吴永光
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科技兴农重点攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪流行性腹泻病毒间接ELISA检测方法的建立被引量：4
- 2016年
- 本研究获得5个猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)S1基因截短基因,原核表达后制备多克隆抗体。酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)、Western blot和间接免疫荧光检测(indirect immunofluorescence assay,IFA)显示,仅有SE蛋白诱导的多克隆抗体具有免疫活性。因此以SE蛋白为抗原建立间接ELISA抗体检测方法,优化各反应参数并确定临界值为0.155。经特异性和符合性分析,该ELISA检测方法具有PEDV特异性,符合率为93.7%。批内、批间重复率变异系数均小于10%,表明建立的iELISA方法重复性良好。抗S蛋白的ELISA检测方法的建立为PEDV血清学抗体检测和疫苗评估奠定了基础。
- 孟琼孔宁单同领吴永光左叶雯童武郑浩李国新于海童光志徐永杰
- 关键词：间接ELISA猪流行性腹泻病毒
- 猪BST-2全基因克隆、真核表达载体构建及组织表达谱分析被引量：1
- 2017年
- 为研究猪BST-2基因的生物学功能,用特异性的引物扩增猪BST-2基因,并利用生物信息学软件对猪BST-2基因及氨基酸进行分子特性分析,同时进行了猪BST-2蛋白的真核表达及组织表达谱分析。结果表明:猪BST-2基因全长851bp,其中5′-UTR为23bp,3′-UTR为294bp,CDS区为534bp,编码177个氨基酸,猪源BST-2蛋白氨基酸序列与大猩猩、仓鼠、家鼠、驴、猫、牛、猕猴、绵羊、人BST-2蛋白氨基酸序列同源性分别为46.1%,41.7%,39.5%,35.4%,42.0%,40.5%,44.4%,38.7%,46.8%。含有2个跨膜结构(27~49aa和154~176aa),2个潜在的糖基化位点,14个潜在的磷酸化位点,包含磷酸激酶ATM、CKⅡ、PKA、PKC的结合位点。构建真核质粒并转染发现猪BST-2蛋白能够在Vero细胞内正确表达。半定量PCR检测发现BST-2基因在所有组织中均有表达,尤其是在免疫组织及器官(淋巴结、胸腺、扁桃体、脾)、大肠、小肠中的表达量较高。本试验为今后进一步分析验证猪BST-2蛋白的抗病毒机制奠定了基础。
- 孔宁吴永光孟琼王忠泽童武郑浩李国新单同领周恩民童光志
- 关键词：组织表达谱
- 猪BST-2全基因克隆、真核表达载体构建及组织表达谱分析
- 为研究猪BST-2基因的生物学功能,用特异性的引物扩增猪BST-2基因,并利用生物信息学软件对猪BST-2基因及氨基酸进行分子特性分析,同时进行了猪BST-2蛋白的真核表达及组织表达谱分析。结果表明:猪BST-2基因全长...
- 孔宁吴永光孟琼王忠泽童武郑浩李国新单同领周恩民童光志
- 关键词：组织表达谱
- 文献传递
