杨成
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
- 供职机构：第三军医大学西南医院更多>>
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- 重组人β防御素4的原核表达、纯化及抗铜绿假单胞菌活性初探被引量：3
- 2009年
- 目的制备原核表达的重组人β防御素4(human beta defensin4,HBD4),初步探讨其对铜绿假单胞菌的体外抗菌活性。方法将编码HBD4的DNA片段连接到大肠杆菌表达载体pET42a中,构建好的表达质粒pET42a-HBD4转化到表达菌株BL21(DE3)中,0.5mmol/L IPTG诱导表达4h,亲和纯化融合蛋白后经Western blot鉴定,再以肠激酶酶切融合蛋白,镍柱亲和层析分离HBD4;采用打孔法初测其抗铜绿假单胞菌活性,并用微量稀释法测定HBD4与3种抗生素的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),比较其抗铜绿假单胞菌活性差异。结果GST-HBD4在大肠杆菌中以可溶形式成功表达,纯化的重组HBD4体外对铜绿假单胞菌有抗菌活性,其效能略低于亚胺培南,而高于哌拉西林和环丙沙星。结论采用基因工程技术成功表达了重组HBD4,其对铜绿假单胞菌有较强的杀菌活性,具有烧伤创面感染治疗的应用前景。
- 甘晓琴伍素华罗向东杨成吴燕
- 关键词：抗菌肽铜绿假单胞菌
