杜志坚
- 作品数：4 被引量：5H指数：2
- 供职机构：河北医科大学第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- miR-31在结直肠癌患者血清中的表达及对结肠癌HCT116细胞增殖及凋亡的影响被引量：2
- 2016年
- 背景与目的:micro RNA与肿瘤关系密切,血清mi RNAs可以作为筛选和监测结直肠癌的有效指标。该研究旨在检测结直肠癌患者血清中mi R-31的表达水平,并分析mi R-31对结肠癌细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法:收集40例结直肠癌患者和35例健康人群作为对照,采用实时荧光定量聚合酶链反应(realtime fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR),检测其血清mi R-31的表达水平,并分析结直肠癌患者血清mi R-31的表达水平与临床病理特征之间的关系。采用脂质体转染将mi R-31模拟物(mi R-31 mimics)和抑制剂(mi R-31 inhibitor)转染到HCT116细胞,采用CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡及周期改变。结果:结直肠癌患者血清中mi R-31的表达显著高于健康对照组,mi R-31表达与结直肠癌分化程度有关。转染mi R-31mimics组HCT116细胞生长增快,而转染mi R-31抑制剂后细胞增殖能力明显降低(P<0.01);同时mi R-31mimics组细胞凋亡所占比例较mi R-31抑制剂组和阴性对照组(mi R-control,NC)明显减少,尤其是晚期凋亡细胞减少为著;转染mi R-31抑制剂组,G_1期细胞较mi R-31 mimics组和NC组明显增多。结论:mi R-31在结直肠癌患者血清中表达显著上调,mi R-31可能通过促进结肠癌细胞增殖、抑制细胞凋亡而参与了结直肠癌的发展进程,有望成为结直肠癌诊断的标志物。
- 王园园张丽静韩晓东翟丛劼杜志坚张军赵增仁
- 关键词：大肠癌血清细胞增殖凋亡
- 结直肠癌中miR-31的表达及预测靶基因的生物信息学分析被引量：2
- 2015年
- 目的检测micro RNA-31(mi R-31)在结直肠癌中的表达及功能,预测其靶基因并进行生物信息学分析,为研究其作用和调控机制奠定基础。方法采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(q RT-PCR)检测8种结肠癌细胞株、40例结直肠癌(colorectal cancer,CRC)患者癌组织及匹配的正常黏膜组织及33例结直肠腺瘤组织中mi R-31的表达情况,并分析癌组织中mi R-31表达与患者临床特征的关系。MTS法观察转染mi R-31模拟物(mimics)组、抑制剂(inhibitor)组和对照组(mi RControl)及空白细胞组细胞生长的差异,Western blot检测空白细胞组、mi R-31 mimics和inhibitor三组细胞PCNA蛋白的表达。Target Scan、DIANA-micro T、mi Randa等软件预测mi R-31的靶基因,并进行KEGG功能和信号通路富集分析。结果 mi R-31在8种结肠癌细胞株中高表达,同时CRC患者癌组织中的表达高于腺瘤及正常黏膜组织(P<0.05)。其中癌组织和匹配的正常黏膜相比,mi R-31表达明显上调(P=0.035),但腺瘤和正常黏膜相比,差异无统计学意义(t=0.122,P=0.904)。mi R-31的表达与临床病理特征间未见明显关系(P均>0.05)。转染mi R-31 mimics后,mi R-31的表达明显上调且和mi R-Control组及空白细胞组相比,mi R-31 mimics组细胞生长加快;而转染mi R-31 inhibitor组mi R-31表达显著降低,细胞生长活力明显受抑制。同时转染mi R-31 inhibitor组PCNA蛋白表达较mi R-31 mimics组和空白细胞组显著降低。生物信息学分析mi R-31靶基因功能集中于转录后及翻译水平的调节、细胞连接、迁移及细胞运动等生物学过程。信号通路主要富集于内吞作用、轴突导向、T细胞受体信号通路、Wnt及MAPK信号通路。结论 mi R-31在结直肠癌中高表达,且mi R-31可以促进细胞生长和增殖,其靶基因可能通过调节多种生物学过程发挥作用。
- 张丽静王园园翟丛劼杜志坚韩晓东赵增仁
- 关键词：结直肠癌生物信息学
- 乳腺干细胞研究进展
- @@近年来，对乳腺干细胞的研究有很大进展。越来越多的证据表明，乳腺内存在乳腺干细胞。实验证实，小鼠的单个乳腺细胞可以重建有功能的乳腺，并且有自我更新的能力。本文就乳腺干细胞存在的证据、乳腺干细胞的鉴定方法，作一综述。
- 杜志坚赵增仁
- 文献传递
- △Np63α过表达乳腺癌细胞系的建立被引量：1
- 2012年
- 目的建立稳定过表达△Np63α的乳腺癌细胞系,为研究△Np63α的功能奠定基础。方法利用MCF-7细胞系作为模型,通过表达△Np63α的PCDNA3.1质粒转染MCF-7细胞,利用质粒的抗药性筛选MCF-7细胞,从而获得稳定过表达△Np63α的MCF-7细胞,用Real-time PCR和Western blot方法检测验证目的基因表达。结果通过瞬时转染和药物筛选获得了稳定过表达△Np63α的MCF-7细胞。结论成功构建了过表达△Np63α的MCF-7细胞系和转染空质粒的MCF-7对照细胞系,为下一步研究NP63α的功能奠定了基础。
- 杜志坚王园园田延锋赵增仁
- 关键词：P63乳腺癌过表达
