陈红岩
- 作品数:59 被引量:54H指数:4
- 供职机构:复旦大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划上海市教育委员会重点学科基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学电子电信化学工程更多>>
- 20q13.33,11q23.3和5p15.33染色体区域基因多态性与中国汉族人群脑胶质瘤易感性研究
- 脑肿瘤是危害人类健康的严重疾病之一,最近几年发病率呈上升趋势,尤其在发达的西方国家。在全球,每年有18-60万中青年人因胶质瘤失去生命。欧洲人群脑胶质瘤全基因组关联研究(GWAS)发现了5个脑胶质瘤易感基因:TERT,C...
- 陈红岩宋晓陈元渊赵英杰范薇薇卢大儒
- 关键词:胶质瘤中国汉族人群染色体易感性基因多态性
- Pklr基因敲除小鼠的构建及其糖脂代谢研究被引量:1
- 2017年
- 目的 丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK)作为糖酵解途径的关键限速酶之一,主要在肝脏和红细胞中表达,在糖脂代谢过程中发挥着重要作用.对于PK的研究目前主要集中在细胞实验与临床观察水平,动物模型的缺乏限制了对其进一步研究.因此该研究目的在于建立Pklr基因缺陷小鼠模型,并探索该酶在机体中与糖脂代谢的关系.方法 本研究利用CRISPR/Cas9系统,设计引物sgRNA1与sgRNA2,分别靶向LPK外显子1和共用外显子3.通过测序、实时定量PCR、Western印迹及PK活性测定试剂盒检测小鼠Pklr基因在转录、蛋白质和酶活性等不同层面上的变化,之后通过正常与高脂饮食,检测小鼠体重、白色脂肪及脾脏变化验证PK与糖脂代谢的关系.结果 经过检测发现,小鼠Pklr基因双位点发生基因编辑,与野生型小鼠相比,转录水平下降至24%,LPK蛋白几乎不表达,酶活性下降至33%,在基因、转录、蛋白质和酶活性不同层面上证明成功获得了Pklr基因缺陷小鼠模型,并且发现该基因突变纯合子小鼠在高脂饮食条件下显示出体重下降和白色脂肪积累(P值分别为0.0040、0.0200),同时两种饮食条件下脾脏重量都显著上升(P =0.0003).结论 利用CRISPR/Cas9系统成功构建了Pklr基因缺陷小鼠,并且该基因缺陷会导致异常的糖脂代谢.Pklr基因敲除小鼠模型为进一步探索PK在机体内调控机制与糖脂代谢的关系提供了平台.
- 郑成德怀聪周芳芳陈红岩孙瑞林费俭卢大儒
- 关键词:基因缺陷炎症反应糖脂代谢
- 胰高血糖素样肽-1及其类似物对糖尿病基因治疗的研究
- 朱青陈红岩卢大儒
- 关键词:糖尿病基因治疗
- 分子信标技术在 ABO 血型基因型检测方面的重要应用被引量:1
- 2014年
- 目的:人类 ABO 血型的检测在医学和法学领域都有着非常重要的意义,该研究目的在于发展一种利用非血生物学样本进行人体 ABO 血型的精确检测方法。方法该项研究中,选取漱口水、毛发和指甲3种生物样本,采用饱和氯化钠法进行基因组 DNA 的抽提,设计特异性引物和荧光标记的探针,通过分子信标检测技术法进行血型的精确检测。结果漱口水、毛发和指甲3种样本中均能成功抽提得到基因组 DNA ,分子信标技术利用基因组DNA能够快速完成 ABO 血型精确分型,分型结果与传统的免疫学方法一致,且能准确区分血型的纯合型和杂合型。结论利用漱口水、毛发和指甲等非血生物学样本,分子信标技术能精确完成个体 ABO 血型的检测,简便快捷,灵敏度高。
- 张硕孙海燕王诗铭宋晓陈红岩卢大儒
- 关键词:ABO血型血型检测分子信标技术
- 耐热DNA连接酶介导的TLCR技术在简化DNA重组实验中的应用被引量:2
- 2016年
- 传统的DNA重组方法 TypeⅡ型限制酶技术受到片段纯化的限制,无法做到复杂混合体系中DNA片段的特异性连接。为解决这个问题,本研究将耐热连接酶链式反应(Thermostable ligase chain reaction,TLCR)引入DNA片段的连接与捕获。该技术利用耐热型DNA连接酶的特性,在热循环反应中配合针对目的片段末端序列设计的单链寡核苷酸连接模板——Helper,实现目的片段的特异性连接和产物数量的指数性增长。两个质粒构建实验被用于验证TLCR技术的可行性和应用效果。首先利用TLCR技术从一个未经纯化的含有7种不同大小片段的混杂体系中特异性地将一段1.5 kb的片段捕获进载体,随机抽取的克隆样品经检验准确率达到80%,验证TLCR技术在复杂混合体系中特异性连接DNA片段的可行性和准确性。在另一个质粒构建实验中,TLCR技术从λ噬菌体基因组Hind消化物中将两段总长达27 kb的片段按顺序捕获进载体,随机抽取的克隆样品经检验同样达到了80%的准确率。结果表明,TLCR技术能够简化DNA重组实验的操作,并且适用于多片段和大片段的连接,可以为生物学研究提供便利。
- 周翔达宋晓怀聪孙海燕陈红岩卢大儒
- 关键词:HELPER
- RIT1基因作为治疗脑胶质瘤药物干预靶点的应用
- 本发明属于生物医疗技术领域,具体为一种<I>RIT1</I>基因作为治疗脑胶质瘤药物干预靶点的应用。本发明通过CGGA数据库中的数据对<I>RIT1</I>在中国脑胶质瘤人群样本中的表达量及其高低表达对脑胶质瘤病人预后的...
- 卢大儒陈红岩王煜棋
- 文献传递
- 应用HRM技术对CYP2C19*2和CYP2C19*3进行双重SNP分型被引量:6
- 2013年
- 氯吡格雷是一种广泛用于预防静脉血栓形成的抗血小板药物。研究表明,携带有CYP2C19基因功能缺失型等位基因CYP2C19*2、CYP2C19*3的病人,其体内代谢氯吡格雷成为其活性形式的能力降低,导致氯吡格雷抑制血小板聚集功能减弱。文章旨在建立一种利用高分辨率熔解曲线分析(High-resolution melting curveanalysis,HRM)技术在闭合单管中同时对CYP2C19*2、CYP2C19*3两个多态性位点进行简便、准确分型的方法。本实验针对两个SNP位点分别设计特异性的HRM引物,并在两个位点引物的5′端分别加上富含AT和GC的序列,保证两个位点的扩增产物熔解峰无重叠。利用HRM技术,快速、灵敏地对64例随机DNA样本的CYP2C19*2、CYP2C19*3两个多态性位点进行了基因分型,且HRM方法的分型结果与测序验证结果完全一致。因此,利用HRM技术可以实现在闭合单管中简便、准确地对CYP2C19*2、CYP2C19*3两个多态性位点同时进行基因分型。该方法有望应用于临床,指导氯吡格雷的个体化用药。
- 曹春鸽孙海燕周芳芳王诗铭陈红岩卢大儒
- 关键词:高分辨率熔解曲线分析氯吡格雷SNP分型
- 一种用于检测药物性耳聋相关位点的非标记探针
- 本发明涉及一组用于检测药物性耳聋相关位点的非标记探针。分别针对两个位点设计与突变型序列完全匹配、3’端氨基封闭的非标记探针,通过高分辨率熔解曲线分析(HRM)结合非标记探针,检测嵌入双链DNA的饱和染料EvaGreen荧...
- 卢大儒陈红岩陈弘远丁嘉琦王超
- 基于荧光标记探针技术检测叶酸代谢关键酶基因SNP位点三重检测方法的建立
- 李娜王超陈红岩卢大儒
- 胰高血糖素样肽-1及其类似物对糖尿病基因治疗的研究
- 胰高血糖素样肽-1(glucagons-like peptide-1,GLP-1)作为胰高血糖素基因编码的一种胃肠激素,能够促进胰岛β细胞的功能再生和防止其凋亡,明显改善糖尿病人的血糖水平。这对Ⅰ型和Ⅱ型糖尿病的治疗都具...
- 朱青陈红岩卢大儒
- 关键词:糖尿病基因治疗
- 文献传递