高敏
- 作品数：1 被引量：10H指数：1
- 供职机构：玉林师范学院生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：广西高校特色专业及课程一体化建设项目广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 产GABA发酵乳杆菌的筛选、发酵条件优化及其谷氨酸脱羧酶基因的克隆被引量：10
- 2014年
- 从酸菜汁中分离到一株具有谷氨酸脱羧酶活力的乳酸菌YS2,经过16S rDNA序列分析鉴定为发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)。YS2在含1%L-谷氨酸钠的MRS培养基中,GABA的产量达到4.37 g/L。对YS2产GABA的碳源、氮源、初始pH进行了初步优化,确定最佳条件为:以蔗糖为主要碳源,以蛋白胨和牛肉膏为氮源,初始pH 6.0,在此条件下,GABA产量达到5.68 g/L。通过PCR顺利地扩增出了YS2菌株的谷氨酸脱羧酶gadB基因,将PCR产物与表达载体pEASY-E1连接。测序结果表明,YS2的谷氨酸脱羧酶与Lactobacillus fermentum F-6的谷氨酸脱羧酶序列一致性达到99%。重组酶与组氨酸标签融合表达,经镍柱亲和层析纯化出融合蛋白,电泳显示出56 kDa的目的条带,纯化的重组酶表现出了酶活性(1.06 U/mg)。
- 林谦姜康怡韦素娟郭丹妮农石蓉高敏
- 关键词：发酵乳杆菌Γ-氨基丁酸谷氨酸脱羧酶克隆
