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长春花MT基因克隆、原核表达及其功能分析: 金属硫蛋白是一类分子量较小、富含Cys的金属结合蛋白，广泛分布于生物界。近年来研究表明，金属硫蛋白参与体内微量元素的储存、转运和代谢，拮抗电离辐射，清除自由基以及对重金属的解毒作用。植物MT的发现相对较晚，研究表明，植物...; 房思良; 关键词：金属硫蛋白; 文献传递

长春花金属硫蛋白基因原核表达载体的构建及表达研究被引量：3: 2007年; 将从长春花中克隆的金属硫蛋白基因(GenBank登录号:DQ016341)构建到高效原核表达载体pGEX-6P-1,并命名为pGEX-6P-1-CrMT,并对GST-CrMT融合蛋白的表达进行诱导和条件优化。对不同的诱导温度、IPTG诱导浓度和诱导时间等条件的优化结果表明,随诱导时间增长GST-CrMT融合蛋白表达量提高,22℃,24 h和37℃,240 m in均能诱导GST-CrMT融合蛋白的最大量表达,在0.8 mmol.L-1IPTG浓度下可以有效诱导GST-CrMT融合蛋白的表达。; 祖元刚房思良聂明珠; 关键词：金属硫蛋白原核表达

荧光定量PCR检测干旱胁迫下长春花Crlea基因的相对表达(英文)被引量：5: 2006年; 首次从长春花中克隆了Crlea（Crlea for Catharanthus roseus late embryogenesis abundant）的全长基因,采用荧光定量PCR方法对干旱胁迫下长春花叶片和根部Crlea基因的表达模式进行监测,结果表明,在0.5～8h的胁迫时间中,叶片和根部的Crlea基因表现出相似的积累模式.长春花Crlea基因的表达随着胁迫时间的延长而表达增强.在叶片中,在6 h和8 h的干旱处理后,Crlea基因表达显著提高,分别是未处理材料的9.984和20.431倍.在根部, 在8 h的处理后,Crlea基因的表达量显著提高（2.831倍于对照）.初步结果表明Crlea基因的表达没有组织特异性,并且为干旱胁迫正调控.; 祖元刚聂明珠房思良于景华郭晓瑞; 关键词：干旱胁迫荧光定量

长春花Crlea基因的克隆及原核表达初步分析(英文)被引量：6: 2006年; 晚期胚胎丰富(Late Embryogenesis Abundant,LEA)蛋白是植物在干旱胁迫下响应并被描述为具有潜在的抗旱功能的一类重要的抗旱蛋白。通过建立干旱胁迫下长春花(Catharanthusroseus)的cDNA文库并进行测序筛选分析,首次分离得到Crlea(CrleaforCatharanthus roseuslateembryogenesis abundant)全长基因。该基因具有492 bp的开放读码框,编码163个氨基酸,其中偏性氨基酸含量占总蛋白的55.9%。同源性分析表明该假定蛋白与胡萝卜(Daucus carota)LEA DC3的同源性达69%。亲水性分析表明具有极强的亲水性。为进一步验证CrLEA蛋白的功能,构建了Crlea基因的原核表达载体并在大肠杆菌中对其表达进行了分析。结果表明,原核载体成功的表达了CrLEA蛋白,亲水性实验及热稳定性实验表明CrLEA蛋白具有极强的亲水性和热稳定性。; 聂明珠祖元刚房思良; 关键词：LEA 基因克隆原核表达

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房思良