒pLP-LNCX-BMP2经氯霉素及蔗糖筛选得到的阳性克隆骨形态发生蛋白2PCR结果阳性,酶切产物与预期相一致;病毒载体pLP-LNCX-BMP2转染PT67后,G418筛选可得到稳定细胞克隆,其上清液中病毒滴度可达到5×108pfu;四甲基偶氮唑盐检测中反转录病毒组与正常对照组相比,72h细胞抑制率无明显差别(P>0.05),转染48h后Westernblotting可见骨形态发生蛋白2蛋白高表达。结果说明,实验成功克隆了骨形态发生蛋白2基因并构建其反转录病毒表达载体。
- 廖青唐颖赤仁杰陈晓春关景玉段有文
- 关键词：反转录病毒成骨细胞四甲基偶氮唑盐蛋白表达
- 胫骨骨折内外侧钢板固定术后康复分析被引量：2
- 2008年
- 目的比较分析胫骨骨折内、外侧钢板固定术后的康复过程。方法选择胫骨骨折行内、外侧钢板固定两组病人,内侧钢板固定61例,外侧钢板固定47例。统计骨折后临床愈合时间及术后皮肤坏死的发生率,两组对比。结果内侧钢板固定组临床愈合时间(6.1±0.8)w,外侧钢板固定组临床愈合时间(8.9±1.4)w,两组差异显著。皮肤坏死发生率内侧组6.5%(4/61),外侧组6.8%(3/47),两组差异无显著性。结论胫骨骨折内侧钢板固定,优于外侧钢板固定,不仅手术操作简便,对伤口周围软组织损伤轻微,而且骨折术后愈合时间更短,皮肤坏死发生率亦相似。
- 陈晓春杨爽
- 关键词：胫骨骨折钢板固定术后康复
