唐智芳
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
- 供职机构：上海出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：上海出入境检验检疫局科研基金国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 检测胸膜肺炎放线杆菌7型抗体的竞争ELISA方法的建立与应用
- 2015年
- 针对猪传染性胸膜肺炎(App)最主要的流行血清型7型,建立该型特异的抗体检测方法,并应用于出入境检疫。使用App 7型参考菌株制备单克隆抗体,基于辣根过氧化物酶标记的单抗,建立检测App 7型抗体的竞争ELISA方法,用于检测出入境临床采集及免疫接种的猪血清样品,并与商品化进口试剂盒进行比较。结果显示制备的单抗为IgM,与App 7型参考菌株之外的其他14个血清型以及27株其他相关菌株均无交叉反应。建立的竞争ELISA方法只能检测App 7型抗体,特异性好。用该方法检测App 7型参考菌株免疫猪的血清,免疫后14d可检出抗体,35d抗体滴度达峰值,并维持此滴度至143d。使用建立的竞争ELISA检测免疫猪及临床血清样品260份,结果与法国IDvet试剂盒检测符合率为97.2%,与加拿大Biovet试剂盒检测符合率为97.9%~98.2%。建立的竞争ELISA方法可以应用于App 7型抗体的检测。
- 李树清陈志飞张强吴建祥刘雨潇王巧全林颖峥宋青唐智芳陆承平
- 关键词：抗体检测竞争ELISA
- 奥尔森派琴虫PCR检测方法的优化及其在进出境检疫中的应用
- 2017年
- 为快速、准确地检测进出境水产品中的派琴虫,防止有害寄生虫传入,对OIE推荐的奥尔森派琴虫PCR检测方法的扩增程序进行优化,并应用于上海口岸从16个国家进口的21种贝类水产品95批次的奥尔森派琴虫的检疫。结果显示,该优化的PCR扩增程序用时由原来的224 min缩短为91 min,效率提高了2.6倍,且最低检测限相同;并从澳大利亚进口的9个扇贝样品中检出7份奥尔森派琴虫阳性,阳性率为77.8%。测序结果表明,与奥尔森派琴虫序列(登录号为U07701.1)的同源性为99%。试验证明优化的PCR检测方法快速、准确,适用于进出境水产品中奥尔森派琴虫的检疫,并提示在进口贝类水产品中,应加强澳大利亚进口水产品的检疫。
- 李树清王艳陈志飞王巧全李春阳张强林颖峥吴成云唐智芳何宇平
- 关键词：PCR检测水产品
- 上海口岸1只进境犬携带蜱的种类鉴定与溯源分析被引量：4
- 2018年
- 目的对上海口岸截获的德国成犬体表蜱进行种类鉴定及溯源分析。方法 2016年11月28日在上海口岸进口的69只德国警犬中的第33号警犬右前肢内侧检获蜱1只,对其进行形态学鉴定,并提取其DNA,扩增线粒体16S r RNA基因进行测序、比对,并对感染途径进行溯源分析。结果形态学鉴定该蜱符合血蜱属的形态特征,分子鉴定表明该蜱的线粒体基因序列与广泛分布于古北区和东洋区的褐黄血蜱(Haemaphysalis flava Neumann,1897)线粒体基因匹配度达98%。结论截获蜱为褐黄血蜱,为犬入境后感染。
- 王强何宇平吴成云王巧全王艳林颖峥陈志飞张强邓耀华张冠楠曹宇凡唐智芳李树清
- 关键词：分子鉴定
- 扇棘单睾吸虫Real-time PCR与常规PCR检测方法的建立
- 2015年
- 根据扇棘单睾吸虫核糖体DNA第一内转录间隔区(ITS1)序列,应用Primer premier 5.0软件自行设计一对可同时应用于real-time PCR和常规PCR的特异引物,建立real-time PCR与常规PCR鉴定扇棘单睾吸虫的方法,评估其特异性及灵敏性。应用建立的方法鉴定犬猫内脏中收集的吸虫,并用测序进行验证,检验方法的准确性和实用性。结果表明,建立的两种方法均只能特异性扩增扇棘单睾吸虫目的片段,不与横川后殖吸虫、钩棘单睾吸虫、华支睾吸虫、瓦氏瓦特松吸虫、棘口属吸虫、背孔属吸虫、心形咽口吸虫、野牛平腹盘吸虫、东方次睾吸虫、卫氏并殖吸虫、异尖属线虫、宫脂属线虫发生交叉扩增;敏感性试验表明,real-time PCR和常规PCR检测扇棘单睾吸虫质粒的最低检测限分别为43拷贝和86拷贝。建立的realtime PCR标准曲线的循环阈值(Ct)与模板拷贝数呈良好的线性关系(R2=0.998)。鉴定来自犬猫的吸虫17条,结果显示两种方法均能准确鉴定出扇棘单睾吸虫。
- 李树清梅雪芳林颖峥石云良黄腾飞王巧全张强陈志飞宋青唐智芳黄维义
- 关键词：实时荧光定量PCR常规PCR
