李慧霞
- 作品数：3 被引量：43H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：甘肃省农业生物技术研究与应用开发项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 羊痘野毒感染与弱毒免疫iELISA鉴别诊断方法的建立被引量：4
- 2013年
- 为建立一种方便、灵敏、有效的检测羊痘野毒感染的iELISA方法,以山羊痘病毒基因组DNA为模板,PCR扩增获得ORF95和ORF103基因的完整ORF,连接至克隆载体pMD18-T。测序正确后,将两基因片段分别与表达载体pET-30a(+)连接,构建原核表达载体pET-95和pET-103,转入BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导,SDS-PAGE分析后,用纯化的两种重组蛋白进行iELISA方法研究。结果显示,ORF95和ORF103大小分别为483bp和570bp,重组菌经1mmol/L IPTG诱导5h后,分别在30ku和35ku处有高水平的融合表达,且均以包涵体形式存在。两种目的蛋白以10ng+20ng混合作为包被抗原时,该iELISA方法检测羊痘自然感染血清、弱毒疫苗免疫羊血清和阴性血清的D450nm有明显差异,且与口蹄疫病毒、小反刍兽疫病毒、羊口疮病毒无交叉反应。因此,该方法能有效排除羊痘弱毒疫苗免疫造成的干扰,可特异性检测羊痘野毒感染的血清样品。
- 李慧霞朱学亮刘振勇窦永喜李辉骆学农才学鹏
- 关键词：绵羊痘病毒间接酶联免疫吸附试验
- 一株源于商品胎牛血清的BVDV-2型的分离鉴定及基因组序列分析被引量：11
- 2020年
- 牛病毒性腹泻病毒(BVDV)是引起牛病毒性腹泻/黏膜病的重要病原,也是牛血清及其制品污染中的常见病原体。本研究从商品化胎牛血清中分离到一株致细胞病变(CP)型BVDV(GS2018株),利用电镜观察、免疫荧光检测、分子鉴定、基因组测序及遗传进化分析对其进行鉴定。结果表明,GS2018株接种MDBK细胞后可见明显的细胞病变(CPE),培养第4天病毒滴度达1×106.2·0.1 mL-1。病毒粒子呈圆形,直径为50~60 nm,间接免疫荧光检测为阳性;其5′UTR扩增片段与BVDV-2相应序列高度相似,病毒基因组包含12235个核苷酸(nt)。5′UTR、Npro及E2基因系统进化分析发现,GS2018株与美国BVDV-2 USMARC-60764分离株核苷酸一致性达98%,证明其属于CP型BVDV-2a亚型。但GS2018株在NS2/3区无核酸片段插入,这与大多数CP型BVDV-2明显不同,说明BVDV致细胞病变可能涉及更复杂的机制。
- 李艳萍王立群李慧霞梁盼红才学鹏毛立骆学农
- 关键词：基因组遗传进化分析
- 羊口疮病的研究进展被引量：28
- 2013年
- 羊口疮（OrO是由羊口疮病毒（Offvirus，ORFV）即接触传染性脓疱皮炎病毒（Contagious pustular dermatitisvirus，CPDV）引起的人畜共患、接触性、嗜上皮性传染病。以在口、唇、舌、鼻、乳房等部位形成丘疹、水疱、脓疱和疣状痂皮为特征。该病最早发现于欧洲，
- 李慧霞朱学亮骆学农
- 关键词：羊口疮口疮病传染性脓疱皮炎人畜共患接触性乳房
