何婷
- 作品数:4 被引量:3H指数:1
- 供职机构:湖北大学生命科学学院更多>>
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- 相关领域:环境科学与工程生物学更多>>
- 大肠杆菌氨基转移酶的非天然氨基酸底物特异性研究
- 2021年
- 氨基转移酶催化L-氨基酸和α-酮酸之间的氨基转移.TLC(薄层层析)和甲臜颜色反应检测大肠杆菌4种氨基转移酶(TyrAT、IlvAT、AspAT和AvtAT)催化6种非天然氨基酸的转氨活性,发现AvtAT和AspAT无非天然氨基酸转氨活性.TyrAT能催化DL-高苯丙氨酸、L-正亮氨酸和L-正缬氨酸的转氨反应,而IlvAT则催化DL-高苯丙氨酸、L-正缬氨酸、L-正亮氨酸、L-叔亮氨酸和L-新戊基甘氨酸的氨基转移.使用易错PCR突变和DL-高苯丙氨酸/L-正亮氨酸作氮源定向进化筛选,获得10个不同位点突变的TyrAT突变酶.酶活分析发现,这些突变酶虽酶活不同但尚未扩展TyrAT的非天然氨基酸底物特异性.10个突变酶中,每个酶蛋白210位都出现Cys替换Phe.与野生型酶比较,TyrAT的F210C突变明显改变酶的催化最适温度并且提高酶在37℃的催化效率.
- 何婷倪雪晨张萍萍陈茹宋晶晶雷佳王行国
- 关键词:氨基转移酶非天然氨基酸易错PCR底物特异性最适温度
- E.coli酪氨酸转氨酶的纯化与非天然氨基酸的底物特异性检测
- 2010年
- 构建重组菌株E.coliBL21(DE3)转pET23a-tyrB,IPTG诱导其大量表达,然后依次通过盐析、离子交换层析、疏水层析、凝胶过滤层析获得纯酶,运用薄层层析技术(TLC)检测,结果表明纯化的TyrAT转氨酶对自身底物酪氨酸在37℃和50℃具有较高活性.分别加入非天然氨基酸L-正缬氨酸、L-新戊基甘氨酸、L-叔亮氨酸、D-正亮氨酸作为底物,检测到TyrAT转氨酶对L-叔亮氨酸在50℃下有活性,对D-正亮氨酸在37℃和50℃均有催化活性,且50℃下效果更好.
- 陈茹王行国何婷张萍萍
- 关键词:纯化非天然氨基酸薄层层析
- 对城市垃圾焚烧发电的思考——以武汉市为例被引量:3
- 2011年
- 传统垃圾处理方式主要有填埋、堆肥等,但都存在较大的技术局限性。当前,垃圾焚烧技术不断发展,垃圾发电已成为国际、国内处理垃圾的新潮流,并取得了相当的效益。以武汉市为例,详述了垃圾焚烧发电对环境和居民产生的影响,分析了垃圾发电的环保、社会、经济效益,提出了相应的发展措施。
- 王国栋耿嘉伟李红蕊何婷王克勤李海波
- 关键词:垃圾发电
- 铁合金硅锰生产线二氧化硫产排污系数核算
- 2011年
- 根据我国硅锰铁合金生产企业分布、工艺特点以及污染物排放情况,按产品、原料、工艺、规模4要素对硅锰铁合金生产企业进行"四同组合"分类,共分二类,即矿热炉≥1万kVA为大中类;矿热炉<1万kVA为小类.同时考虑地域特点选取样本调查企业,大中类共选取5家企业,小类共选取6家企业.通过现场调查和实测得到企业污染源产生和排放原始数据和实测数据,采用类比法、经验判断法、物料衡算法,对所得的数据进行整理、分析、甄别,获取有用数据,得到硅锰企业不同规模生产线二氧化硫的产污量和排污量.依据产、排污系数的数学表达,采用加权平均法计算出铁合金硅锰生产线二氧化硫的产、排污系数.
- 李红蕊耿嘉伟王国栋何婷王克勤李海波
- 关键词:二氧化硫产排污系数