朱晓锋
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 供职机构：湖北科技学院更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金湖北省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- miR-24对心脏成纤维细胞生长和迁移的影响及机制研究被引量：1
- 2017年
- 目的:探讨miR-24对心脏成纤维细胞的生长和迁移的影响及机制。方法:采用RT-PCR检测心肌细胞和心脏成纤维细胞中mi R-24的表达水平。在心脏成纤维细胞中转染mi R-24 mimics、mimics control、mi R-24 inhibitors、inhibitors control后,通过Western blot检测细胞中Col-1、α-SMA的表达,MTT检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Transwell小室检测细胞迁移能力。通过靶基因预测库预测mi R-24的靶基因,荧光素酶鉴定靶基因的正确性,并通过RT-PCR和Western blot检测转染后细胞中Furin的表达。结果:心脏成纤维细胞HEH2中mi R-24的表达水平与心肌细胞H9C2相比差异显著(P<0.01),心脏成纤维细胞中mi R-24表达上调。mi R-24 mimics组中Col-1、α-SMA的表达水平明显低于mimics control组(P<0.01)。mi R-24 mimics组中细胞OD值较mimics control组显著降低(P<0.01),mi R-24 inhibitors组中细胞OD值较inhibitors control组显著升高(P<0.01)。mi R-24 mimics组、mimics control组、mi R-24 inhibitors组、inhibitors control组细胞凋亡无显著性差异(P>0.05)。mi R-24 mimics组细胞迁移数目明显低于mimics control组,差异显著(P<0.01),mi R-24 inhibitors组细胞迁移数目高于inhibitors control组,差异显著(P<0.05)。mi R-24 mimics组细胞中Furin蛋白和m RNA水平明显降低,野生型Furin和mi R-24 mimics共转染的细胞中荧光素酶活性最低。结论:mi R-24在心脏成纤维细胞中高表达,通过靶基因Furin抑制心脏成纤维细胞合成Col-1、α-SMA,抑制心脏成纤维细胞增殖和迁移。
- 赵玉明李艳星朱晓锋吴飞马李振华钟声逸李丽红
- 关键词：心脏成纤维细胞增殖迁移
- 消退素D1在小鼠主动脉夹层中的作用及机制研究被引量：2
- 2019年
- 目的探讨消退素D1(resolvin D1,RvD1)在小鼠主动脉夹层中的作用及机制研究。方法SPF级雄性小鼠40只,随机分成对照组、RvD1组、β氨基丙腈(BAPN)组和BAPN+RvD1组,每组10只,BAPN组和BAPN+RvD1组构建BAPN饮食诱导的小鼠主动脉夹层模型,对照组和RvD1组饲喂普通的小鼠维持饲料,RvD1组和BAPN+RvD1组腹腔注射RvD1 3μg/(kg·d),对照组和BAPN组注射等量生理盐水。用苏木精-伊红和血管弹力纤维染色(EVG)观察主动脉和弹力纤维的形态和结构,用ELISA法检测血清白细胞介素(IL)1、IL-17、TNF-α和γ干扰素水平,采用RT-PCR法检测主动脉组织IL-1、IL-17、TNF-α和γ干扰素mRNA表达。结果对照组和RvD1组均未出现主动脉夹层,而BAPN+RvD1组小鼠主动脉夹层发生率和病死率显著低于BAPN组,差异有统计学意义(20.0%vs 70.0%,10.0%vs 40.0%,P<0.05);苏木精-伊红染色和EVG结果提示,BAPN组小鼠血管壁增厚,伴假腔形成,同时中膜弹力纤维出现明显的断裂或中断,而BAPN+RvD1组血管壁仅轻度增厚,未见假腔形成;与对照组比较,BAPN组小鼠血清IL-1、IL-17、TNF-α、γ干扰素和主动脉IL-1、IL-17、TNF-α、γ干扰素mRNA表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01),而BAPN+RvD1组血清IL-1、IL-17、TNF-α、γ干扰素水平和主动脉IL-1、IL-17、TNF-α和γ干扰素mRNA表达明显低于BAPN组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.05)。结论RvD1可显著降低循环和主动脉炎症,防止中膜弹力纤维和主动脉的断裂,降低主动脉夹层的发生。
- 朱晓锋胡宁
- 关键词：主动脉疾病白细胞介素1白细胞介素17肿瘤坏死因子Α干扰素Γ
- 经典瞬时受体电位通道1在胃癌组织中的表达及其生物学意义被引量：2
- 2021年
- 目的研究胃癌组织中经典瞬时受体电位通道1(transient receptor potential canonical,TRPC1)的表达及TRPC1沉默对胃癌细胞的生物学效应。方法收集咸宁市中心医院2015年1月至2018年4月93例手术切除的胃癌和癌旁组织标本,免疫组化检测上述标本中TRPC1的表达,分析其与病人临床病理特征的关系。利用TRPC1小分子干扰RNA(siRNA-TRPC1)转染胃癌MGC-803细胞,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blotting)验证转染效率。MTT法评估siRNA-TRPC1对MGC-803细胞增殖能力的影响。相关试剂盒检测丙二醛、活性氧和超氧化物歧化酶(SOD)水平。流式细胞术检测细胞凋亡水平。结果与癌旁组织比较,TRPC1在胃癌组织中的表达显著上调(阳性表达率分别为79.6%比20.4%),且TRPC1的高表达与肿瘤的TNM分期(P=0.007)、分化程度(P=0.022)和淋巴结转移(P=0.010)相关;与对照组比较,转染组TRPC1 mRNA和蛋白质水平均显著下降(P<0.05);与对照组比较,siRNA-TRPC1转染组细胞的增殖活性显著下降(P<0.05);与对照组比较,siRNA-TRPC1转染组细胞丙二醛和活性氧水平升高,SOD活性降低(P<0.05);与对照组比较,siRNA-TRPC1转染组细胞凋亡水平明显升高(P<0.05)。结论TRPC1在胃癌中高表达,siRNA沉默TRPC1可抑制胃癌肿瘤细胞的增殖,上调细胞的氧化应激水平,促进肿瘤细胞的凋亡。
- 胡宁朱晓锋
- 关键词：胃肿瘤增殖氧化应激
- MiR-21对肺癌细胞增殖与凋亡的影响被引量：6
- 2017年
- 目的探讨miR-21对肺癌细胞增殖与凋亡的影响。方法培养人肺癌细胞HBE、H460、A549和H446,将实验分为miR-21 inhibitor组、miRNA scramble组、空白对照组。荧光定量检测肺癌细胞H460、A549和H446 miR-21的表达;荧光定量PCR检测将miR-21 inhibitor和miRNA scramble转染到培养至对数生长期的人肺癌细胞H460后,对照组不转染的各组细胞的表达量;MTT实验检测转染miR-21 inhibitor后对细胞增殖的影响;流式细胞仪检测转染miR-21 inhibitor后对细胞凋亡的影响;Western印迹检测与凋亡相关蛋白的活性。结果肺癌细胞H460、A549和H446miR-21的表达显著高于正常肺癌细胞HBE(P<0.01),由于肺癌细胞株H460的miR-21表达在3个细胞株中高表达,因此选择肺癌细胞株H460做后续研究;将miR-21 inhibitor组和miRNA scramble组转染到肺癌细胞株H460后,荧光定量PCR显示,miR-21 inhibitor组的miR-21的相对表达量为显著低于空白对照组(P<0.01),miRNA scramble组的相对表达量与空白对照组无差异(P>0.05);MTT结果显示,转染4 d后,miRNA scramble组与空白对照组细胞增殖率无差异(P>0.05),而miR-21 inhibitor组显著低于空白对照组(P<0.05),且随时间延长,细胞增殖率逐渐下降;流式结果显示,与空白对照组和miRNA scramble组比较,miR-21 inhibitor组细胞的凋亡率显著升高(P<0.01);Western印迹显示,miR-21 inhibitor组Cleaved-caspase-3和Bax蛋白的表达显著高于miRNA scramble组和空白对照组,而miR-21 inhibitor组Bcl-2蛋白的表达显著低于miRNA Scramble组和空白对照组(P<0.05)。结论下调miR-21的表达,可抑制肺癌细胞H460的生长,增加细胞的凋亡,其作用机制可能与Bcl-2家族的调节有关。
- 赵玉明李艳星朱晓锋吴飞马李振华钟声逸李丽红陈园
- 关键词：MIR-21肺癌增殖凋亡
