陈建明
- 作品数：20 被引量：38H指数：4
- 供职机构：西北农林科技大学更多>>
- 发文基金：国家科技攻关计划国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 蛋白激酶CK2与朊蛋白及朊病毒病关系的研究
- 本文为了探讨CK2在TSE中枢神经组织中可能的变化，以保存的羊瘙痒因子263K颅内感染仓鼠的脑组织、羊瘙痒因子139A颅内感染C57BL小鼠脑组织和羊瘙痒因子139A颅内感染仓鼠脑组织为研究对象，制备脑组织悬液，利用cK...
- 陈建明
- 关键词：朊病毒蛋白激酶
- 文献传递
- 重组巴氏毕赤酵母高密度发酵表达人乳铁蛋白的研究被引量：6
- 2004年
- 目的 在保持生物学活性的前提下 ,实现人乳铁蛋白基因在巴氏毕赤酵母中的高密度发酵表达。方法 从人外周血中分离中性粒细胞 ,提取总RNA ,RT PCR方法获得人乳铁蛋白前体全长cDNA序列 ,适当改造后克隆至巴氏毕赤酵母表达载体pPIC 3 5K上并转化酵母宿主KM71,双层滤膜法筛选高表达株进行补料分批发酵 ,对发酵产物的理化及生物学活性进行初步检测。结果 筛选到一株人乳铁蛋白表达量较高的重组巴氏毕赤酵母p3 5 k 7并对其进行了补料分批发酵。整个发酵历时约 9d ,菌浓吸光度A6 0 0 值最高达到 2 6 0以上 ,重组人乳铁蛋白最高表达量为 115mg L ,是摇瓶培养条件下的 7 6 7倍。结论 成功实现了人乳铁蛋白基因在巴氏毕赤酵母中的高密度发酵表达 ,并对发酵参数的优化进行了初步探索。
- 应革吴淑华王静赵小东陈建明张晓光侯云德
- 关键词：高密度发酵人乳铁蛋白基因表达发酵参数
- 中国临床诊断克雅氏病人脑脊液中tau蛋白浓度诊断价值的研究
- 克雅氏病(Creutzfeldt-Jakob disease,CJD)是一种由朊病毒引起的致死性快速进行性神经退行性疾病,到目前为止,确诊需进行脑组织活检或尸检。脑脊液(CSF)与大脑细胞外空间接触最为紧密,因此大脑的生...
- 王桂荣高晨石琪周伟陈建明董辰方石崧王新韦艳姜慧英韩俊董小平
- 关键词：克雅氏病TAUCSFELISA
- 文献传递
- 载脂蛋白ApoE的原核表达以及与PrP蛋白间相互作用的初步研究被引量：3
- 2005年
- 利用RT-PCR方法从人源细胞系SH-SY5Y cDNA中扩增出载脂蛋白ApoE基因,并在pET32a载体中表达融合蛋白His-ApoE,以纯化的融合蛋白免疫实验用兔获得特异性抗体,利用ELISA及免疫共沉淀方法对ApoE及PrP之间的相互作用进行研究。结果表明,SDS-PAGE显示表达的His-ApoE蛋白的相对分子量约为54 000,所制备的抗血清ELISA效价可达到1∶406 900,并能够有效地识别重组及动物组织中的内源性ApoE蛋白。ELISA和免疫共沉淀实验均显示,原核表达的ApoE可与全长的PrP蛋白(PrP23-231)在体外发生相互作用,其作用位点可能位于PrP蛋白的N端。这些结果为TSE经血传播的机制研究提供了新思路。
- 高晨韩俊石琦陈岚万言珍高永军陈建明姜慧英周伟张宝云董小平
- 关键词：抗体分子间相互作用
- 人乳铁蛋白cDNA的克隆及其在毕赤酵母中的表达
- 乳铁蛋白/(Lactoferrin，LF/)是由哺乳动物乳腺和其他外分泌腺产生的一种铁结合糖蛋白，广泛存在于乳汁、唾液、眼泪等分泌物中，因其具有抗病毒、杀菌、免疫调节、基因转录活化等多种生物学活性而受到普遍关注和广泛重视...
- 陈建明
- 关键词：人乳铁蛋白毕赤酵母PPIC9K克隆
- 文献传递网络资源链接
- 通用型病毒检测芯片在三种人类致病病毒属检测中的应用被引量：5
- 2006年
- 目的研究制备对人类有致病作用的38个属的病毒寡核苷酸(oligo)基因芯片对三种人类致病病毒的检测能力。方法应用生物信息学软件设计70-meroligo探针,固定于玻片载体制备成基因芯片。以痘苗病毒天坛株、甲肝病毒、乙肝病毒作为检测样本,提取病毒核酸,经随机引物扩增、荧光标记,用于芯片杂交,清洗和干燥后对芯片进行扫描和数据分析。结果芯片上oligo探针能与相应病毒的PCR扩增样品杂交,呈现阳性荧光信号。结论建立的病毒寡核苷酸基因芯片能够检出和区分三种检测病毒,为进行未知病毒的基因芯片筛查方法的建立奠定了基础。
- 陈建明韩俊董辰方高晨雷艳君安润谭文杰周永东郭瑜姜慧英祝庆余董小平
- 关键词：基因寡核苷酸类病毒学
- 一种新的HPV的检测方法及巨大疣患者感染的HPV-2变异株启动子活性的研究
- 目的:建立混合引物 PCR 方法检测寻常疣感染相关的 HPV 的型别;研究两例临床罕见巨大寻常疣病患者感染的 HPV-2变异株在 LCR 及转录调控蛋白 E2上的突变对病毒早期启动子活性的影响。方法:利用建立的 PCR ...
- 雷艳君高晨安润陈建明石琦姜慧英韩俊董小平
- 关键词：启动子活性变异株
- 文献传递
- 2006年1至8月份我国克雅病监测病例分析被引量：13
- 2007年
- 目的了解我国克雅病（Creutzfeldt-Jakob disease，CJD）的发病情况及分布特征。方法对2006年1至8月份我国克雅病监测网络获得的可疑CJD病例的l临床及流行病学资料进行分析；收集患者脑脊液及血液样品，利用Western Blot方法对脑脊液中14—3—3蛋白进行检测；利用PCR及测序方法对脚基因进行序列分析。结果共发现CJD临床诊断病例10例，疑似诊断病例8例。均为散发型CJD病例，病例的地理分布及职业没有明显的聚集性。发病年龄平均为60岁，男女比例接近1：1。首发症状中以快速进行性痴呆所占比例最多，占44％。临床诊断病例比疑似诊断病例出现更多的典型临床表现。结论我国监测到的CJD病例主要以散发型为主，地理、职业、男女比例以及平均年龄均符合散发型CJD的分布特点。
- 高晨韩俊周伟陈建明石琦张宝云向妮娟高永军董小平
- 具有八肽重复区突变的朊蛋白其抗氧化性降低被引量：1
- 2008年
- 抗氧化性被认为是细胞朊蛋白的主要生理功能之一,研究显示它的抗氧化性主要与朊蛋白序列中的八肽重复区有关.但是迄今为止它的抗氧化机制仍旧不清楚.我们构建表达了野生型朊蛋白(PrP-PG5)和它的不同八肽重复区突变体0(PrP-PG0),9(PrP-PG9)和12(PrP-PG12).各种原核表达突变体蛋白在H2O2氧化后出现分子量的增加,并可导致羰基产生.MTT和细胞计数实验显示表达各种突变体的细胞存活率明显低于表达野生型朊蛋白(PrP-PG5)的细胞.细胞内ROS检测发现表达各种突变体的细胞内ROS水平明显高于表达野生型朊蛋白(PrP-PG5)的细胞.此外,谷胱甘肽过氧化物酶检测显示表达野生型朊蛋白(PrP-PG5)的细胞内谷胱甘肽过氧化物酶水平明显高于表达各种突变体的细胞.H2O2处理细胞后,转染突变体的细胞总的羰基产物数量明显高于转染野生型朊蛋白(PrP-PG5)的细胞,而表达突变体细胞及转染空载体的细胞较表达野生型朊蛋白(PrP-PG5)的细胞对氧化物质的抵抗性明显减弱.这些结果提示,具有正确八肽重复区数目对于朊蛋白(PrP)的抗氧化作用起关键作用,PrP的抗氧功能的丢失可能参与家族性朊病毒病的病理过程.
- 安润董辰方雷艳君韩露李平陈建明王桂荣石琦高晨姜慧英周伟韩俊楚雍烈董小平
- 关键词：PRP抗氧化性谷光甘肽过氧化物酶细胞活性
- 人朊蛋白相关蛋白Shadoo的表达、纯化及抗体的制备
- 2007年
- 目的克隆、表达和纯化人朊蛋白相关Shadoo(SHO)蛋白并制备抗Shadoo的多克隆抗体。方法提取仓鼠各组织的mRNA,分析SHO基因在仓鼠各组织中转录水平的差异;提取人DNA,PCR方法获得人SHO基因,克隆至融合表达载体,在大肠埃希菌中表达人SHO蛋白并纯化;以纯化蛋白为抗原免疫家兔制备抗血清,用Western blot方法分别检测与重组及内源性SHO蛋白的免疫反应性。结果SHO基因在仓鼠各组织中的转录水平差异很大,脑组织转录水平高。在大肠埃希菌中表达了分子质量单位为37 ku的人SHO融合蛋白,制备的SHO蛋白抗体可与重组的SHO蛋白反应,可识别内源性的SHO。结论成功表达纯化人SHO融合蛋白并制备了抗SHO抗体,为研究SHO和正常朊蛋白之间的关系打下初步基础。
- 高永军高晨陈建明石琦郭燕张宝云董小平
- 关键词：朊蛋白蛋白纯化多克隆抗体
