复旦大学附属中山医院青浦分院肝病科
- 作品数：11 被引量：33H指数：4
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- 健脾解毒方对二乙基亚硝胺诱导的肝癌大鼠肝组织CCR1和Cyclin D1 mRNA表达的影响
- 2013年
- 目的:探讨二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)诱导大鼠肝癌过程中肝组织CC趋化因子受体1(CCR1)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)的表达规律及健脾解毒中药的干预机制。方法:雄性Wistar大鼠,随机分为正常组(n=25)、模型组(n=40)及中药组(n=40)。除正常组外,其他组大鼠在1～12周饮用含DEN 80mg/L的饮水以诱癌(8mg.kg-1.d-1),共12周。中药组大鼠同时给予含生药1.75g/ml的健脾解毒方灌胃(10ml/kg),正常组大鼠给予10ml/kg生理盐水灌胃,1次/d,共12周。于4、8、12、16周时相点,各组随机取5只大鼠剖腹取肝,20周时剩余大鼠全部剖腹取肝,观察肝脏外观,计算病死率和腹水生成率,肝组织进行HE染色,应用RT-PCR半定量检测肝组织CCR1、Cyclin D1 mRNA的表达。结果:在20周实验结束时,正常大鼠无死亡,而模型大鼠死亡率为42.5%(17/40),中药组死亡率为17.5%(7/40);16周～20周时模型组大鼠腹水发生率为87.5%(7/8),而中药组腹水发生率为44.4%(8/18),中药组与模型组差异有显著性意义(P<0.05)。肝组织HE染色表明,至第20周成瘤率达到100%。RT-PCR结果显示,与正常组比较,模型组各时段CCR1 mRNA均显著上调(P<0.01),与模型组比较,中药组除第8周外,其余各时段CCR1 mRNA均显著下调(P<0.01);与正常组比较,模型组大鼠除第4周及8周的Cyclin D1表达下调外,其余均出现显著上调,与模型组比较,中药组大鼠第4周、8周及12周的Cyclin D1表达上调,在16周时出现显著下调(P<0.01),第20周时两组差异不明显。结论:CCR1、Cyclin D1的表达上调与二乙基亚硝胺诱导肝癌形成密切相关,健脾解毒中药可以较好延缓肝癌的发生和发展,可能与下调CCR1关系密切,但下调Cylin D1的作用不明显,值得进一步深入研究。
- 张斌李琦殷佩浩赵成根高虹范忠泽
- 关键词：二乙基亚硝胺健脾解毒方细胞周期蛋白D1
- 大黄素致大鼠药物性肝损伤的肝功能研究被引量：2
- 2015年
- 目的研究大黄素致大鼠药物性肝损伤过程中机体肝功能情况。方法 Wistar雄性大鼠100只,随机分成5组,按照每天大黄素摄入量不同,分为高剂量组(16 mg/kg·d-1)、较高剂量组(8 mg/kg·d-1)、中剂量组(4 mg/kg·d-1)、低剂量组(2 mg/kg·d-1)、正常组(灌胃等体积蒸馏水),每组20只,连续灌胃12周,于4周、8周各组分别解剖5只,至12周解剖剩余全部大鼠,观察体质量及肝脾指数的变化;采用全自动生化检查肝功能;肝组织炎症情况采用肝组织HE染色进行观察。结果各组大鼠生长状态无明显差异,均无死亡和腹水形成。在体质量方面,较高剂量组和高剂量组有下降趋势,尤其是高剂量组体质量下降更显著;在肝脾指数方面,较高剂量组和高剂量组的肝脾指数均有增加趋势,尤其是高剂量组更显著。另外,较高剂量组和高剂量组的血清总胆红素(total bilirubin,TBil)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ACT)及天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)均有增加趋势,尤其是高剂量组增加更明显,至12周达到最大,而白蛋白水平各组差异不显著。对肝组织进行HE染色情况进行研究,发现各组在4周和8周时差异不明显,而在12周时较高剂量组和高剂量组肝组织炎症活动明显,尤其高剂量组更显著。结论采用大黄素口服可以诱导出大鼠肝损伤,有必要进一步研究。
- 张斌丁慎华钱雪梅朱薇珊陆群
- 关键词：药物性肝损伤大黄素肝功能动物模型
- 大剂量大黄素致大鼠肝损伤及其机制的初步研究被引量：7
- 2015年
- 目的初步研究大黄素致药物性肝损伤(DILI)大鼠模型氧化应激相关指标及肝脏病理的动态变化规律。方法 Wistar雄性大鼠按每天大黄素摄入量不同,分为高剂量组、较高剂量组、中剂量组、低剂量组、溶剂对照组及正常组,于4、8和12周分别观察肝脾指数、肝组织苏木精-伊红染色法(HE)染色、肝组织丙二醛(MDA)及单胺氧化酶(MAO)的水平。结果各组生长状态无明显区别,无死亡和腹水形成。高剂量组和较高剂量组的肝脾指数、肝组织MAO及MDA含量有升高趋势,第8周后肝组织炎症活动明显,其中高剂量组变化更明显。结论大剂量大黄素可以造成大鼠肝损伤,其损伤可能与机体氧化应激有关,值得进一步深入研究。
- 张斌丁慎华钱雪梅朱薇珊
- 关键词：药物性肝损伤大黄素病理氧化应激
- HBx过表达对肝癌HepG2细胞AKT、PI3K表达的影响被引量：6
- 2019年
- 目的研究乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)对肝癌细胞增殖的影响,并探索HBx过表达对肝癌细胞PI3K/AKT表达的影响。方法构建过表达HBx的肝癌HepG2细胞,测定其荧光素酶的表达,采用MTT法研究肝癌细胞增殖情况,采用Western blotting法对各组细胞PI3K及AKT的表达情况进行研究。结果成功构建了过表达HBx的肝癌HepG2细胞,HBx有促进肝癌细胞增殖的作用,进一步研究发现,过表达HBx有上调肝癌细胞PI3K及AKT表达的作用。结论 HBx有促进肝癌细胞增殖作用,其机制可能与上调PI3K/AKT表达有关。
- 张斌丁慎华徐春江许智玲朱薇珊
- 关键词：肝癌细胞PI3KAKTHBX
- 大黄素致药物性肝损伤大鼠肝组织病理学初步观察被引量：3
- 2015年
- 目的研究大黄素致药物性肝损伤(DILI)大鼠肝组织病理学的动态变化情况。方法取Wistar雄性大鼠100只,随机分成5组,按照每日大黄素摄入量的不同,分为大剂量组(16mg·kg^(-1)·d^(-1))、较大剂量组(8mg·kg^(-1)·d^(-1))、中剂量组(4mg·kg^(-1)·d^(-1))、小剂量组(2mg·kg^(-1)·d^(-1)),给予药物灌胃,和正常组,给予等体积蒸馏水灌胃,每组20只,于实验的4w、8w分别解剖5只大鼠,至12w解剖剩余全部大鼠,观察体质量的变化;同时采用HE染色和VG染色观察肝组织炎症及纤维化情况,并对各组纤维化程度的等级资料采用Radit分析法比较其差异的显著性。结果各组大鼠生长状态无明显差异,各组均无死亡和腹水形成。通过对各组动物体质量的比较,发现在较大剂量组和大剂量组动物体质量下降,在实验12w时,正常组、小剂量组、中剂量组动物体质量分别为(335±10.56)g、(350.4±7.23)g和(338.6±7.54)g,显著重于大剂量组[(300.4±8.91)g,P<0.01],而较大剂量组为(335±10.56)g,与大剂量组差异不显著(P>0.05);在实验4w和8w时,各种动物肝组织纤维化变化的差异不明显,而在12w时,发现在较大剂量组和大剂量组动物肝组织炎症活动明显,肝组织出现纤维化改变,尤其是在大剂量组更加显著(x^2=14.75,P<0.05)。结论随着给动物服用大黄素剂量的增加和时间延长,可能会引起DILI。本实验为药物性肝损伤模型的建立进行了初步研究,需要进一步验证。
- 张斌丁慎华钱雪梅朱薇珊
- 关键词：药物性肝损伤大黄素病理学
- 苦参素穴位注射联合恩替卡韦治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎临床观察被引量：5
- 2014年
- 目的:观察苦参素穴位注射联合恩替卡韦(ETV)治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎(CHB)的临床疗效。方法:108例CHB患者随机分为两组。治疗组56例给予口服ETV 0.5mg/次,1次/d,联合苦参素注射液600mg,分双侧足三里穴位注射,2次/w;对照组52例单纯口服ETV0.5mg/次,1次/d治疗。两组病例抗病毒治疗期为1年。治疗期间观察两组患者血清丙氨酸转氨酶(ALT)水平、HBV血清学指标和HBV DNA定量变化。结果:治疗1年后,两组患者HBV DNA定量和ALT水平均较治疗前显著下降,差异有统计学意义(P<0.05),但两组间差异无统计学意义(P>O.05);治疗组HBeAg阴转率、HBeAg/HbeAb转换率及HBV DNA阴转率高于对照组,差异有统计学意义(P
- 胡洁华钱雪梅
- 关键词：慢性乙型肝炎恩替卡韦苦参素穴位注射
- 二乙基亚硝胺诱导大鼠肝癌组织CLDN1基因表达及其甲基化被引量：4
- 2013年
- 目的探讨二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)诱导大鼠肝癌发生中肝癌组织CLDN1基因表达及其启动子甲基化的规律。方法 65只雄性Wistar大鼠随机选择40只作为模型组,其余作为正常组。模型组在1～12周饮用含DEN 80 mg/L的饮水以诱癌(每日8mg/kg),各组在造模过程的第4周、8周、12周、16周随机5只取肝,第20周剩余大鼠取肝,应用RT-PCR方法检测肝组织CLDN 1 mRNA的表达,应用MSP法检测肝组织CLDN1启动子甲基化和非甲基化。结果模型大鼠病死率为10%(4/40),正常组无死亡。至第20周,成瘤率达到100%。RT-PCR显示,与正常组比较,模型组在16周和20周CLDN1mRNA表达下调(P<0.05),其他各周两组差异不显著。MSP结果表明,模型组肝组织CLDN1甲基化率达77.78%,而正常肝组织甲基化率为24%,两者比较差异有显著性(P<0.01)。结论 CLDN1启动子甲基化及CLDN1基因表达下调与大鼠肝癌病变相关,对其机制值得进一步深入研究。
- 张斌李琦殷佩浩高虹赵成根范忠泽
- 关键词：原发性肝癌二乙基亚硝胺DNA甲基化
- 肝癌缺失基因1甲基化及其表达在二乙基亚硝胺诱导大鼠肝癌发病中的机制被引量：1
- 2013年
- 目的探讨二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)诱导的大鼠肝癌模型肝组织肝癌缺失基因1(DLC1)启动子甲基化及其蛋白表达的可能机制。方法雄性Wistar大鼠,随机分为正常对照组(n=25)、模型组(n=40)。除正常对照组外,模型组在1～12周饮用含DEN80mg/L的饮水以诱癌(每日8mg/kg),共12周。于20周时大鼠全部剖腹取肝,观察肝脏外观,计算病死率和腹水生成率,应用MSP法检测各组肝组织DLC1启动子甲基化和非甲基化;并应用免疫组织化学法检测肝组织DLC1蛋白表达水平。结果在20周实验结束时,正常大鼠无死亡,而模型大鼠死亡率为10%(4/40),20周时模型组腹水发生率为22.2%(8/36)。至第20周,模型组成瘤率达到100%。MSP结果表明,模型组肝癌组织DLC1甲基化率达91.67%,而正常组肝组织甲基化率为12%,两者比较差异有统计学意义(P<0.01)。免疫组织化学法检测结果显示,模型组肝组织DLC1蛋白表达较正常组下调。结论 DLC1启动子甲基化及DLC1的表达下调与DEN诱导的大鼠肝癌发病密切相关,其机制值得进一步深入研究。
- 张斌李琦殷佩浩高虹赵成根范忠泽
- 关键词：二乙基亚硝胺DNA甲基化
- 乙型肝炎肝硬化失代偿期患者并发心房颤动1例报告被引量：2
- 2014年
- 女性患者，58岁，农民。于2009年发现乙型肝炎，期间病情稳定，于2011年10月因劳累，病情加重，当地医院确诊“肝硬化失代偿期”住院治疗1个月后康复，期间未予抗病毒治疗，出院后定期复查肝功能、电解质及B超等检查。于2012年3月19日因“腹胀伴尿少1个月”住本院治疗，入院查体：体温36．8℃，心率60次／min，呼吸17次／min，血压（BP）110／80mmrig。神清，呼吸平，精神可，皮肤巩膜轻度黄染，肝掌（一），蜘蛛痣（一），气管居中，双侧甲状腺无肿大，颈静脉无充盈。胸廓对称，双肺呼吸音低，未闻及明显干湿哕音。心律齐，各瓣膜听诊区未闻及病理性杂音，腹部膨隆，中上腹轻压痛，无反跳痛，肝脾触诊不满意，移动性浊音（＋），双下肢轻度浮肿。于3月20H查肝功能：TBil49．7mmol／L，ATJT60U／L，AST137U／L，白球比（A／G）25／30g／L；凝血酶原时间（PT）18．7S；电解质：钾2．5mmol／L，钠139mmol／L，氯100mmol／L；血常规：白细胞3．5×10^9／L，红细胞3．15×10^12／L，血红蛋白108g／L，血小板53×10^9／L；HBVM“小三阳”，HBVDNA：5．07×10^6IU／ml，甲胎蛋白（＋）；腹部B超：肝硬化、脾肿大、肝囊肿、腹腔盆腔积液；腹部cr：肝硬化腹水伴门静脉高压、脾肿大、肝内多发小囊肿、两侧少量胸腔积液；胸片：右侧少量胸腔积液、两侧膈面抬高；心电图：窦性心律、左胸导联低电压。入院诊断为：（1）乙型肝炎肝硬化失代偿期；（2）低钾血症；（3）自发性腹膜炎。
- 丁慎华钱雪梅张斌
- 关键词：肝炎乙型肝硬化心房颤动
- 中药健脾解毒方剂对二乙基亚硝胺诱导大鼠肝癌的预防作用被引量：2
- 2013年
- 目的探讨健脾解毒方对二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)诱导大鼠肝癌的预防作用。方法雄性Wistar大鼠105只,随机分为正常组(n=25)、模型组(n=40)及中药组(n=40)。除正常组外,其他2组在1～12周饮用含80 mg/L DEN的水[8 mg/(kg.d)]以诱癌,共12周。中药组给予含生药1.75 g/ml的健脾解毒方剂(10 ml/kg)灌胃,而正常组给予10 ml/kg生理盐水灌胃,1次/d,共12周。于4、8、12、16周时相点,各组随机取3～5只大鼠剖腹取肝和抽血,20周时剩余大鼠全部剖腹取肝和抽血,肝组织进行苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色,全自动生化分析仪检测肝脏功能。结果 20周实验结束时,正常组无死亡及腹水形成;模型组死亡率为42.50%(17/40),16～20周腹水发生率为87.50%(7/8);中药组死亡率为17.50%(7/40),16～20周腹水发生率为44.44%(8/18),中药组与模型组比较,具有统计学差异(P<0.05)。肝组织HE染色和肝脏功能检测结果表明,中药干预有改善肝脏功能,延缓肝癌发生的作用。结论中药健脾解毒方剂可以延缓肝癌的发生和发展,可能与其改善肝脏功能、减轻肝脏炎症和坏死等作用有关。
- 张斌李琦殷佩浩韩宗儒姚勤范忠泽
- 关键词：二乙基亚硝胺健脾解毒方中药
