张朝晖
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
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- 中华绒螯蟹组蛋白H3基因保守序列的克隆、表达及抗体制备
- 2014年
- 为了研究组蛋白H3在中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)精子发生中的动态特征,采用PCR技术扩增中华绒螯蟹H3基因编码区的DNA片段,将其重组至含有6个His标签序列的原核表达质粒pET-30a(+)上,转化入大肠杆菌(Escherichia coli)Rosetta(DE3)感受态细胞中,以0.2 mmol/L的异丙基β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导产生pET-30a-H3重组蛋白。SDS-PAGE表明,重组菌成功表达出了分子量约为21 ku的目标蛋白质,融合蛋白以上清和包涵体的形式存在。采用镍柱亲和层析的方法纯化目的蛋白,免疫新西兰大白兔(Oryctolagus cuniculus),制备兔抗血清。Western blot结果表明,制备的多克隆抗体具有较好的特异性。至此,成功地克隆了中华绒螯蟹H3编码区基因并制备了多克隆抗体,为进一步研究其在精子发生中的动态特征提供了基础。
- 康现江吴江立穆淑梅张朝晖
- 关键词：中华绒螯蟹组蛋白H3原核表达多克隆抗体
- 组蛋白磷酸化修饰与精子发生被引量：4
- 2014年
- 组蛋白磷酸化是组蛋白氨基酸残基的磷酸化修饰,是一类重要的翻译后修饰,与有丝分裂和减数分裂的染色质压缩、染色质功能调节、转录的激活与抑制、DNA损伤修复以及物质代谢等多种机制相关。文章对国内外近10年多种代表性生物精子发生(孢子形成)的相关文献进行总结,论述了组蛋白磷酸化在精子发生中调控蛋白质作用因子的结合位点、调控减数分裂过程中的DNA复制与重组、保障正确的染色质重塑、对减数分裂后的成熟精子核的完全包装等重要功能。这些发现加深了人们对于组蛋白及其翻译后修饰在精子发生及分化中作用的理解。
- 张朝晖康现江穆淑梅
- 关键词：精子质量精子发生表观遗传
- 中华绒螯蟹组蛋白H3、H4基因的克隆及其在精子发生中的变化
- 为了研究组蛋白H3、H4在中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)精子发生中分布特征的变化,首先利用PCR技术克隆出组蛋白H3、H4的编码区基因,其中H3的编码区包含408 bp的碱基,编码136个氨基酸,预测...
- 康现江吴江立穆淑梅郭明申陈廷荣张朝晖李振秋
- 关键词：中华绒螯蟹精子发生组蛋白基因克隆免疫定位
