卢大儒
- 作品数：389 被引量：1,300H指数：19
- 供职机构：复旦大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划上海市科学技术发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学化学工程更多>>
- 凝血因子IX的体外检测方法研究被引量：1
- 1996年
- 凝血因子ＩＸ的检测是血友病Ｂ基因治疗研究中的重要工作，在实验室原有基础上，发展和完善了凝血因子ＩＸ在蛋白质水平上的检测系统，为基因治疗血友病Ｂ提供了更为直观可靠的依据．首先，建立了以鼠抗人ＦＩＸ单克隆抗体Ａ－７为一抗的检测活性ＦＩＸ蛋白量的ＥＬＩＳＡ法，为检测活性ＦＩＸ提供了快速简便的方法．其次，实现了用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测转染细胞培养液上清中ＦＩＸ，确证了体外培养的转有人ＦＩＸｃＤＮＡ的细胞表达有人ＦＩＸ蛋白．最后，用免疫组织化学方法，原位检测了转有人ＦＩＸｃＮＡ的细胞表达的ＦＩＸ蛋白，展现了在细胞水平上ＦＩＸ表达的直观图象．
- 施前卢大儒王琪王宏伟薛京伦邱信芳
- 关键词：血友病B凝血因子IX免疫组织学基因治疗
- 20q13.33,11q23.3和5p15.33染色体区域基因多态性与中国汉族人群脑胶质瘤易感性研究
- 脑肿瘤是危害人类健康的严重疾病之一,最近几年发病率呈上升趋势,尤其在发达的西方国家。在全球,每年有18-60万中青年人因胶质瘤失去生命。欧洲人群脑胶质瘤全基因组关联研究(GWAS)发现了5个脑胶质瘤易感基因:TERT,C...
- 陈红岩宋晓陈元渊赵英杰范薇薇卢大儒
- 关键词：胶质瘤中国汉族人群染色体易感性基因多态性
- Pklr基因敲除小鼠的构建及其糖脂代谢研究被引量：1
- 2017年
- 目的 丙酮酸激酶（pyruvate kinase,PK）作为糖酵解途径的关键限速酶之一,主要在肝脏和红细胞中表达,在糖脂代谢过程中发挥着重要作用.对于PK的研究目前主要集中在细胞实验与临床观察水平,动物模型的缺乏限制了对其进一步研究.因此该研究目的在于建立Pklr基因缺陷小鼠模型,并探索该酶在机体中与糖脂代谢的关系.方法 本研究利用CRISPR/Cas9系统,设计引物sgRNA1与sgRNA2,分别靶向LPK外显子1和共用外显子3.通过测序、实时定量PCR、Western印迹及PK活性测定试剂盒检测小鼠Pklr基因在转录、蛋白质和酶活性等不同层面上的变化,之后通过正常与高脂饮食,检测小鼠体重、白色脂肪及脾脏变化验证PK与糖脂代谢的关系.结果 经过检测发现,小鼠Pklr基因双位点发生基因编辑,与野生型小鼠相比,转录水平下降至24％,LPK蛋白几乎不表达,酶活性下降至33％,在基因、转录、蛋白质和酶活性不同层面上证明成功获得了Pklr基因缺陷小鼠模型,并且发现该基因突变纯合子小鼠在高脂饮食条件下显示出体重下降和白色脂肪积累（P值分别为0.0040、0.0200）,同时两种饮食条件下脾脏重量都显著上升（P =0.0003）.结论 利用CRISPR/Cas9系统成功构建了Pklr基因缺陷小鼠,并且该基因缺陷会导致异常的糖脂代谢.Pklr基因敲除小鼠模型为进一步探索PK在机体内调控机制与糖脂代谢的关系提供了平台.
- 郑成德怀聪周芳芳陈红岩孙瑞林费俭卢大儒
- 关键词：基因缺陷炎症反应糖脂代谢
- 基因编辑与遗传病治疗被引量：3
- 2019年
- 各种遗传病给人类社会带来巨大困扰。基因治疗从概念提出到临床应用,遗传病的基因治疗一直是研究重点.慢病毒和腺相关病毒在遗传病的基因治疗上获得一定效果,但对更多遗传病无可奈何.基因编辑工具的出现给遗传病治疗带来了新曙光,但在实际应用中需要制定规范、达成国际共识,科学家必须受生物医学伦理道德的约束.
- 席海瑞卢大儒
- 关键词：遗传病基因治疗基因伦理
- 时差成像干式培养与传统湿式培养应用于不同年龄胚胎发育的效果被引量：2
- 2022年
- 目的评价时差成像技术(time-lapse,TL)干式培养与传统湿式培养对不同年龄胚胎发育的影响。方法回顾性分析2020年7月至2021年12月2390个周期体外胚胎培养情况。TL组共培养640个周期,传统湿式培养组(对照组)共培养1750个周期。两组女方年龄、不孕类型、不孕因素、促排卵药物(gonadotropin,Gn)用量、受精方式差异均无统计学意义。比较不同年龄女方中,两组间正常受精率、正常卵裂率、有效胚胎率、优质胚胎率、囊胚形成率和优质囊胚率。结果20~29岁:TL组有效胚胎率(75.39%vs 70.15%)、优质胚胎率(49.79%vs 41.98%)均高于对照组(P<0.01);30~34岁:TL组优质胚胎率(46.70%vs 41.43%)、囊胚形成率(57.14%vs 52.74%)、优质囊胚率(35.82%vs 32.26%)均高于对照组(P<0.05);≥40岁:TL组优质胚胎率(44.05%vs 48.96%)、囊胚形成率(34.9%vs 46.24%)及优质囊胚率(16.11%vs 21.77%)均低于对照组(P<0.05)。结论与常规湿式培养相比,女方20~34岁时,TL培养可显著提高胚胎发育成功率,女方≥40岁时则效果较差。
- 张豆豆王静刘淼卢大儒刘素英
- 关键词：胚胎培养囊胚培养渗透压
- 建立标准化SEAP报告基因系统的研究
- 2011年
- 通过建立SEAP(分泌性碱性磷酸酶)产物的标准曲线,得出SEAP的吸光值与酶活力、蛋白质绝对值之间相互换算的公式,从酶动力常数、酶反应时间、不同量mRNA与酶吸光值之间的对应关系等方面进行研究.建立了在405 nm波长处,SEAP的吸光值与酶活力之间、酶活力和蛋白质绝对值之间相互换算的两个公式:y(酶活力)=(x(吸光值)+0.002 8)/19.13×10;1U(酶活力)=5.035 ng(蛋白质绝对量),并在细胞和小鼠实验中得到了验证.建立了提高SEAP检测系统灵敏度的方法,并进行了导入目的基因不同方法的效率之间的比较.结果表明,建立的换算标准可以使SEAP报告基因系统从定性水平上升到定量水平,而且灵敏度可以达到10-18mol的标准.
- 朱青卢大儒
- 关键词：SEAP报告基因
- 肝细胞癌中转录因子E2F7对Wnt/β-catenin信号通路活性的影响被引量：2
- 2014年
- 探讨肝细胞癌(HCC)中非典型性E2F家族成员E2F7在肝癌细胞生长、分化中的作用及可能涉及的分子机制.本研究运用实时荧光定量PCR检测38例原发性肝细胞癌及对应的癌旁组织中E2F7基因mRNA的表达情况;分别通过基因过表达和RNA干扰技术上调或下调E2F7基因表达,并运用实时荧光定量PCR和Western印迹检测肝癌细胞株MHCC-H中β-catenin及其靶基因cmyc的表达情况;双荧光素酶报告基因系统检测E2F7对Wnt/β-catenin信号通路活性的影响;核浆分离实验检测过表达E2F7基因对β-catenin入核的影响;免疫共沉淀实验检测异位表达E2F7与内源β-catenin的相互作用.结果显示,肝细胞癌组织中E2F7基因的表达量显著高于相应的癌旁组织(P<0.001);转录因子E2F7可与β-catenin相互作用并促进β-catenin进入细胞核.转录因子E2F7可以促进Wnt/β-catenin信号通路的活性.
- 翟杨杨卢大儒韩泽广邓庆
- 关键词：肝细胞癌WNTΒ-CATENIN信号通路
- 多肽Tat与CdTe量子点共价偶联后的跨膜转运被引量：5
- 2006年
- 利用偶联剂EDC将具有跨膜转导功能的多肽Tat与水溶性CdTe量子点进行偶联,并用超滤膜反复超滤纯化,然后比较偶联产物和游离量子点进入PLC细胞的量.对接有多肽的量子点进行研究,结果表明,其荧光发射光谱发生了红移.与游离的量子点相比,修饰后的量子点具有更高的细胞膜穿透性,更容易穿过细胞膜进入PLC细胞内部.
- 薛凤丽卢大儒郭佳马炯苏勇
- 关键词：量子点TAT
- 非酒精性脂肪肝中LPK基因的表观遗传学研究
- 张玉皓姜明红高鑫卢大儒
- 关键词：非酒精性脂肪肝表观遗传学DNA甲基化组蛋白乙酰化
- 腺病毒载体中凝血因子Ⅸ基因表达的电镜检测
- 人凝血因子Ⅸ基因(Human Coagulation Factor Ⅸ,hFIX)缺陷可导致遗传性出血性疾病,血友病 B,用基因治疗的方法有可能从基因水平上根本纠正 hFIX 的缺陷。替代或补充目前沿用的常规输血疗法。本...
- 王琪卢大儒邱信芳薛京伦颜永碧郑尊
- 关键词：基因表达凝血因子病毒载体
- 文献传递
