张亮
- 作品数：4 被引量：0H指数：0
- 供职机构：鄂尔多斯市中心医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 雷帕霉素对高糖状态下肾小球系膜细胞自噬的影响
- 2024年
- 目的探讨雷帕霉素对高糖状态下肾小球系膜细胞自噬的影响。方法将人肾小球系膜细胞(HMC)在恒温培养箱中培养,将细胞分为HMC组、低糖组、高糖组、甘露醇等渗组和雷帕霉素组。采用GFP-RFP-LC3标记各组细胞的自噬流;采用Western blot检测各组细胞的自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、P62的表达情况;采用ELISA法测定各组细胞的细胞Ⅳ型胶原纤维(ColⅣ)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LA)的含量。结果高糖组的自噬溶酶体最少,HMC组、低糖组、甘露醇等渗组、雷帕霉素组的自噬溶酶体均较高糖组多,其中雷帕霉素组的自噬溶酶体最多。与HMC组、低糖组、甘露醇等渗组相比,高糖组的LC3-Ⅱ表达明显减少,LC3-Ⅰ表达明显增多,P62明显增多(均P<0.05)。雷帕霉素组的LC3-Ⅱ表达较高糖组明显增多,而LC3-Ⅰ及P62表达明显减少(均P<0.05)。高糖组的ColⅣ、HA、LA含量均较HMC组、低糖组和甘露醇等渗组明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.001)。雷帕霉素组的ColⅣ、HA、LA的含量均较高糖组明显下降,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论高糖状态可以抑制HMC自噬活性,增加细胞外基质的聚集,促进糖尿病肾病进展,而雷帕霉素可诱导细胞自噬的发生,减少肾小球系膜细胞系膜基质增生,进而抑制糖尿病肾病进展。
- 付雅郝艳霞贾奇凤陈洋洋李利王燕薛月梅周婷张亮
- 关键词：肾小球系膜细胞自噬雷帕霉素高糖
- 高糖对肾小球系膜细胞自噬的影响
- 2024年
- 目的探讨高糖对肾小球系膜细胞自噬的影响。方法人肾小球系膜细胞(human mesangial cell,HMC)根据培养基是否含有葡萄糖及渗透压情况分为HMC组、高糖组与甘露醇等渗组。采用5-乙炔基-2-脱氧尿苷细胞增殖实验观察细胞增殖情况;采用流式细胞仪测定细胞凋亡情况;采用红色荧光蛋白-绿色荧光蛋白-微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light chain 3,LC3)标记自噬流;采用蛋白质免疫印迹检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、P62的表达情况。采用酶联免疫吸附法测定细胞Ⅳ型胶原纤维(collagenous Ⅳ,COLⅣ)、透明质酸(hyaluronic acid,HA)、层粘连蛋白(laminin,LA)浓度。结果3组细胞增殖数、增殖率比较差异有统计学意义(P<0.05);高糖组细胞增殖数少于HMC组、甘露醇等渗组,细胞增殖率低于HMC组、甘露醇等渗组,差异有统计学意义(P<0.05)。3组Q2、Q3、Q4、Q2+Q3占比比较差异有统计学意义(P<0.05)。高糖组Q4占比低于HMC组、甘露醇等渗组,差异有统计学意义(P<0.05)。高糖组自噬溶酶体少于HMC组、甘露醇等渗组。3组P62、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ水平比较差异有统计学意义(P<0.05);高糖组P62水平高于HMC组、甘露醇等渗组,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ水平低于HMC组、甘露醇等渗组,差异有统计学意义(P<0.05)。3组COLⅣ、HA、LA浓度比较差异有统计学意义(P<0.05)。高糖组COLⅣ、HA、LA浓度均高于HMC组、甘露醇等渗组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在高糖状态下,HMC自噬活性被抑制,细胞外基质蓄积,促进细胞凋亡,进而促进糖尿病肾病进展。
- 秦树佩付雅汤萌薛月梅陈雪冬成龙刘娜贾奇凤张亮
- 关键词：自噬人肾小球系膜细胞细胞外基质
