潘晓霞
- 作品数:3 被引量:2H指数:1
- 供职机构:天津大学药物科学与技术学院更多>>
- 相关领域:化学工程理学更多>>
- 磁性微球用于蛋白-抑制剂复合物解离常数的快速测定被引量:2
- 2013年
- 以凝血酶与其选择特异性抑制剂阿加曲班为模型,应用磁性微球(MM)建立了一种快速测定蛋白-抑制剂复合物解离常数(Kd)的方法。该方法以四氧化三铁磁性微球为载体,在EDC/NHS偶联作用下制备了凝血酶包覆的磁性微球(Thrombin-MM),考马斯亮蓝G-250蛋白定量法间接测定蛋白键合量为4.1 mg/g,取5 mg Thrombin-MM与400μL一系列不同浓度的阿加曲班溶液混合振荡,应用高效液相色谱法通过测定平衡吸附前后药物浓度,代入Scat-chard模型,即得Kd值,与蛋白质数据库中值一致。吸附药物后的Thrombin-MM用含10%甲醇的PBS缓冲液洗脱,回收率约84%,Thrombin-MM可重复利用。
- 王秋玲潘晓霞吕波
- 关键词:磁性微球解离常数凝血酶阿加曲班
- 高磁场响应性蛋白偶联磁性微球的制备及其在药物-蛋白结合常数测定中的应用
- 2014年
- 以蛋白偶联磁性微球(MB)为固相基质,通过磁场下快速分离蛋白和上清,高效液相色谱法测定上清中的药物浓度,建立了测定药物与蛋白结合常数(Ka)的新方法。选择对药物非特异性吸附较少和磁响应性较高的四氧化三铁磁性微球为载体,分别以1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐/N-羟基琥珀酰亚胺(EDC/NHS)及戊二醛作为偶联剂,制备牛血清白蛋白(BSA)包覆的磁性微球(MB-BSA),两种偶联方法所得磁性微球的蛋白最大键合量均为50μg/mg。以布洛芬为模型药物,研究药物在蛋白偶联磁性微球上的吸附行为及药物-蛋白的相互作用模式,优化药物吸附和解吸过程。利用高效液相色谱法测定经磁性分离的上清液中的游离药物浓度,通过罗森塔尔方程计算药物与BSA结合常数。最后将所建立的方法应用到色氨酸、安立生坦、瑞替加滨、罗氟司特等4种不同药物与蛋白的结合常数的测定,获得满意结果。
- 潘晓霞
- 关键词:磁性微球牛血清白蛋白
- 不同磁化率粒子在磁场流分离中保留行为的研究
- 2013年
- 缺乏针对不同磁化率粒子的分离技术成为制约磁性药物制剂研究发展的重要因素。讨论了利用螺旋毛细管作为分离通道的简单场流分离装置,对不同磁化率的磁性粒子进行分离的可行性,并对影响分离的条件进行了考察。结果表明,在旋转频率为2.21 Hz,流速为0.16 mL/min,磁场距离为0.48 mm的条件下,旋转磁场流分离体系可以很好的分离不同磁化率的磁性粒子。旋转磁场的引入和水动抬升力的作用克服了固定磁场作用范围有限和粒子团聚等缺点,使此方法具有较高的分离度。
- 刘昱潘晓霞
- 关键词:磁化率磁性粒子