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iTRAQ技术鉴定TCDD与维甲酸致胎鼠腭裂共同表达的差异蛋白质被引量：1: 2017年; 目的应用同位素标记相对和绝对定量（isobaric tags for relative and absolute quantitation，iTRAQ）技术结合质谱分析筛选2，3，7，8-四氯二苯二噁英（2，3，7，8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin，TCDD）与维甲酸致胎鼠腭裂发生的共同差异表达蛋白质。方法将36只C57BL/6J孕鼠按照随机数表法分为3组，每组12只。分别以28 μg/kg TCDD、80 mg/kg维甲酸在C57BL/6J孕鼠第10.5个妊娠日（gestational day 10.5，GD10.5）灌胃，建立胎鼠腭裂模型，对照组给予等量玉米油灌胃，于GD17.5观察胎鼠腭部的解剖学及组织学改变；取TCDD组、维甲酸组与对照组GD17.5胎鼠的腭组织，从中提取总蛋白质，采用iTRAQ技术联合二维液相色谱-串联质谱分析和鉴定实验组与对照组的差异表达蛋白质；用Western Blot对Annexin A1、14-3-3 sigma差异蛋白进行表达验证。实验数据应用SPSS17.0软件进行统计分析，腭裂发生率的比较采用卡方检验，3组目的蛋白相对表达量比较采用单因素方差分析，方差齐性分析采用Levene检验，组间比较采用Turkey HSD检验，P〈0.05为差异有统计学意义。结果①成功建立了胎鼠腭裂模型，TCDD组与维甲酸组腭裂发生率分别为97.1%（68/70）和98.6%（70/71），2组比较差异无统计学意义（χ2＝0.00，P〉0.05），腭裂表型在形态学上相似。②共鉴定出2 996个蛋白质，TCDD组、维甲酸组与对照组比较，分别筛选出差异蛋白75个和90个，2个实验组共同表达的差异蛋白有18个。③Western Blot结果显示，Annexin A1蛋白表达水平对照组为0.52±0.11，TCDD组和维甲酸组分别为0.99±0.34和0.98±0.31，分别与对照组比较，差异均有统计学意义（P〈0.05）；14-3-3 sigma蛋白表达水平对照组为0.55±0.15，TCDD组和维甲酸组分别为0.86±0.17和0.93±0.13，分别与对照组比较，差异均有统计学意义（P〈0.05），与iTRAQ检测结果一致。结论应用iTRAQ技术能够�; 翟莎娜王晨傅跃先袁心刚张丁文; 关键词：腭裂维甲酸

TCDD诱导C57BL／6J胎鼠腭裂过程中组蛋白H4乙酰化的表达被引量：1: 2018年; 目的检测在2，3，7，8-四氯二苯二噁英（2，3，7，8-tetrachlorod-ibenzo-P-dioxin，TCDD）诱导的C57BL／6J小鼠腭裂过程中组蛋白H4乙酰化的表达水平，探讨TCDD诱发腭裂与组蛋白H4乙酰化的相关性。方法48只C57BL／6J近交系孕鼠完全随机分为实验组和对照组，在小鼠妊娠第10．5天（gestationday，GD10．5）时，一次性给予孕鼠分别灌服20μg/kgTCDD（实验组）和等剂量玉米油（对照组），分别在GD13．5、GD14．5、GD15．5剖腹取胎鼠头部标本，作冠状位组织切片，采用免疫组织化学染色观察组蛋白H4乙酰化在腭突中的表达，Western Blotting检测胎鼠腭组织组蛋白H4乙酰化的相对表达量。应用SPSS24．0进行统计分析，统计方法采用单因素方差分析和方差同质性检验，方差齐采用Bonferroni检验，方差不齐者采用校正t检验，P〈0．05表示差异有统计学意义。结果组蛋白H4乙酰化主要表达在腭突上皮细胞中，间质细胞少许表达；在腭发育各个主要时期GD13．5、GD14．5、GD15．5腭突上皮细胞的相对表达量分别是：对照组为0．60±0．25、0．92±0．09和0．90±0．09；TCDD组为1．02±0．28、1．61±0．27和1．28±0．13，2组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论TCDD诱导的C57BL／6J胎鼠腭裂的发生可能与组蛋白H4乙酰化修饰有关。; 张丁文袁心刚傅跃先王晨邱林魏光辉; 关键词：乙酰化腭裂

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