孙强
- 作品数:2 被引量:9H指数:1
- 供职机构:云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室更多>>
- 发文基金:云南省中青年学术和技术带头人后备人才项目云南省现代农业生猪产业技术体系建设项目云南省农业科技创新工程项目更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 云南师宗和江苏盱眙中华按蚊的分子鉴定及COII基因序列分析
- 2016年
- 为了了解云南省师宗县和江苏省盱眙县中华按蚊的分子鉴定及COII基因序列特征,2014年7月在云南省师宗县和江苏省盱眙县采集蚊虫标本,通过形态学鉴定出中华按蚊,再提取蚊虫基因组DNA,用COII基因特异引物和序列测定,然后采用生物信息学软件进行核苷酸序列同源性和遗传进化分析。结果在云南省师宗县县城周围采集蚊虫标本314只,其中按蚊234只(74.52%);在江苏省盱眙县桂五镇采集蚊虫标本212只,其中按蚊143只(67.45%)。经形态学鉴定,每个地方挑选了8只疑似中华按蚊进行序列分析,结果显示,16只蚊虫COII核苷酸序列同源性在98%-100%之间,遗传进化分析显示,16只蚊虫全部与中华按蚊位于同一进化分支内。表明了采用分子鉴定的方法可有效地进行蚊虫种类鉴定。
- 胡骑王静林何于雯孙强吴晶
- 关键词:中华按蚊COII基因分子鉴定
- 猪肺炎支原体实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用被引量:9
- 2013年
- 根据GenBank登录的猪肺炎支原体黏附素P97基因(U50901)序列,设计1对特异性引物和1条探针,优化了猪肺炎支原体实时荧光定量PCR检测方法。25μL反应体系,引物MhpF/MhpR(20μmol/L)各0.5μL,探针MhpP(20μmol/L)0.5μL为反应最佳工作浓度,标准曲线Ct值和模板启始浓度的log值之间的线性相关系数为0.997。特异性、敏感性和重复性检测结果显示,该方法能特异地检测猪肺炎支原体,与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、伪狂犬病毒、乙型脑炎病毒,猪细小病毒、猪圆环病毒等病原检测无交叉反应;针对猪肺炎支原体阳性质粒标准品检测,灵敏度可以达到10拷贝;重复性检测Ct值变异系数在0.78%~1.16%之间。用建立的实时荧光定量PCR检测方法,对40份临床样品检测,结果表明肺脏拭子与肺脏悬液阳性率完全一致,而鼻腔拭子检出率较低。
- 宋建领高华峰信爱国孙强王娟李华春
- 关键词:猪肺炎支原体荧光定量PCR