贺志瑞
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 供职机构：石河子大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 绵羊MSTN多克隆抗体的制备及细胞毒性分析被引量：1
- 2013年
- 目的:研究绵羊肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)多克隆抗体的安全性。方法:将绵羊MSTN成熟肽基因克隆至原核表达载体pET-32a(+),转化至BL21(DE3)中;利用Ni-NTA亲和层析法纯化目的蛋白,免疫新西兰兔制备多克隆抗体,West-ern blotting鉴定其免疫原性;ELISA检测抗体效价;通过检测乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)的水平研究其细胞毒性。结果:成功获得了330 bp的绵羊MSTN成熟肽基因,表达蛋白分子量约为33 kDa,纯度达90%以上;Western blot检测表明MSTN蛋白具有免疫原活性;ELISA检测证实制备的抗体可与抗原蛋白特异性结合,抗体效价为l:25 600,细胞毒性试验表明高浓度的多克隆抗体(200μg/mL)对肌肉细胞无毒害作用。结论:制备的绵羊MSTN多克隆抗体具有生物学活性,对肌肉细胞无细胞毒性,为促生长效果验证提供了安全保障。
- 郭吉星张辉胡圣伟李天森张文智贺志瑞张豫孙志华陈创夫
- 关键词：肌肉生长抑制素原核表达多克隆抗体细胞毒性
