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刘晓宁: 作品数：21 被引量：69H指数：5; 供职机构：黄河科技学院医学院更多>>; 发文基金：河南省科技攻关计划河南省教育厅自然科学基金国家级大学生创新创业训练计划更多>>; 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>

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LsSAT2与LsAAE3互作调控山黧豆ODAP水平: 2025年; 丝氨酸乙酰基转移酶LsSAT2(serine acetyltransferase,SAT)是山黧豆中神经活性成分β-N-草酰-L-α,β-二氨基丙酸(β-N-oxalyl-L-α,β-diaminopropionic acid,β-ODAP)生物合成的关键酶。为进一步分析LsSAT2的功能及其活性调控,本研究构建了LsSAT2过表达山黧豆毛状根株系,利用免疫沉淀和质谱联用技术(immunoprecipitation mass spectrum,IP-MS)筛选到了LsSAT2的潜在互作蛋白草酰辅酶A合成酶LsAAE3,通过蛋白对接、酵母双杂交(yeast two-hybrid,Y2H)、蛋白质下拉试验(pull down assay)等进行蛋白互作验证及功能分析。结果表明,利用IP-MS从LsSAT2过表达山黧豆毛状根株系中筛选到其潜在的互作蛋白LsAAE3;Y2H和Pull down试验证实了LsAAE3与LsSAT2存在蛋白互作关系;蛋白对接分析表明,LsSAT2通过羧基末端与LsAAE3发生蛋白互作。LsSAT2在山黧豆毛状根株系中的过表达使得β-ODAP水平相比对照降低52.4%,LsAAE3在山黧豆毛状根株系中的过表达则使得β-ODAP水平升高55.9%。上述结果加深了对山黧豆β-ODAP生物合成调控的理解。; 刘晓宁张颖蔡曼蕾马昊苗智博曹宁连荣芳徐全乐; 关键词：山黧豆三七素

绿原酸对脂多糖致炎症小鼠体内体外COX-2的影响被引量：8: 2017年; 探讨绿原酸对脂多糖致炎症小鼠体内体外COX-2蛋白表达的影响.脂多糖滴鼻造模建立小鼠急性肺损伤模型,脂多糖诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7建立细胞炎症反应模型,应用Weston blot法,检测小鼠肺组织内以及RAW264.7巨噬细胞中COX-2的蛋白表达.绿原酸在小鼠体内体外均能有效降低脂多糖诱导的COX-2的蛋白表达,并能促进COX-2蛋白的降解.降低脂多糖诱导的COX-2的蛋白水平是绿原酸抗炎的机制之一.; 抗晶晶张丽娟刘晓宁殷志敏; 关键词：绿原酸急性肺损伤 COX-2

hpRNA的制备新方法及其在RNAi载体中的应用: 2016年; [目的]验证制备新方法所获得的稳定hpRNA是否可用于RNAi载体的构建并达到基因表达干扰的效果。[方法]利用制备新方法(2μL DNA与8μL H_2O混匀,95℃5 min,37℃15 min)制备hpRNA,后采用REGS方法构建Zm MDAR RNAi载体,通过Grx1-ro GFP2和荧光实时定量PCR检测基因表达干扰的效果。[结果]利用制备新方法制备50 nt hpRNA。Zm MDAR基因的表达量变化和Grxl-ro GFP2探针的荧光比值变化表明hpRNA介导的干扰载体引起了原生质体氧化还原状态的变化。[结论]通过制备新方法所制备的hpRNA为RNAi载体所介导的干扰作用奠定基础。; 刘晓宁; 关键词：发夹RNA RNAI

TBL+LBL在医学遗传学教学中的应用初探: 2018年; 本文从普通高等医学院校医学遗传学教学的实际情况出发,探索医学遗传学TBL+LBL教学模式,从而提高学生对医学遗传学的积极性和主动性,为社会培养高技能应用型人才。; 抗晶晶刘晓宁薄惠; 关键词：医学遗传学教学模式 LBL TBL

不同海拔地区油菜类黄酮合成关键基因的表达分析及克隆: 2021年; 目的:分析不同海拔地区油菜类黄酮合成基因的表达模式,并克隆关键基因。方法:荧光定量PCR分析类黄酮生物合成途径关键基因C4H、CHS、F3H、F3’H、FLS在不同组织(叶片、茎、花蕾和花粉)的表达模式和不同海拔地区(青海、河南)的表达模式;通过NCBI数据库对克隆的BpFLS基因进行BLASTx比对,利用Clustal Omega进行蛋白质氨基酸序列多重比对。结果:在油菜不同组织中,花粉中类黄酮生物合成途径关键酶基因C4H、CHS、F3H、F3’H、FLS的表达量最高;高海拔地区的青海油菜花粉中类黄酮合成基因的表达量高于低海拔地区的河南油菜花粉中的表达量,尤其是FLS基因表达水平有显著差异;BpFLS基因编码蛋白质的氨基酸序列与甘蓝型油菜和白菜的相似度分别为100%和99.4%。结论:花粉是油菜类黄酮含量较高的组织;油菜花粉类黄酮合成关键基因FLS与较高类黄酮含量有着密切的关系。; 王瑶瑶马鹏飞丁剑兰黄应文刘晓宁; 关键词：油菜类黄酮花粉

牛蒡子苷元抗炎机制的新进展被引量：12: 2017年; 牛蒡子苷元是从牛蒡子中提取的主要活性成分,具有广泛的药理作用.研究表明,牛蒡子苷元在炎症性疾病方面表现出较好的疗效.综述国内外关于牛蒡子苷元抗炎的药理作用机制的研究进展,并分析将来研究的方向,为研究与开发以牛蒡子苷元为原料的抗炎新药提供参考.; 抗晶晶刘晓宁殷志敏; 关键词：牛蒡子苷元抗炎机制炎症介质

亚甲基四氢叶酸脱氢酶1在癌症中的作用及机制研究进展: 2022年; 亚甲基四氢叶酸脱氢酶(Methylenetetrahydrofolate Dehydrogenase,MTHFD)1作为叶酸代谢的关键酶,催化四氢叶酸部分衍生物的转化,其催化产物通过一碳代谢与癌细胞中的大量生物转化相联系。关于MTHD1的多态性与癌症的发生发展已有大量研究。文章将简要综述MTHFD1在癌症发生、发展过程中的作用,和未来的研究方向。; 石晶博王帅程光辉周乙兵马柳洁贺江飞刘晓宁; 关键词：癌细胞叶酸代谢

冬凌草甲素抗炎作用参与多种疾病治疗的新进展被引量：17: 2019年; 冬凌草甲素是冬凌草的主要活性成分,具有广泛的药理作用。研究表明,冬凌草甲素在炎症性疾病方面表现出较好的疗效。综述国内外关于冬凌草甲素抗炎作用参与多种疾病治疗的研究进展,并分析研究的方向,为研究与开发以冬凌草为原料的抗炎新药提供参考。; 抗晶晶刘晓宁; 关键词：冬凌草甲素抗炎作用炎症性疾病

线粒体ROS改变参与石蒜碱诱导的HepG2细胞凋亡被引量：2: 2019年; 探究石蒜碱诱导HepG2细胞凋亡的分子机理. CCK-8实验检测细胞增殖情况;流式细胞术检测加或不加SS31情况下,石蒜碱对HepG2细胞凋亡比例的影响;用核酸染料Hoechst 33342评估凋亡细胞细胞核的形态变化;用Western blot分析技术检测PARP片段的表达情况.成功构建靶向线粒体的Mito-Grx1-roGFP2转基因稳定株肝癌细胞系HepG2. SS31作为线粒体ROS的定向清除剂,能够改善石蒜碱引起的HepG2细胞形态学损伤及细胞核内PARP切割,抑制石蒜碱诱导的细胞凋亡,降低反映线粒体ROS含量的405 nm/488 nm荧光比值.研究结果提示,线粒体内ROS水平的改变是石蒜碱诱导HepG2细胞凋亡的机制之一.石蒜碱有望成为治疗肝癌的潜力药物,值得更深入的研究.; 抗晶晶刘晓宁; 关键词：石蒜碱细胞凋亡

靶向线粒体的mt-roGFP2荧光探针检测人肝癌HepG2细胞线粒体ROS水平动态变化被引量：3: 2018年; 目的通过靶向线粒体的氧化还原敏感绿色荧光蛋白探针(mt-roGFP2荧光探针)检测人肝癌HepG2细胞(以下称HepG2细胞)线粒体活性氧(ROS)水平动态变化,旨在为以线粒体ROS为靶标的肝癌化疗奠定基础。方法采用无缝克隆技术构建pLenti-CMV-mt-roGFP2-PGK-puro慢病毒载体并测序鉴定。将慢病毒载体pLenti-CMV-mt-roGFP2-PGK-puro与包装质粒pVSVg、pRev和pGag-Pol共转染人肾上皮293T细胞,获得mt-roGFP2慢病毒颗粒,并检测病毒滴度。将制备好的mt-roGFP2慢病毒颗粒感染HepG2细胞,通过荧光显微镜和Western blotting法鉴定观察HepG2细胞roGFP表达情况。将对数生长期稳定表达mt-roGFP2的HepG2细胞(HepG2-mtroGFP2细胞)与Mito Tracker线粒体荧光探针共温育,采用激光共聚焦显微镜观察mt-roGFP2荧光探针的亚细胞定位。取对数生长期HepG2-mt-roGFP2细胞先后经0.5 mmol/L过氧化氢(H_2O_2)和1 mmol/L二硫苏糖醇(DTT)处理,采用尼康A1R激光扫描共聚焦显微镜拍摄同一细胞,Image J软件分析荧光图片。结果成功构建p LentiCMV-mt-roGFP2-PGK-puro慢病毒载体。制备的mt-roGFP2慢病毒平均滴度为4.04×10~8 IU/mL。mt-roGFP2荧光探针稳定表达在HepG2细胞中,并正确靶向HepG2细胞线粒体,成功构建HepG2-mt-roGFP2细胞。外源性氧化剂H_2O_2的加入可导致HepG2-mt-roGFP2细胞线粒体ROS水平明显升高,其荧光比值(405 nm/488 nm)从1.19上升到3.98,加入还原剂DTT可使其荧光比值下降至1.25。结论靶向线粒体的mt-roGFP2荧光探针能够实时动态、可逆地检测HepG2细胞线粒体ROS水平变化并实时成像。; 刘晓宁薄惠刘翠娥; 关键词：肝癌 HEPG2细胞线粒体

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