尹华
- 作品数：6 被引量：19H指数：3
- 供职机构：石河子大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金兵团博士基金更多>>
- 相关领域：农业科学艺术更多>>
- 单增李斯特菌溶血素S llsB基因缺失株的构建及部分生物学特性研究被引量：2
- 2018年
- 为分析单增李斯特菌溶血素S(listeriolysin S,LLS)llsB基因缺失对单增李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)生物学特性的影响,本研究利用同源重组构建了llsB基因缺失株LM90-ΔllsB,并以8周龄、体重40g±5g的健康昆明系雄性小鼠为试验动物对其生长特性、半数致死量(LD50)、脏器载菌量等生物学特性进行了初步研究。结果显示,本研究成功构建了llsB基因缺失株;缺失株在体外连续培养20代过程中能稳定遗传。通过生长曲线测定发现,llsB基因缺失株生长活性略高于亲本株;小鼠感染试验结果显示,亲本株和缺失株的LD50分别为106.17和106.50 CFU;与亲本株相比,缺失株在小鼠肝脏和脾脏中的载菌量均极显著减少(P<0.01),说明缺失株对小鼠的感染能力明显减弱。在小鼠脑中未检出单增李斯特菌。综上所述,llsB基因对LM90的部分生物学特性可能有直接或间接的调控作用,本试验结果为进一步研究LLS的致病机理及防控李斯特菌病提供一定的理论依据。
- 尹华任静静王欣雨蒋建军
- 关键词：基因缺失株生物学特性
- 单增李斯特菌llsB基因克隆及序列分析被引量：2
- 2019年
- 试验旨在对新疆绵羊脑炎临床分离株LM90SB2单增李斯特菌llsB基因进行克隆及生物信息学分析,以期进一步完善单增李斯特菌溶血素S的功能研究。根据GenBank中单增李斯特菌F2365基因全长序列(登录号为:AE017262)设计其特异性引物,利用PCR方法对新疆分离株LM90SB2的llsB基因进行扩增,回收目的基因与pMD19-T载体连接,采用PCR、双酶切鉴定筛选阳性菌并进行测序,对所获序列进行同源性比对及遗传变异分析。结果显示,新疆分离株LM90SB2的llsB基因序列全长为876 bp,共编码291个氨基酸;LM90SB2分离株llsB基因核苷酸序列与10-0809、81-0592、81-0558、02-1792、NTSN、02-1289不同分离株同源性均为100%,与CIIMS-PH-1、NRRLB-57603株的同源性均为99.9%,与J1816、R2-502株的同源性为44.7%~45.0%。分子进化树显示,LM90SB2菌株llsB基因与血清型为4b的菌株亲缘关系较近,聚类为同一分支。蛋白质二级结构预测表明,LM90SB2 llsB蛋白为亲水性蛋白,无信号肽,不形成跨膜结构。本试验成功克隆了LM90SB2株llsB基因,为深入探讨该基因功能提供全面的理论依据。
- 王欣雨尹华任静静李红欢蒋建军
- 关键词：单增李斯特菌克隆生物信息学分析
- 食源性单增李斯特菌inlA/inlB/inlC基因缺失株的构建及其生物学特性分析被引量：8
- 2019年
- 为探究内化素inlA/inlB/inlC基因对单增李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)生物学特性的影响,本研究采用融合PCR方法构建Lm681 inlC基因缺失突变体,并构建pKSV7-△inlC穿梭载体,将其转化Lm681-△inlAB感受态细胞,利用温度(42℃)和氯霉素(10μg/mL)抗性双重压力来实现同源重组,筛选同源重组子进行鉴定并研究其部分生物学特性。结果显示,PCR和测序结果证实成功构建了3基因缺失株(Lm681-△inlABC),且缺失株的生长特性与野生株相比无明显差异,溶血特性与野生株保持一致;小鼠感染试验显示,野生株Lm681、Lm681-△inlAB和Lm681-△inlABC对小鼠的致死率分别为80%(8/10)、60%(6/10)和40%(4/10),对小鼠的LD50分别为4.36×10~4、1.35×10~6和2.95×10~7 CFU,且Lm681-△inlABC在肝脏、脾脏及脑组织中的定植能力极显著低于野生株(P<0.01)。研究结果表明,inlA/inlB/inlC基因对Lm致病性发挥具有一定的作用,为深入研究inlX基因介导Lm入侵宿主细胞过程中的作用机制提供了科学依据。
- 任静静杨铭伟陈云飞尹华王欣雨李蓓蓓蒋建军王鹏雁
- 关键词：单增李斯特菌生物学特性
- 饲粮不同粗蛋白质水平对育肥羔羊小肠氨基酸流量及吸收率的影响被引量：3
- 2016年
- 本研究旨在比较饲粮不同粗蛋白质(CP)水平对育肥羔羊小肠氨基酸(AA)流量及吸收率的影响。选用体重(30.0±3.7)kg,安装有瘤胃、十二指肠近端和回肠末端瘘管的3只哈萨克羊公羔为试验动物,采用3×3拉丁方试验设计,各处理饲粮CP水平分别为11.00%、12.00%和13.00%;预试期10 d,正试期10 d。采用镱锕(Yb-Ac)、锂铬乙二胺四乙酸(Li Cr-EDTA)分别作为消化道固相和液相食糜标记物测定小肠食糜流量。结果表明:提高饲粮CP水平可增加羔羊氮进食量、表观消化率和氮沉积,13.00%CP处理显著高于11.00%CP处理(P<0.05),并有增加饲粮干物质(DM)、有机物(OM)和中性洗涤纤维(NDF)表观消化率的趋势(0.05≤P<0.10),但不影响酸性洗涤纤维(ADF)的表观消化率(P>0.05)。提高饲粮CP水平虽然对小肠真食糜流量及氨基酸吸收率无显著性影响(P>0.05),但十二指肠氮、总氨基酸(TAA)流量以及必需氨基酸(EAA)中精氨酸(Arg)、组氨酸(His)和赖氨酸(Lys)的吸收率在数值上有所增加。结果显示,提高饲粮CP水平有提高消化率、小肠食糜流量及氨基酸吸收率的潜在趋势。
- 牛露尹华郑猛甘麦邻陈傲东刘晨黎陈道富高巍
- 关键词：氨基酸吸收率哈萨克羊
- 不同粗蛋白质水平日粮对育肥羊小肠养分吸收率的影响被引量：1
- 2016年
- 本研究旨在比较不同粗蛋白质(CP)水平日粮对育肥羔羊小肠养分吸收率的影响。选用体重30kg左右,安装有瘤胃、十二指肠近端和回肠末端瘘管的3只哈萨克育肥羊为试验动物,采用3×3拉丁方试验设计,采用醋酸镱(Yb-Ac)、锂铬乙二胺四乙酸(LiCr-EDTA)分别作为消化道固相和液相食糜标记物测定小肠食糜流量。结果显示,增加全混合日粮中CP水平可显著提高育肥羊N的进食量、全消化道表观消化率和N沉积(P<0.05),显著提高干物质(DM)和有机物(OM)的表观消化率(P<0.05),但对小肠食糜流量无显著影响(P>0.05);提高日粮CP水平对十二指肠食糜除EE和嘌呤外的营养成分流量均产生显著的影响(P<0.05),仅对回肠食糜中CP、粗灰分(Ash)、DM、中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)流量的影响显著(P<0.05),且对CP、Ash、DM、NDF和ADF的小肠吸收率影响显著(P<0.05)。本试验为进一步深入分析增加日粮CP水平对其在育肥羊体内的消化利用奠定基础。
- 陈傲东尹华牛露郑猛甘麦邻刘晨黎陈道富高巍
- 关键词：哈萨克羊
- 育肥羊饲喂全混合日粮条件下瘤胃固相食糜外流速度及其有效降解率的评定被引量：5
- 2017年
- 试验旨在测定育肥羊饲喂全混合日粮(TMR)条件下瘤胃食糜外流速度(Kp)及干物质(DM)、有机物(OM)及粗蛋白质(CP)的有效降解率。选取3只安装有永久性瘤胃瘘管、体重(30.0±3.7)kg的哈萨克公羔羊作为试验动物,代谢笼内单笼饲养。按3×3拉丁方试验设计,分别饲喂3种能量水平一致而CP水平不同(11%、12%和13%)的TMR。采用醋酸镱(Yb-ac)作为固相食糜标记物,测定镱(Yb)元素的浓度,绘制浓度衰减曲线,利用非线性回归法拟合其Kp,并计算全混合日粮的瘤胃有效降解率。结果显示,3种TMR的瘤胃固相食糜的Kp值分别为6.71、6.66和7.59%/h,TMR1的DM、OM和CP的有效降解率分别为39.82%、38.58%和43.87%;TMR2的为35.70%、34.40%和36.86%;TMR3的为42.46%、41.29%和51.28%。3种TMR的DM在瘤胃中的有效停留时间分别为26.49、28.98和21.73h。此结果为进一步评定TMR的DM及过瘤胃氨基酸的小肠消化率研究提供了重要参数。
- 高新梅郑猛牛露尹华陈道富刘晨黎高巍
- 关键词：瘤胃有效降解率育肥羊
