吴文学 作品数:103 被引量:371 H指数:12 供职机构: 中国农业大学 更多>> 发文基金: 公益性行业(农业)科研专项 农业部动物疫情监测与防治项目 国家大学生创新性实验计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 化学工程 更多>>
预防治疗无乳链球菌和牛支原体所致疾病的疫苗及其制备方法与应用 本发明公开了预防治疗无乳链球菌和牛支原体所致疾病的疫苗,所述疫苗的活性称为GBS CPS‑rP48,所述GBS CPS‑rP48是无乳链球菌荚膜多糖提取物和蛋白质rP48偶联得到的物质。采用本发明的疫苗,经3针肌肉注射后... 吴文学 田欣睿 宋佰芬 王朋朋鸡毒支原体MGA_0676蛋白内化细胞与细胞NEDD8激活酶相互作用激活NF-κB诱导鸡胚成纤维细胞凋亡 鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum核酸酶样蛋白MGA 0676是重要的核酸酶样蛋白,具有核酸酶活性,可以内化进入宿主细胞诱导鸡细胞凋亡功能。为研究MGA_0676诱导鸡细胞凋亡的分子机制,本研究... 许健 吴文学 李金祥 沈俊俊 蒋菲 李细胞鹏 滕达 于自强 何金艳 李霞 李永清关键词:鸡毒支原体 细胞内吞 NF-ΚB 细胞凋亡 牛传染性鼻气管炎病毒与牛支原体二联灭活疫苗及其制备方法与所用悬浮MDBK细胞 本发明提供了一种牛传染性鼻气管炎病毒与牛支原体二联灭活疫苗及其制备方法与所用悬浮MDBK细胞。本发明提供了悬浮MDBK细胞,在此基础上建立了悬浮培养IBRV抗原病毒液的方法,采用该方法所得的IBRV抗原病毒液具有抗原含量... 吴文学 王朋朋 格勒图文献传递 牛肠道病毒的分离和鉴定 2025年 为了解我国牛肠道病毒(BEV)流行现状,为其防控提供理论依据,本试验从四川省成都市某牛场的腹泻病牛粪便样本中分离得到1株病毒,将其命名为SC-726并进行后续研究。将SC-726接种牛肾细胞(MDBK)后观察细胞病变效应(CPE),计算病毒含量,使用透射电子显微镜观察该病毒的形态特征,分析其理化特性、核酸型和细胞嗜性,绘制一步生长曲线,最后对该分离株进行5′非翻译区(5′UTR)基因测序以分析其遗传演化。结果显示,SC-726分离株感染MDBK细胞后,细胞发生明显的CPE;病毒最高滴度为1×10^(6.2) TCID_(50)/0.1 m L;电镜下观察到直径约30 nm的无囊膜球形粒子,符合传统小RNA病毒形态学特征;理化特性鉴定结果显示,该分离株几乎不受有机溶剂(乙醚、氯仿)和胰蛋白酶的影响,同时具有一系列与BEV相符的特征,如耐酸、不耐强碱、热敏感;DNA抑制剂阿糖胞苷(Ara-C)对该病毒滴度无影响,判定为RNA病毒;SC-726株能够在MDBK、乳仓鼠肾细胞(BHK-21)、猪肾细胞(PK-15)、非洲绿猴胚胎肾细胞(Marc-145)和犬肾细胞(MDCK)等多种动物细胞上增殖;遗传进化分析结果显示,该分离株为F型牛肠道病毒(BEV-F)。本试验从腹泻牛粪便样本中成功分离出1株BEV-F,进一步丰富了我国BEV资料库,为该病毒病的防治提供了理论依据。 王海杰 张跃伟 解长占 吴浩 王爽 谷月 李金祥 吴文学关键词:病毒滴度 理化特性 分离株 基于猴痘病毒A27L蛋白的间接ELISA抗体检测方法的建立 被引量:5 2022年 猴痘病毒(MPXV)是一种能引起人兽共患病的正痘病毒属(Orthopoxvirus)成员,在人群和野生动物中具有较高的感染率,对人类公共卫生安全造成重大威胁。为了建立快速、准确的MPXV感染抗体ELISA检测方法,对人群和动物中MPXV感染情况进行流行病学监测,本研究构建了MPXV-A27L蛋白的原核表达系统,以其作为包被抗原建立了MPXV间接ELISA抗体检测方法,并优化了一系列反应条件,确定了检测结果判定标准,评估了建立方法的特异性、重复性和敏感性。结果显示,成功表达了MPXV-A27L蛋白,确定了ELISA最佳反应条件:抗原包被浓度为0.25μg/mL;1%BSA封闭1 h;待检血清1∶200稀释,37℃孵育30 min;酶标二抗1∶20000稀释,孵育30 min;底物显色10 min。待检血清样品OD_(450)值>0.316时判定为阳性,OD_(450)值<0.262时判定为阴性,OD_(450)值介于0.262~0.316时则判为可疑。该检测方法与山羊痘病毒属的山羊痘病毒(GTPV)、绵羊痘病毒(SPPV)和牛结节性皮肤病病毒(LSDV)阳性血清不发生交叉反应;批内变异系数为2.75%~7.45%,批间变异系数为6.55%~9.59%;该方法可检测到血清最大稀释度为1∶104。结果表明,本研究建立的MPXV间接ELISA抗体检测方法具有良好的特异性、重复性和敏感性,为MPXV的临床检测和流行病学调查提供了依据,对于猴痘疫情的防控具有重要作用。 朱俊达 王爽 任书凝 张子卉 李雅睿 刘国瑞 吴文学 王永强 彭辰关键词:猴痘病毒 间接ELISA 一种化合物Ibrutinib在制备抗病毒药物中的应用、药物组合物 本发明提供了一种化合物Ibrutinib在制备抗病毒药物中的应用、药物组合物,属于生物医药技术领域。本发明首次发现激酶抑制剂Ibrutinib具备广谱高效的抗病毒活性,可高效抑制3种病毒(VACV‑WR、VACV‑MVA... 彭辰 牛康 吴文学 王玺如一种H9亚型禽流感病毒检测试剂盒及其应用 本发明公开了一种H9亚型禽流感病毒检测试剂盒及其应用。本发明提供的试剂盒,包括三对引物,即与H9亚型禽流感病毒的HA基因结合的内侧引物对、外侧引物对和环形引物对。本发明的H9亚型禽流感病毒检测试剂盒,检测灵敏度高,最低可... 吴文学 蒋菲 黄书林 张跃伟文献传递 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒检测试剂盒及其应用 本发明公开了一种高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒检测试剂盒及其应用。本发明提供了检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的专用引物,由以下三对环介导等温扩增所用引物组成:一对引物是能结合于GenBank Accession Nu... 吴文学 张跃伟 付萍文献传递 补体C9分子原核表达与多克隆抗体的制备 被引量:1 2019年 通过大肠杆菌表达系统表达补体C9重组蛋白,并制备其多克隆抗体,用于检测沉积菌体表面的补体C9分子;方法:通过PCR以兔肝细胞cDNA文库为模板扩增获得补体C9部分基因,并将其克隆至原核表达载体pEASY.-Blunt E1,经测序鉴定成功获得重组质粒pBlunt-C9。将其转化至大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)中,经IPTG诱导,Ni-NTA亲和层析柱纯化后,获得重组蛋白。将纯化的重组蛋白免疫BALB/c雌鼠,制备抗C9的鼠源多克隆抗体。结果显示,ELISA测得鼠抗C9多克隆抗体效价为1∶12800,Western Blotting表明,制备的多克隆抗体可以特异性识别沉积在金黄色葡萄球菌和链球菌表面的C9分子,为进一步研究补体的生物学功能以及巩膜复合体(MAC)抗细菌感染机制奠定了基础。 邓亦宁 张云科 吴文学关键词:补体 MAC 多克隆抗体 鸡球虫活苗的田间试验 被引量:5 1997年 鸡球虫活苗的田间试验韩谦吴文学刘群(中国农业大学动物医学院北京100094)陆京平姬瑞周(北京市海淀区兽医站)目前世界上已注册的球虫苗有4种,其中有美国的活苗(Coccivac)和加拿大的活苗(Immucox),以及英国的弱毒活苗(Paracox)和... 韩谦 吴文学 刘群 陆京平 姬瑞周关键词:球虫病 疫苗 鸡病 免疫