和祯泉
- 作品数：3 被引量：25H指数：3
- 供职机构：南京农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：天津市科技支撑计划重点项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 鸡源抗菌肽Fowlicidin-3表达条件的优化及生物学特性和体内疗效研究被引量：12
- 2011年
- 对重组X-33毕赤酵母菌株表达的鸡源Fowlicidin-3抗菌肽的条件进行优化,并研究了表达产物的生物学活性。结果表明:当含有重组酵母菌的BMGY培养基A600值达到5～6时,转接pH 6.0的BMMY培养基,每24 h补加2%甲醇,29℃条件下培养72 h,重组鸡源Fowlicidin-3抗菌肽获得高效表达,含量达到170 mg.L-1。采用琼脂孔扩散法对该抗菌肽的热稳定性、酸碱稳定性等特性进行分析,结果表明:鸡源Fowlicidin-3抗菌肽具有较强的热、酸稳定性;对致病性大肠杆菌K99、鸡白痢沙门氏菌和金黄色葡萄球菌CowanⅠ的最小抑菌浓度分别为3.12、1.56和1.56μg.mL-1。在对大肠杆菌O1感染雏鸡的体内疗效试验中,鸡源Fowlicidin-3显示出了较好的预防和治疗效果。
- 李荣荣和祯泉吕英军鲍恩东陈溥言
- 关键词：生物学特性X-33
- 鸡源抗菌肽Folicidin-3在毕赤酵母中的分泌表达及其生物学活性鉴定被引量：7
- 2010年
- 【目的】研究鸡源重组抗菌肽Fowlicidin-3的生物学特性,并为重组抗菌肽在临床上的应用奠定基础。【方法】根据抗菌肽数据库中Fowlicidin-3的氨基酸序列,选用毕赤酵母的偏嗜密码子,设计抗菌肽的基因,通过SOE法合成得到全长为114bp的Fowlicidin-3基因。将Fowlicidin-3基因克隆入pPICZα-A质粒,构建分泌型重组酵母表达载体pPICZα-A-F。将线性化重组表达载体pPICZα-A-F通过电击法转入毕赤酵母宿主菌X-33中,构建分泌型重组酵母表达菌株。【结果】获得分泌型重组酵母表达菌株,Fowlicidin-3多肽表达量达到170mg·L-1,对致病性大肠杆菌K99和鸡白痢沙门氏菌显示出较好的抑制活性,抑菌圈直径分别为1.9cm和2.2cm。优化表达条件结果显示,转接到BMMY培养基中(pH6.0),每24h补加2%甲醇,29℃培养72h后,Fowlicidin-3抗菌肽获得高效表达。【结论】成功构建分泌型重组酵母表达菌株,并获得了具备高效表达能力和较好生物学活性的抗菌肽。
- 李荣荣和祯泉鲍恩东陈溥言
- 关键词：抗菌肽毕赤酵母抑菌试验
- 抗菌肽Folicidin-3在大肠杆菌中融合表达及抑菌活性被引量：7
- 2011年
- 根据抗菌肽Fowlicidin-3氨基酸序列,选用大肠杆菌(Escherichia coli)偏嗜密码子,设计合成117bp的Fowli-cidin-3a和102bp的Fowlicidin-3b基因。将这2个基因克隆到突变载体,构建出表达载体pET-32a-C-Fowlicidin-3a和pET-32a-Tev-C-Fowlicidin-3b,分别转化至E.coli BL21Rosetta-2中,IPTG诱导表达融合蛋白Trx-Fowlicidin-3a和Trx-Fowlicidin-3b并进行纯化。结果表明:肠激酶裂解Trx-Fowlicidin-3a和Tev酶裂解Trx-Fowlicidin-3b效率都较高,获得的裂解液都对指示菌E.coli DH5α显示出抑菌活性。Fowlicidin-3a和Fowlicidin-3b对指示菌E.coli DH5α的最小抑菌浓度均为2μg.mL-1。
- 和祯泉刘天健吕英军鲍恩东
- 关键词：抗菌肽抑菌试验
