宋依凝 作品数:14 被引量:31 H指数:3 供职机构: 军事医学科学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家教育部博士点基金 “重大新药创制”科技重大专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
LC-MS/MS法检测小鼠静注水溶性紫杉醇偶合物后血浆中的药物浓度 被引量:10 2010年 目的建立灵敏、特异的LC-MS/MS方法测定小鼠血浆中紫杉醇浓度,并应用于小鼠静注水溶性多聚(L-谷氨酸)-丙氨酸-紫杉醇偶合物的药物动力学研究。方法用甲基叔丁基醚提取小鼠血浆样品,以多西紫杉醇为内标,在BetaBasicC18色谱柱上以流动相乙腈-水-甲酸(65∶35∶0.1,体积比)分离,流速为0.2ml/min;采用液相色谱-质谱-质谱联用仪,通过电喷雾离子化电离源,以选择反应监测方式进行正离子检测,用于定量分析的离子反应分别为m/z854.2→286.1(紫杉醇)和m/z808.3→527.2(多西紫杉醇)。结果测定紫杉醇的线性范围为0.5~1000ng/ml,相关系数r为0.9995,定量下限为0.5ng/ml,日内日间精密度分别小于11.52%和13.11%,准确度控制在87.05%~100.87%,提取回收率为85.04%~93.63%。结论该法快速、灵敏度高、专一性好,成功应用于小鼠静注10mg/kg水溶性多聚(L-谷氨酸)-丙氨酸-紫杉醇偶合物的药物动力学研究。 宋依凝 张双庆 王晓英 仲伯华 张振清关键词:紫杉醇 小鼠血浆 4-氨基吡啶对多西紫杉醇抗人乳腺癌细胞作用影响的实验研究 被引量:2 2008年 目的:探讨选择性钾离子通道阻断剂4-氨基吡啶(4-AP)对多西紫杉醇(do-cetaxel,DOC)抗人乳腺癌细胞MDA-MB-43-5S增殖、凋亡和周期的影响。方法:MTT比色法分析DOC、4-AP单独应用以及两药联合应用对MDA-MB-435S增殖的影响;流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染法和PI单染法检测两种药物对MDA-MB-435S凋亡和周期的影响。结果:DOC和4-AP单独应用均能抑制MDA-MB-435S的增殖;5mmol/L的4-AP并用25μmol/L的DOC对MDA-M-B-435S达最大抑制率的时间明显缩短,DOC和4-AP对MDA-MB-435S的增殖抑制有相加或协同作用,并呈剂量-时间依赖性。2和5μmol/L的DOC单独作用24h,MDA-M-B-435S产生凋亡并不明显,当与5mmol/L的4-AP联合应用后,细胞早期凋亡和死亡明显增加。单用DOC可使MDA-MB-435S阻断在G2/M期,单用4-AP可使MDA-M-B-435S阻断在G0/G1期,两药联合应用可使MDA-MB-435S阻断在G2/M期。结论:DOC和4-AP分别在G2/M期和G0/G1期抑制MDA-MB-435S的增殖,4-AP通过促进DOC诱导细胞凋亡从而抑制MDA-MB-43-5S的增殖。 孙涛 宋依凝 付秀权 金万宝 魏敏杰关键词:乳腺肿瘤 钾通道阻断剂 紫杉酚 4-氨基吡啶 ERα基因启动子甲基化对于乳腺癌细胞BCRP表达的影响 目的:采用DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂脱氧胞苷酸和17-β-雌二醇联合处理ERα阴性乳腺癌细胞,观察雌激素受体α基因启动子区CpG岛甲基化对雌激素调控乳腺癌耐药相关蛋白表达的影响,探讨乳腺癌内分泌治疗耐药与化学治疗耐药... 王麟 魏敏杰 赵琳 任婕 宋依凝 付秀权 姚维凡 金万宝关键词:乳腺癌细胞 雌激素受体 基因启动子甲基化 文献传递 多西紫杉醇对人乳腺癌细胞MDA-MB-435S的影响 目的:探讨多西紫杉醇(docetaxel,DOC)对人乳腺癌细胞MDA-MB435S细胞增殖、细胞凋亡、侵袭力及ATP敏感性钾离子通道(I)的影响。方法MTT比色法检测DOC对MDA-MB-435S细胞增殖的影响;流式细... 宋依凝 付秀权 金万宝 魏敏杰关键词:多西紫杉醇 细胞增殖 细胞凋亡 侵袭力 ATP敏感性钾离子通道 文献传递 多聚(L-谷氨酸)-丙氨酸-紫杉醇偶合物的稳定性研究 2010年 目的建立测定紫杉醇含量的液相色谱-串联质谱联用方法,以此考察多聚(L-谷氨酸)-丙氨酸-紫杉醇偶合物在各种缓冲液和血浆中的稳定性。方法色谱条件:色谱柱:BetaBasicC18column(150mm×2.1mm,5μm),流动相:乙腈-水-甲酸(65:35:0.1),流速:0.2ml/min;质谱条件:电喷雾离子源,选择离子反应监测,正离子检测模式,前体药物-产物离子转换选择离子反应监测得出紫杉醇的质荷比m/z为854.2→286.1,内标多西紫杉醇的质荷比m/z为808.3→527.2。结果该检测方法的最低定量下限为0.5ng/ml,线性范围0.5~5000ng/ml,r=0.9980;多聚(L-谷氨酸)-丙氨酸-紫杉醇偶合物在醋酸盐缓冲液中的稳定性高于在磷酸盐中的稳定性,多聚(L-谷氨酸)-丙氨酸-紫杉醇偶合物在血浆中释放出紫杉醇的量明显高于其在醋酸盐和磷酸盐缓冲液中释放出紫杉醇的量。结论该方法特异性强、灵敏度高,成功应用于紫杉醇含量测定及多聚(L-谷氨酸)-丙氨酸-紫杉醇偶合物稳定性评价。 宋依凝 张双庆 李聃 何新华 仲伯华 张振清关键词:紫杉醇 稳定性 乳腺癌易感基因(BRCA)的生物学功能与临床意义 被引量:12 2008年 乳腺癌是女性比较常见的恶性肿瘤。乳腺癌易感基因(BRCA)是与乳腺癌相关的重要抑癌基因,包括BRCA1、BRCA2和BRCA3,其生物学功能广泛,对细胞周期、基因转录表达、DNA损伤修复等均有影响,BRCA基因的突变、启动子甲基化、基因杂合性缺失与乳腺癌的发生密切相关,研究BRCA对于乳腺癌的临床特点分析、筛查、监测以及治疗都具有指导性意义。 宋依凝 魏敏杰 金万宝关键词:乳腺癌 BRCA 生物学功能 4-氨基吡啶与多西紫杉醇抗人乳腺癌细胞MCF-7作用及相互关系探讨 2010年 目的:通过研究钾离子通道阻断剂4-氨基吡啶(4-AP)对肿瘤化疗药物多西紫杉醇(docetaxel,DOC)的抗人乳腺癌细胞MCF-7作用的影响,探讨4-AP能否增强DOC的作用。方法:用MTT比色法分析DOC、4-AP以及两药联合应用对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响;用流式细胞术PI单染法及Annexin V-FITC/PI双染法检测上述两种药物对人乳腺癌细胞MCF-7的细胞周期及早期凋亡的影响。结果:DOC能明显抑制人乳腺癌细胞株MCF-7的增殖,并呈剂量和时间依赖性。4-AP对MCF-7细胞增殖亦具有一定的抑制作用,在用药后24h、48h及72h的抑制率分别为11.9%±1.7%、42.1%±3.2%、44.2%±1.6%。且5mmol/L 4-AP可使DOC的作用增强,使25μmol/L DOC对人乳腺癌细胞株MCF-7最大杀伤作用时间从72h提前至24h。5μmol/l DOC能够使MCF-7 G_2/M期细胞比率明显增加(53.58%±1.44%与对照组8.83%±0.44%相比,P<0.01),使G_0/G_1期细胞减少(11.48%±0.14%与对照组63.89%±0.98%相比,P<0.01),说明DOC主要在G_2/M期阻滞MCF-7细胞的增殖。5mmol/L 4-AP作用于MCF-7使其G_0/G_1期细胞比率增加,G_2/M期细胞明显减少,甚至消失(0.42%±0.17%与对照组8.83%±0.44%相比,P<0.05)。而两药联用可见4-AP使MCF-7 G_2/M期细胞比率有所减少,而G_0/G_1期细胞比率有所增加。DOC单独作用于人乳腺癌细胞株MCF-7细胞24h后,能明显增加晚期凋亡和死亡率(由6.97%±0.75%增加到20.77%±0.75%,P<0.05);而两药联合时,与对照组相比,早期凋亡比例由4.60%±0.91%增加到12.20%±0.82%(P<0.05),晚期凋亡和死亡细胞比例由6.97%±0.75%增加到58.42%±0.31%(P<0.05),提示4-AP(5mmol/L)能明显增加DOC诱导的MCF-7早期凋亡。结论:DOC和4-AP分别在G_2/M期和G_0/G_1期抑制MCF-7细胞增殖,4-AP通过促进DOC诱导细胞凋亡发挥抑制MCF-7细胞增殖的作用。 孙涛 付秀权 宋依凝 魏敏杰 金万宝关键词:MCF-7 4-氨基吡啶 多西紫杉醇 细胞增殖 5’-氮杂-脱氧胞苷酸联合他莫昔芬对乳腺癌耐药相关蛋白介导雌激素受体α阴性乳腺癌细胞多柔比星耐药的影响 被引量:5 2011年 目的:观察5’-氮杂-脱氧胞苷酸(5’-Aza-2’-deoxycytidine,5’-Aza-dC)联合他莫昔芬(tamoxifen,TAM)对乳腺癌耐药相关蛋白(breast cancer resistance protein,BCRP)介导的雌激素受体α(estrogen receptor alpha,ERα)阴性乳腺癌细胞多柔比星(adriamycin,ADR)耐药的影响。方法:5’-Aza-dC联合不同浓度TAM处理乳腺癌MDA-MB-435s细胞后,应用甲基化特异性PCR法检测ERα基因启动子区甲基化状态,蛋白质印迹法检测ERα与BCRP蛋白的表达,MTT法检测ADR半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50)。结果:5’-Aza-dC可浓度依赖性去除MDA-MB-435s细胞ERα基因启动子区甲基化并恢复ERα蛋白的表达,0.5μmol/L5’-Aza-dC可获得较高水平ERα蛋白的表达;0.5μmol/L5’-Aza-dC或100μmol/LTAM单独处理细胞,对BCRP蛋白的表达水平无明显影响;0.5μmol/L5’-Aza-dC联合1、10和100μmol/LTAM处理细胞后,BCRP蛋白的相对表达量分别降低了18.3%、41.1%和75.3%;0.5μmol/L5’-Aza-dC联合10和100μmol/LTAM处理后,细胞对ADR敏感度分别增强至阴性对照组的1.4和4.2倍。结论:在5’-Aza-dC恢复ERα表达的前提下,TAM可显著下调ERα阴性乳腺癌细胞BCRP蛋白的表达并增强细胞对ADR的敏感度,2者联合可能成为逆转ERα阴性乳腺癌细胞多药耐药的一种途径。 王麟 赵琳 任婕 宋依凝 付秀权 姚维凡 金万宝 魏敏杰关键词:体外研究 雌激素受体Α 他莫昔芬 多西紫杉醇联合钾离子通道阻断药对人乳腺癌细胞MCF-7的增殖周期与凋亡的影响 目的探讨多西紫杉醇(docetaxel,DOC)联合钾离子通道阻断药4-氨基吡啶(4-AP) 对人乳腺癌细胞 MCF-7的增殖、周期、凋亡的影响。方法通过 MTT 比色法分析 DOC、4-AP 以及两药联合应用对人乳腺癌... 付秀全 宋依凝 孙涛 冯婉玉 金万宝 魏敏杰关键词:多西紫杉醇 MCF-7 文献传递 New progress in the study of poly(L-glutamic acid)-paclitaxel conjugates for cancer treatment 被引量:1 2009年 The preparation of polymer-anticancer drug conjugates is an effective way to improve the efficacy and decrease the toxicity of anticancer drugs. Polymer-drug conjugates, which were made by combining a suitable polymeric carrier, a biodegradable linker and a bioactive anticancer agent, could form the basis of a new generation of anticancer agents. Poly (L-glutamic acid)- paclitaxel conjugate is a polymer-drug conjugate that links anticancer agent paclitaxel (PTX) to poly (L-glutamic acid) (PG). PG-PTX conjugate can improve the anticancer activity, enhance the safety and efficacy, and improve the pharmacokinetic properties of PTX. Therefore, the application of PG-PTX facilitates the clinical therapy of a variety of human cancers. 宋依凝 张双庆 张振清关键词:PACLITAXEL PHARMACOKINETICS