付雪
- 作品数：5 被引量：13H指数：3
- 供职机构：宁夏医科大学临床医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人胎盘胎儿侧间充质干细胞无血清培养上清对肺脏上皮细胞氧化应激的保护作用被引量：6
- 2017年
- 背景:前期研究证实人胎盘胎儿侧间充质干细胞培养上清具有一定的清除活性氧自由基的能力,且本身具有一定的抗氧化酶活性。目的:探究人胎盘胎儿侧间充质干细胞在无血清培养条件下所得上清对氧化应激损伤的肺脏上皮细胞的保护作用及其作用机制。方法:分别使用不同浓度的过氧化氢(200,400,500,600,800μmol/L)对肺脏上皮细胞A549细胞系进行6,12,24 h的氧化刺激,通过CCK-8法对肺脏上皮细胞存活率进行检测,得出存活率为50%时的过氧化氢浓度作为氧化损伤模型的最适条件。用Hochest33258染色及Western Blot对模型有效性进行验证。采用无血清培养基培养胎盘胎儿侧间充质干细胞,收集P3代细胞培养上清将其作用于氧化损伤的肺脏上皮细胞,培养24 h,即上清组。同时设立损伤组(仅进行氧化损伤)和维生素C组(培养基中添加100μmol/L的维生素C)。利用流式细胞术对各组细胞凋亡情况进行检测以及Western Blot检测凋亡相关蛋白及氧化应激经典信号通路Nrf2-Keap1-ARE信号通路相关蛋白的表达。结果与结论:(1)CCK-8法检测得出,采用600μmol/L的过氧化氢对肺脏上皮细胞进行24 h的氧化刺激,A549细胞存活率为(56.41±3.31)%。Hochest33258染色及Western Blot证实模型的可靠性;(2)流式细胞术结果显示维生素C组和上清组氧化损伤细胞的凋亡率与损伤组细胞相比有不同程度的降低,其中上清组与损伤组相比差异有统计学意义(P<0.05);(3)Western Blot对凋亡相关蛋白的检测显示,与损伤组对比,维生素C组和上清组凋亡促进基因Bax蛋白表达减弱,凋亡抑制基因Bcl-2蛋白表达增强,且差异有统计学意义(P<0.05)。Nrf2-Keap1-ARE信号通路相关蛋白显示与损伤组对比,维生素C组和上清组Nrf2蛋白表达增强,Keap1分子表达减弱且差异有统计学意义(P<0.05);(4)上述结果提示,实验成功构建了肺脏上皮细胞损伤模型,且人胎盘胎儿侧间充�
- 付雪刘国攀张玉洁严秀蕊马晓娜刘晓明魏军
- 关键词：干细胞间充质干细胞氧化应激WESTERNBLOT法
- 人胎盘胎儿侧间充质干细胞无血清培养上清的抗氧化活性分析被引量：6
- 2017年
- 背景:目前关于间充质干细胞的研究大多集中于其免疫调节功能,而关于细胞和培养上清的其抗氧化能力的研究较为少见。目的:观察人胎盘胎儿侧间充质干细胞在无血清培养条件下,其上清的抗氧化能力。方法:采用无血清培养基培养胎儿侧胎盘间充质干细胞,分别于48 h收集P2-P6代细胞培养上清。在空白培养基中添加维生素C 100μmol/L作为阳性对照。检测P2-P6代人胎盘胎儿侧间充质干细胞培养上清的总抗氧化能力、清除活性氧自由基的能力和抗氧化酶活性。结果与结论:(1)抗氧化能力:各代次人胎盘胎儿侧间充质干细胞培养上清具有一定的抗氧化能力,且不同代次间的上清具有一定的差异,其中总抗氧化能力与40-80μmol/L的维生素C相当,各代次上清均具有一定的清除二苯基苦基苯肼自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基等自由基清除能力;(2)抗氧化酶活性分析:各代次间的人胎盘胎儿侧间充质干细胞培养上清中均可以检测到一定水平的超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性;(3)结果提示,在无血清条件下培养胎儿侧胎盘间充质干细胞的上清具有一定的抗氧化能力和抗氧化酶的活性。人胎盘胎儿侧间充质干细胞的抗氧化能力与其旁分泌机制有关,但其中的抗氧化成分及分子机制有待进一步的研究。
- 付雪张玉洁严秀蕊马晓娜刘晓明魏军
- 关键词：干细胞胎盘间充质干细胞无血清培养培养上清抗氧化
- 一种检测人胎盘胎儿侧间充质干细胞抗氧化能力的方法
- 本发明属于间充质干细胞技术领域，具体涉及一种检测人胎盘胎儿侧间充质干细胞抗氧化能力的方法，其是从胎盘中提取人胎盘胎儿侧间充质干细胞得原代人胎盘胎儿侧间充质干细胞；将原代人胎盘胎儿侧间充质干细胞进行培养得第一代间充质干细胞...
- 魏军严秀蕊刘晓明付雪张玉洁
- 文献传递
- 盐酸洛哌丁胺制备小鼠便秘模型的研究被引量：4
- 2022年
- 目的探索应用盐酸洛哌丁胺制备小鼠便秘模型的最佳用药剂量和用药时间。方法选取2个月龄C57BL/6J小鼠50只,雌雄各半。随机分为空白对照组与便秘模型组。便秘模型组根据盐酸洛哌丁胺剂量分为50、60、70、80mg/kg 4个组,将盐酸洛哌丁胺溶于1 mL纯水中,于每天早、晚7:00灌胃给药;空白对照组给予等量纯水,持续7 d,观察小鼠每日体重、大便量和性状、活动状态、毛发状态、存活情况,灌胃7 d时同时灌胃墨水,观察肠推进率。通过小鼠粪便量、性状及肠道推进率的变化判断小鼠便秘模型是否制备成功,并确定制备便秘模型的最佳用药剂量和时间。结果与空白对照组相比,盐酸洛哌丁胺各剂量组小鼠的粪便量和性状、小肠推进率差异均有统计学意义(P<0.05);与50、60及80 mg/kg组比较,70 mg/kg组盐酸洛哌丁胺灌胃7 d制备的小鼠便秘模型效果好,制备的便秘模型较稳定。结论70 mg/kg盐酸洛哌丁胺连续灌胃7 d,每天早晚各1次,可制备稳定的小鼠便秘模型。
- 李绿梅张娜代瑶瑶付雪王艳平张莲香孙向平
- 关键词：便秘盐酸洛哌丁胺小鼠
- 细胞共培养条件下人胎盘间充质干细胞对肺脏上皮细胞抗氧化损伤作用的机制研究
- 间充质干细胞因具有强大的免疫调节功能而被广泛用于一些慢性性疾病和组织损伤修复的研究。最近研究表明,不同组织来源的间充质干细胞同时具备抗氧化损伤的作用,但对其作用机制还未完全阐明。我们前期研究发现人胎儿侧胎盘间充质干细胞(...
- 付雪
- 关键词：共培养
