刘洋
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 供职机构：内蒙古医科大学附属医院更多>>
- 发文基金：内蒙古自治区自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠14-3-3ε蛋白基因的克隆及其真核表达载体的构建被引量：1
- 2015年
- 目的构建小鼠14-3-3ε真核表达载体pcDNA3.1-ZEO-HA-14-3-3ε,并观察其在真核细胞中的表达。方法通过反转录-聚合酶链反应从小鼠肝组织中获得编码14-3-3ε的cDNA,定向克隆至真核表达载体pcDNA3.1-ZEO(+)中,经酶切和测序鉴定正确后,应用脂质体转染HEK293细胞,并通过蛋白免疫印迹检测细胞内14-3-3ε的表达。结果构建了真核表达载体pcDNA3.1-ZEO-HA-14-3-3ε,将其转染HEK293细胞48h后,蛋白免疫印迹检测到细胞内14-3-3ε的表达。结论成功构建了真核表达载体pcDNA3.1-ZEO-HA-14-3-3ε,为研究14-3-3ε在小鼠卵母细胞和小鼠-细胞受精卵G2/M转换中作用的研究奠定了基础。
- 孟峻侯艳军唐韬张永梅刘珊刘洋呼格吉乐
- 关键词：HEK293细胞真核表达载体
- 小鼠卵母细胞中14-3-3蛋白亚型的表达被引量：2
- 2015年
- 目的对小鼠卵母细胞生发泡期(GV)、生发泡破裂期(GVBD)的14-3-3蛋白亚型表达进行鉴定。方法RT-PCR法检测GV、GVBD期卵母细胞中14-3-3蛋白7个亚型的mRNA水平,蛋白免疫印迹(Western blotting)法检测其蛋白表达水平。结果检测了7个14-3-3亚型(β,γ,ε,σ,ζ,τ和η)mRNA的表达水平,结果显示,在GV期只有14-3-3β和14-3-3ε两个亚型表达,并且14-3-3εmRNA水平显著高于14-3-3β(P<0.01)。在蛋白水平上,在小鼠卵母细胞GV期和GVBD期均检测到14-3-3ε亚型蛋白表达,未检测到14-3-3β蛋白表达。结论 14-3-3蛋白ε亚型在小鼠卵母细胞GV、GVBD期均稳定表达。
- 孟峻侯艳军张永梅呼格吉乐刘洋宿瑞俊
- 关键词：卵母细胞
