吴素丽
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 供职机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所更多>>
- 发文基金：引进国际先进农业科技计划“十一五”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 小反刍兽疫病毒H基因的原核表达与鉴定被引量：1
- 2009年
- 根据GenBank中已发表的小反刍兽疫病毒(PPRV)Nigeria75/1株的H基因序列,设计上下游引物并添加BamHⅠ酶切位点,以含有小反刍兽疫病毒H基因的Topo-PPRVH质粒为模板进行PCR扩增,扩增产物克隆于pEASY-T载体中,用BamHⅠ单酶切后将目的片段连接到原核表达载体pET-32a(+)中,核酸序列分析证明,成功构建了PPRVH原核表达质粒pET-32a-H。将pET-32a-H重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)进行融合表达,经SDS-PAGE电泳,可见H蛋白获得了高效表达,融合蛋白的分子量约为87ku,表达产物以包涵体的形式存在,其表达量达到菌体总蛋白的38%,占包涵体蛋白的80%以上。Western blot鉴定表明,所表达的重组蛋白能被抗组氨酸单抗、抗PPRV标准阳性羊血清及抗PPRV疫苗的羊血清所识别,具有良好的免疫原性。
- 李伟李刚邱文英贾凤芹曾妮吴素丽
- 关键词：小反刍兽疫病毒H基因原核表达
