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AlphaLISA技术的发展及应用被引量：2: 2011年; AlphaLISA技术是一种基于微珠的化学发光的新型均相检测技术,与传统的ELISA技术相比具有更高的敏感性、精确性、均一性、背景低、广泛的动态检测范围,而且无需洗涤及样本需求量极少等特点.该技术可用于多种组织、细胞来源的生物分子的检测,如细胞因子、抗原抗体的检测、蛋白相互作用及蛋白质与核酸相互作用的检测以及药物分析等研究.随着AlphaLISA技术的发展,该技术已在医学及分子生物学领域得到了广泛的应用.; 王颖宋娟崔雨甘星孙鹏王克霞韩俊董小平; 关键词：分子检测

中国10例家族型致死性失眠症患者的临床及家族特征分析被引量：3: 2012年; 目的对2006年以来克雅病监测网络监测到的10例家族型致死性失眠症(fatal familial insomnia,FFI)确诊病例进行临床特征分析。方法应用世界卫生组织(WHO)推荐的《克雅病诊断标准》对报告病例进行诊断,对其主要临床症状、家族史及病理特征进行分析。结果 FFI主要临床症状为失眠、自主神经功能异常及肌阵挛。自2006年克雅病监测网络开始监测,迄今已确诊10例家族型致死性失眠症患者。患者平均发病年龄38岁(19～55岁),首发症状多种多样,包括睡眠节律的改变、视觉改变、头晕以及厌食。睡眠节律的改变出现在所有的病例中并且持续整个病程。患者也出现交感神经兴奋、记忆力丧失、运动障碍、肌阵挛及高血压症状。平均病程9.5个月。脑电图及磁共振成像(MRI)没有显示特殊的异常,脑脊液14-3-3蛋白在8个检测病例中有5例阳性。8例病例出现与疾病相关的家族史。病理检测发现丘脑部位出现明显的神经元损伤。结论中国的FFI病例与高加索人具有相似的临床特征,与其他遗传型克雅病比较,D178N突变的FFI病例在中国具有相对较高的出现频率。; 石琦陈操高晨田婵周伟张宝云韩俊董小平; 关键词：克雅病

朊病毒病(Prion disease): 韩俊

具有八肽重复区突变的朊蛋白其抗氧化性降低被引量：1: 2008年; 抗氧化性被认为是细胞朊蛋白的主要生理功能之一,研究显示它的抗氧化性主要与朊蛋白序列中的八肽重复区有关.但是迄今为止它的抗氧化机制仍旧不清楚.我们构建表达了野生型朊蛋白(PrP-PG5)和它的不同八肽重复区突变体0(PrP-PG0),9(PrP-PG9)和12(PrP-PG12).各种原核表达突变体蛋白在H2O2氧化后出现分子量的增加,并可导致羰基产生.MTT和细胞计数实验显示表达各种突变体的细胞存活率明显低于表达野生型朊蛋白(PrP-PG5)的细胞.细胞内ROS检测发现表达各种突变体的细胞内ROS水平明显高于表达野生型朊蛋白(PrP-PG5)的细胞.此外,谷胱甘肽过氧化物酶检测显示表达野生型朊蛋白(PrP-PG5)的细胞内谷胱甘肽过氧化物酶水平明显高于表达各种突变体的细胞.H2O2处理细胞后,转染突变体的细胞总的羰基产物数量明显高于转染野生型朊蛋白(PrP-PG5)的细胞,而表达突变体细胞及转染空载体的细胞较表达野生型朊蛋白(PrP-PG5)的细胞对氧化物质的抵抗性明显减弱.这些结果提示,具有正确八肽重复区数目对于朊蛋白(PrP)的抗氧化作用起关键作用,PrP的抗氧功能的丢失可能参与家族性朊病毒病的病理过程.; 安润董辰方雷艳君韩露李平陈建明王桂荣石琦高晨姜慧英周伟韩俊楚雍烈董小平; 关键词：PRP 抗氧化性谷光甘肽过氧化物酶细胞活性

中药组合物在制备抑制乙型流感病毒的药物中的应用: 本发明涉及中医药技术领域，尤其涉及一种中药组合物在制备抑制乙型流感病毒的药物中的应用。本发明所述中药组合物由包括厚朴、焦槟榔、煨草果、麻黄、苦杏仁、羌活、生姜、广藿香、佩兰、苍术、白术、茯苓、焦山楂、焦六神曲、焦麦牙、绵...; 韩俊夏志强梅国勇曲颖丽崔思敏侯小宁杜海军

离子型聚丙烯纤维对病毒的吸附作用研究: 2011年; 目的研究新型离子型聚丙烯纤维以防止病毒感染.方法构建四种离子型表面活性聚丙烯纤维,与表达GFP的重组腺病毒分别相互作用,通过观察GFP的表达和病毒六邻体壳粒基因的表达来判断纤维对病毒的吸附能力.结果四种纤维对腺病毒具有一定的吸附或灭活能力.金属离子纤维和两性离子聚丙烯纤维具有更好的灭活病毒能力.结论提示金属离子纤维和两性离子聚丙烯纤维可以作为实验室防护装备的原材料.; 宋娟周伟吴政王颖崔雨周绍箕李朝品韩俊; 关键词：聚丙烯类腺病毒科

细胞自噬促进柯萨奇病毒B3复制的研究被引量：4: 2019年; 本研究探索柯萨奇病毒B3(Coxsackievirus B3,CVB3)感染引起的自噬与病毒复制之间的关系。CVB3感染HeLa细胞,并在病毒感染后6 h、8 h和10 h时检测LC3-Ⅰ蛋白、LC3-Ⅱ蛋白和p62蛋白的表达水平。结果显示CVB3病毒感染促使LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值升高,同时降低p62蛋白的表达。分别将自噬诱导剂雷帕霉素(Rapamy-cin)、自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-Methyladenine,3MA)或溶酶体抑制剂阿洛司他丁(Aloxistatin,E46D)预处理HeLa细胞2 h,CVB3感染药物处理细胞并在病毒感染6 h后收集细胞、检测CVB3病毒VP1蛋白的表达。结果显示雷帕霉素和E64D促使CVB3病毒VP1蛋白表达增加,而3MA降低CVB3病毒VP1蛋白的表达。本研究得出结论 CVB3病毒感染诱导自噬进而促进病毒复制。; 罗小暖宋娟宋芹芹夏冬史冰田刘宓夏志强王晓乐秘春景韩俊; 关键词：自噬病毒复制

伪狂犬病毒PRV-2022毒株gD蛋白突变与人Nectin-1结合力: 2024年; 目的为探究PRV-2022毒株gD蛋白不同突变对与Nectin-1受体结合的影响。方法通过PCR、RT-qPCR和基因测序技术对PRV-2022毒株进行鉴定,利用生物信息学方法对PRV-2022毒株gD基因进行遗传进化分析。体外构建PRV-2022毒株gD蛋白胞外域第69位和第82位氨基酸突变的重组表达质粒并表达纯化,通过His-pull down和生物层干涉技术比较了重组gD蛋白不同突变与Nectin-1受体的结合能力。结果从伪狂犬病毒PRV-2022毒株中调取gD基因,通过遗传进化分析发现PRV-2022毒株与2011年之前分离的毒株分属于同一个分支,遗传距离较近。成功构建含有A69V和S82N氨基酸突变的gD蛋白胞外域表达质粒,表达纯化得到重组PRV gD胞外域蛋白,比较发现gD-69、gD-82、gD-2022、gD-Bartha蛋白均能与Nectin-1相互作用。相对于PRV经典疫苗株Bartha,gD蛋白第69位和第82位氨基酸双突变后与人Nectin-1亲和力最高,而无论单独任一突变位点都使gD蛋白与Nectin-1的亲和力降低。结论PRV的gD蛋白存在A69V和S82N突变时明显影响与人Nectin-1受体结合能力且同时突变时与人Nectin-1亲和力最高。; 王新悦王维禹梅国勇韩俊陈操; 关键词：伪狂犬病伪狂犬病毒分子相互作用

CVB32A蛋白酶抑制帽样结构依赖的蛋白翻译: 2013年; 目的探讨CVB3的蛋白酶2A对真核细胞帽样蛋白翻译和内部核糖体进入位点（IRES）翻译机制的影响。方法构建表达载体pcDNA3．1—2A，将此表达载体分别与pEGFP—N1、pGL3（F-luc）以及pIRES-GFP载体共转染细胞后，荧光显微镜观察绿色荧光蛋白（GFP）的表达，检测荧光素酶蛋白的表达。WesternBlot检测CVB3病毒和pcDNA3．1-2A对真核生物翻译起始因子4GI（eIF4GI）及多聚A尾结合蛋白（PABP）的影响。结果pcDNA3．1之A可以减少帽样依赖的GFP和荧光素酶蛋白的表达，但可以促进IRES依赖的GFP表达。CVB32A基因质粒转染和CVB3感染后，均可发现细胞内elF4G的切割现象；同时CVB3对PABP也有降解作用，而CVB32A基因转染对PABP无明显作用。结论CVB3的蛋白酶2A抑制真核细胞帽样途径蛋白翻译，促进IRES途径的翻译。; 卢明枝宋娟孙鹏宋芹芹盛琳君王宝栋迟苗苗姚海兰李朝品韩俊; 关键词：柯萨奇病毒感染蛋白激酶类核糖体

河南省一例致死性家族性失眠症病例研究被引量：2: 2009年; 目的调查和研究报道1例散发型致死性家族性失眠症（sporadic Family Fatalisomnia，sFFI）的临床症状，分析人类朊病毒病（Human prion protein，PrP）基因特征。方法随访调查1例疑为FFI患者的临床特征和家族发病史；采集患者脑脊液及抗凝全血标本后Western．Blot检测14-3-3脑蛋白及常染色体PrP基因突变及测序分析；采集患者家族成员抗凝全血进行PrP基因突变检测。结果根据患者的临床表现及PrP基因检测结果，PrP呈D178N／129M／M突变基因型；且脑蛋白14—3．3阳性，这在以往少有报道，提示今后在临床鉴别、诊断人类克-雅病（CJD）与FFI患者时，应注重甄别临床症状及实验室结果；14名直系及旁系家族成员PrP基因均未出现突变，且家族内无其他人患类似疾病。结论该患者为致死性家族性失眠症单发性病例；患者的临床表现及PrP基因突变检测对甄别单发、家族聚集性的致死性失眠症及人类CJD作用重大。该FFI病例为我国首次报道，具有较大的临床意义和科研意义。; 夏胜利许予明徐强谢志强申晓靖周伟杜冉张锦韩俊许汴利董小平; 关键词：朊病毒病染色体朊病毒

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韩俊

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