杨雪晶
- 作品数:2 被引量:3H指数:1
- 供职机构:东北农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金:黑龙江省“十五”科技攻关项目黑龙江省科技计划项目哈尔滨市科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 鹅源新城疫病毒HN基因在Bac to Bac系统中的表达及抗原性检测被引量:2
- 2010年
- 血凝素-神经氨酸酶蛋白(Haemagglutinin Neuramindase,HN)是鹅源新城疫病毒诱导体液免疫的重要靶抗原。经pMD18-T-HN阳性质粒扩增了HN基因,扩增的片段亚克隆到转座载体pFastHTb中构建重组转座载体pFastHTb-HN。将其转化到DH10Bac感受态细胞中,得到重组杆粒rBacmid-HN,重组杆粒rBacmid-HN转染sf9昆虫细胞,收获的重组病毒盲传两代。PCR鉴定重组病毒,获得的重组杆状病毒命名为rBv-HN。经间接免疫荧光(IFA)和SDS-PAGE鉴定,获得的重组杆状病毒rBv-HN在sf9昆虫细胞中获得表达,且表达的蛋白大小为75ku左右,与理论值相当。Western blot和Dot-ELISA检测结果表明,表达的蛋白可与鸡抗NDV血清发生特异性抗原反应,证实所表达的蛋白具有良好的反应原性。
- 杨雪晶鞠环宇高明春马波王君伟
- 关键词:HN基因BACBAC抗原性
- 重组鸡痘病毒rFPV-VP3-F的遗传稳定性及在鸡体内的表达被引量:1
- 2009年
- 为了评价重组禽痘病毒rFPV-VP3-F的遗传稳定性,将rFPV-VP3-F在鸡胚成纤维细胞(CEF)连续培养20代。对第5、10、15和20代病毒的F基因进行扩增及序列分析,未发现F基因发生氨基酸改变;通过间接免疫荧光方法检测各个代次rFPV-VP3-F中F基因特异表达的情况;将rFPV-VP3-F和禽痘病毒FPV017分别接种于35日龄商品鸡,在免疫后第7、14、21、28、35 d采集各组血清,检测中和抗体效价。结果显示,F基因在重组禽痘病毒中可以稳定遗传,可在CEF中表达相应蛋白,可刺激鸡产生相应的抗体。
- 李丹王君伟于志丹赵妍尚绪增鞠环宇杨雪晶
- 关键词:重组鸡痘病毒中和抗体