毛伟
- 作品数：70 被引量：116H指数：6
- 供职机构：内蒙古农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金内蒙古自治区自然科学基金农业部农产品质量安全监管专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 金黄色葡菌球菌脂蛋白对M1型小鼠骨髓源巨噬细胞免疫作用的影响
- 2021年
- 本研究旨在阐明金黄色葡萄球菌脂蛋白对M1型小鼠骨髓源巨噬细胞免疫作用的影响,为金黄色葡萄球菌致病性研究提供理论参考。以金黄色葡萄球菌野生株SA113(WT SA113)和SA113 lgt::ermB脂蛋白表达缺失菌株(SA113Δlgt株)体外感染M1型小鼠骨髓源巨噬细胞,分为3组:空白对照组、WT SA113感染组(MOI:3∶1)、SA113Δlgt感染组(MOI:3∶1)。采用ELISA法检测M1型小鼠骨髓源巨噬细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、趋化因子(RANTES)和白细胞介素10(IL-10)的水平,实时荧光定量PCR检测Toll样受体2(TLR2)、Toll样受体4(TLR4)和含NLR家族Pyrin域蛋白3(NLRP3)基因的表达,免疫荧光法检测脂蛋白对M1型小鼠骨髓源巨噬细胞吞噬金黄色葡萄球菌作用的影响。结果显示,与空白对照组相比,WT SA113感染组和SA113Δlgt感染组均可显著上调M1型小鼠骨髓源巨噬细胞中TNF-α、RANTES、IL-10分泌量以及WT SA113感染组TLR2、NLRP 3基因表达水平(P<0.05),而TLR 4基因表达量显著降低(P<0.05);与WT SA113感染组相比,SA113Δlgt感染组M1型小鼠骨髓源巨噬细胞中TNF-α、IL-1β、RANTES、IL-10分泌量以及TLR2(12 h除外)、NLRP 3基因表达水平显著降低(P<0.05)。免疫荧光结果显示,M1型巨噬细胞对SA113Δlgt株的吞噬作用显著低于对WT SA113株的吞噬作用(P<0.05)。综上,金黄色葡萄球菌的脂蛋白在M1型小鼠骨髓源巨噬细胞中主要通过激活TLR2和NLRP3受体,诱导细胞因子TNF-α、IL-1β、RANTES和IL-10的产生和释放。
- 张静钱英红张凯吴金迪刘博刘博曹金山
- 关键词：脂蛋白
- TCDCA对小鼠血清和巨噬细胞内cAMP和cGMP含量的影响
- 【目的】牛磺鹅去氧胆酸(Taurochenodeoxycholic Acid,TCDCA)。是动物胆汁的主要有效成分之一,其化学名称为3α,7α-二羟基-5β-24-胆烷酰-N-牛磺酸,是由牛磺酸(Taurine,Tau...
- 李培锋刘明强毛伟
- 关键词：CAMPCGMP环孢菌素A
- 文献传递
- NLRP3-PGE_(2)受体参与小鼠肌成纤维细胞和巨噬细胞相互作用
- 2025年
- 为探究NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)与前列腺素E_(2)(PGE_(2))受体EP2和EP4是否参与肌成纤维细胞和巨噬细胞的相互作用,本研究体外培养野生型小鼠(C57BL/6J)和NLRP3基因敲除小鼠(NLRP3^(-/-))耳源肌成纤维细胞,收集C57BL/6J肌成纤维细胞培养上清液(C57BL/6J MFbCM)和NLRP3^(-/-)肌成纤维细胞培养上清液(NLRP3^(-/-) MFbCM),以体外培养小鼠骨髓源M1型巨噬细胞和M2型巨噬细胞为模型,分别加入C57BL/6J MFbCM和NLRP3^(-/-) MFbCM处理M1和M2型巨噬细胞,使用前列腺素E_(2)(PGE_(2))受体EP2/EP4抑制剂和C57BL/6J MFbCM与M1或M2型巨噬细胞共培养,PGE_(2)受体EP2/EP4激动剂和NLRP3^(-/-) MFbCM与M1或M2型巨噬细胞共培养。同时,设置EP2、EP4抑制剂或激动剂单独处理M1和M2型巨噬细胞实验组。培养24 h后检测M1型巨噬细胞一氧化氮(NO)和白介素6(IL-6)的分泌量,检测M2型巨噬细胞精氨酸酶活性以及白介素10(IL-10)的分泌量。结果表明,在M1型巨噬细胞中,C57BL/6J MFbCM和NLRP3^(-/-) MFbCM均可上调M1型巨噬细胞IL-6和NO分泌,且C57BL/6J MFbCM上调现象更为显著,NLRP3^(-/-) MFbCM与EP2或EP4受体激动剂联合使用时IL-6和NO分泌也显著上调。在M2型巨噬细胞中,C57BL/6J MFbCM促进精氨酸酶活性和IL-10分泌,NLRP3^(-/-) MFbCM的诱导效果较弱,同时,NLRP3^(-/-) MFbCM与EP2或EP4受体激动剂联合使用时对精氨酸酶活性和IL-10分泌无显著影响。此外,EP2或EP4受体抑制剂对C57BL/6J MFbCM诱导的M1/M2型巨噬细胞的分泌功能均有抑制效果,但单独使用EP2或EP4受体抑制剂/激动剂对M1/M2型巨噬细胞的分泌功能均无显著影响。本研究表明肌成纤维细胞中NLRP3对巨噬细胞活性具有显著诱导和促进作用,且NLRP3可能通过PGE_(2)-EP2/EP4途径调节肌成纤维细胞对M1型巨噬细胞的分泌活动。
- 张双翼赵佳敏巩志国毛伟刘博
- 关键词：NLRP3巨噬细胞肌成纤维细胞
- EP2受体介导大肠杆菌感染的奶牛子宫内膜组织损伤机制研究被引量：4
- 2019年
- 为了探索EP2受体是否参与调节大肠杆菌感染的奶牛子宫内膜组织损伤,试验以体外培养的奶牛子宫内膜组织为研究对象,采用实时荧光定量PCR、免疫荧光和H.E.染色等方法对EP2受体激动剂处理的大肠杆菌感染的奶牛子宫内膜组织中损伤因子HMGB-1和HABP1的表达以及子宫内膜组织损伤情况进行了研究。结果表明:与空白对照组相比,用大肠杆菌处理后可极显著上调奶牛子宫内膜组织中HMGB-1和HABP1 mRNA及蛋白的表达,而用大肠杆菌和EP2受体激动剂共同处理组织后HMGB-1和HABP1 mRNA及蛋白的表达进一步升高。用大肠杆菌处理的子宫内膜组织上皮细胞部分脱落,腺细胞崩解、坏死,腺体轮廓不清晰;而用大肠杆菌和EP2受体激动剂共同处理时,子宫内膜组织损伤情况进一步加强,上皮细胞完全脱落,腺体崩解融合更加严重。说明EP2受体能够介导大肠杆菌引起的奶牛子宫内膜组织损伤。
- 张超王灵芮毛伟毛伟曹金山
- 关键词：大肠杆菌透明质酸
- 头孢噻呋酸晶体注射液对乳腺组织的刺激性及代谢规律的研究被引量：2
- 2013年
- 目的:观察头孢噻呋酸晶体注射液对兔子和大鼠乳腺组织的刺激性并研究其在大鼠乳腺组织中的代谢规律。方法:采用临床症状观察与HE染色法观察了头孢噻呋酸晶体注射液对兔子和大鼠乳腺组织的刺激性作用;采用高效液相色谱-质谱法检测了头孢噻呋酸晶体注射液在大鼠乳腺组织中不同时间点的残留量。结果:头孢噻呋酸晶体注射液灌注兔乳腺组织中10d内对乳腺组织有一定的刺激性,60d乳腺组织切片显示乳导管内有脱落的上皮细胞,淋巴细胞浸润,少量结缔组织增生,腺泡内有少量灰蓝色物质,疑似是未吸收的药物。头孢噻呋酸晶体注射液在大鼠乳腺组织中的含量随时间呈现明显的下降趋势,60d时含量为0.0260ppb。结论:头孢噻呋酸晶体注射液对兔子和大鼠乳腺组织的刺激性小;其在大鼠乳腺组织中代谢较快。
- 关红李成应刘明强毛伟赵俊利
- 关键词：乳腺组织刺激性代谢规律
- TCDCA对AA大鼠滑膜组织糖皮质激素受体基因表达的影响被引量：3
- 2017年
- 为了观察牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA)对大鼠佐剂性关节炎模型滑膜组织中糖皮质激素受体(GR)基因表达的影响,并探讨TCDCA对AA大鼠成纤维样滑膜细胞的作用机制,试验制备AA大鼠模型,分离AA大鼠滑膜组织,应用荧光定量RT-PCR技术检测TCDCA对AA大鼠滑膜组织GR mRNA表达的影响。结果表明:与对照组相比,模型组AA大鼠滑膜组织中的GR表达量显著增加(P<0.05);与模型组相比,低剂量(0.1g/kg)TCDCA口服治疗组AA大鼠的GR mRNA表达量显著增加(P<0.05)。说明TCDCA能显著促进AA大鼠滑膜组织GR mRNA的表达。
- 毛伟钱英红关红何秀玲刘博曹金山李培锋
- 关键词：荧光定量RT-PCR滑膜组织
- 前列腺素E_2和F_(2α)对LPS刺激后奶牛子宫内膜上皮细胞COX-1和COX-2表达的影响被引量：3
- 2017年
- 试验旨在阐明前列腺素E_2(prostaglandin E_2,PGE_2)和F_(2α)(prostaglandin F_(2α),PGF_(2α))对体外培养的奶牛子宫内膜上皮细胞中环氧合酶-1(cyclooxygenase-1,COX-1))与环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)表达的影响。培养奶牛子宫内膜上皮原代细胞和传代细胞,第4代细胞以1×106个/孔接种于6孔板,以10-7 mol/L PGE_2和PGF_(2α)分别预处理细胞24h,以100ng/mL细菌脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)刺激细胞4、8和12h后分别提取RNA和总蛋白质,采用实时荧光定量PCR与Western blotting等技术检测COX-1与COX-2mRNA和蛋白质的表达量。结果表明,与对照组相比,COX-1 mRNA表达量在PGE_2单独作用4、8和12h后显著上调(P<0.05);COX-2mRNA表达量在PGE_2单独作用4和12h后显著上调(P<0.05),PGE_2单独处理使COX-1、COX-2蛋白表达量均显著上调(P<0.05)。与对照组相比,LPS刺激8和12h时COX-1mRNA表达量显著下调(P<0.05),LPS刺激后COX-1蛋白表达量无显著变化(P>0.05);LPS刺激后4、8和12h时COX-2mRNA表达量显著上调(P<0.05),LPS刺激后COX-2蛋白表达量显著上调(P<0.05)。与LPS单独处理组相比,LPS+PGE_2处理组在8和12h时COX-1和COX-2mRNA表达量均显著上调(P<0.05),同时COX-1和COX-2蛋白表达量也显著上调(P<0.05)。PGF_(2α)在LPS未刺激和刺激后对COX-1和COX-2mRNA的表达无显著影响(P>0.05),仅在PGF_(2α)单独处理8和12h后COX-1mRNA表达量上调(P<0.05)。两种激素联合处理与各自单独处理及LPS单独刺激相比,对COX-1和COX-2mRNA表达具有一定的协同诱导作用。
- 刘博沈媛毛伟高瑞峰曹金山
- 关键词：环氧合酶-2
- 在LPS诱导的天然免疫反应中前列腺素D_(2)与TLR2和TLR4的相互调控作用
- 2023年
- 体外培养小鼠腹腔巨噬细胞后通过实时荧光定量PCR、Western blot、ELISA和流式细胞仪检测,分析模式识别受体TLR2和TLR4对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导巨噬细胞前列腺素D合成酶表达和PGD_(2)分泌的影响。结果显示,在TLR2或TLR4缺失的情况下,LPS诱导巨噬细胞中H-PGDS和COX-2基因或蛋白的表达(P<0.05),以及PGD_(2)的分泌(P<0.01)会受到不同程度的影响。此外,分析了内外源性PGD_(2)对LPS诱导巨噬细胞TLR2和TLR4表达的影响。结果显示,前列腺素D合成酶抑制剂HQL-79和H-PGDS inhibitorⅠ预处理可显著下调LPS诱导TLR2的表达(P<0.001)。但是,当使用外源性PGD_(2)后,LPS诱导巨噬细胞TLR4的表达水平发生显著下调,而不是TLR2(P<0.05)。结果表明,TLR2和TLR4参与LPS诱导巨噬细胞中PGD_(2)合成分泌,且内外源性PGD_(2)对LPS刺激巨噬细胞诱导TLR2和TLR4的表达具有不同调控作用。
- 李成应巩志国张双翼刘博毛伟
- 关键词：脂多糖环氧合酶-2
- 羊呼吸道溶血性曼氏杆菌的分离鉴定及其致病性和耐药性研究
- 2025年
- 【目的】了解内蒙古地区养殖场引起羊呼吸道疾病的主要病原菌,并探究其致病性及耐药性,为相关疾病防治药物的选择提供参考。【方法】对采集的病死羊肺脏组织进行病原菌分离培养、生化鉴定、分子生物学鉴定,并对其进行小鼠致病性试验,采用PCR法检测分离菌株毒力基因携带情况;利用K-B法检测分离菌株的药物敏感性,通过PCR法检测分离菌株耐药基因携带情况;用牛津杯法检测中药单体小檗碱、柠檬醛和百里香酚对分离菌株的体外抑菌效果。【结果】分离菌株在血琼脂平板培养基上形成β-溶血的灰白色菌落,共分离获得2株疑似菌株,分别命名为Mh1-1和Mh1-2。生化鉴定结果显示,分离株麦芽糖、甘露糖、蔗糖、木糖、山梨醇反应均呈阳性。PCR扩增出大小为453 bp的溶血性曼氏杆菌特异性基因及306 bp的荚膜血清A1型条带。相似性比对结果显示,分离株Mh1-1与溶血性曼氏杆菌GDZJcattle2014株(登录号:KM576848.1)的相似性为98.49%,分离株Mh1-2与溶血性曼氏杆菌38599株(登录号:CP017491.1)的相似性为98.14%。经鉴定2株分离株均为血清A1型溶血性曼氏杆菌。小鼠致病性试验结果显示,分离株Mh1-1和Mh1-2对小鼠的半数致死量(LD_(50))分别为2.2×10^(7)和1.0×10^(7)CFU/mL。2株分离菌株均检出毒力基因gs 60、lktC、lktA、tbpB、adh和nmaA。药敏试验结果显示,分离株Mh1-1对四环素、林可霉素表现耐药,对链霉素表现中介;分离株Mh1-2对链霉素和林可霉素表现耐药,对四环素表现中介;2株分离菌株均对氧氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星、复方新诺明、头孢噻肟、氟苯尼考等表现敏感。耐药基因检测结果显示,2株分离株均携带strA、strB、tetA基因。体外抑菌试验结果显示,小檗碱和柠檬醛对分离株均有较好的抑制作用。【结论】本研究从患呼吸道疾病的病死羊肺脏组织中分离获得2株荚膜血清A1型溶血性曼氏�
- 武佳鑫孙月毛伟刘淑英尹凯雯张志丹韩凯凡赵红霞
- 关键词：耐药性
- PGD_(2)/DP_(1)途径对细菌感染奶牛子宫内膜组织中HMGB-1和PAFR表达的影响被引量：2
- 2021年
- 为了研究前列腺素D2(prostaglandin D2,PGD2)/DP1受体途径对大肠杆菌(Escherichia coli)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)感染奶牛子宫内膜组织中炎症介质HMGB-1和PAFR的表达及对组织损伤程度的影响,试验以体外培养奶牛子宫内膜组织为研究对象,应用1×10-6 mol/L DP1受体激动剂(BW-245C和15d-PGJ2)和等量(1×106 CFU/mL)大肠杆菌、金黄色葡萄球菌共同处理奶牛子宫内膜组织,采用实时荧光定量PCR、免疫组化和HE染色法检测奶牛子宫内膜组织中HMGB-1和PAFR的表达并评价组织损伤情况。结果显示,与空白对照组相比,大肠杆菌和金黄色葡萄球菌感染奶牛子宫内膜组织中HMGB-1和PAFR表达量显著升高(P<0.05),而DP1受体激动剂与大肠杆菌和金黄色葡萄球菌共处理奶牛子宫内膜组织中DP1受体激动剂显著抑制奶牛子宫组织中HMGB-1和PAFR的表达(P<0.05)。HE染色结果显示,大肠杆菌与金黄色葡萄球菌感染的奶牛子宫内膜组织上皮细胞和腺上皮细胞完全脱落、坏死、崩解;而DP1受体激动剂、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌共同处理奶牛子宫内膜组织中,DP1受体激动剂的加入显著减轻奶牛子宫内膜组织的损伤程度(P<0.05)。免疫组化染色法结果与以上两种方法结果一致。结果表明,PGD2能够抑制大肠杆菌与金黄色葡萄球菌感染的奶牛子宫内膜组织中损伤相关因子HMGB-1、PAFR的表达,减轻组织损伤程度,这一作用可能是由DP1受体所介导的。
- 杨效林韩润林毛伟包海霞刘昆吴金迪曹金山曹金山
- 关键词：HMGB-1
