目的观察人膝关节不同退变阶段骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨细胞中微小RNA-140(micro RNA-140,miR-140)表达规律及转染双链miR-140模拟物/抑制物(double strands-miR-140 mimic/inhibitor,ds-miR-140mimic/inhibitor)对OA软骨细胞功能的影响。方法根据Kellgren and Lawrence X线分级,膝关节软骨分为正常组(O级)、中期OA组(Ⅲ级)和晚期OA组(Ⅳ级)。各组收集软骨标本6~8例,体外分离及培养软骨细胞,采用第2代软骨细胞进行检测。运用实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测各组miR-140相对表达量及Ⅱ型胶原(collagentypeⅡa,COL2A1)及Ⅹ型胶原(Collagentype Xa,COL10A1)的表达情况。向中期OA组软骨细胞转染ds-miR-140mimic/inhibitor后,观察软骨形成因子SRY基因(SRY-related high mobility group box gene9,SOX9),COL2A1及COL10A1表达情况。结果 miR-140在OA软骨细胞中表达显著下降,中、晚期OA组miR-140和正常组相比分别减少78.9%和94.5%(P<0.05),晚期OA组miR-140较中期OA组减少73.9%(P<0.05)。中、晚期OA组SOX9的mRNA较正常组分别减少34.1%和49.3%(P<0.05),COL2A1的mRNA较正常组分别减少36.7%和78.7%(P<0.05),中、晚期OA组COL10A1的mRNA较正常组分别增加1.66倍和2.10倍(P<0.05)。向中期OA组转染ds-miR-140mimic/inhibitor后,SOX9的mRNA分别增加1.95倍和减少59.1%,COL2A1的mRNA分别增加1.87倍和减少68.8%(P<0.05),COL10A1的mRNA分别减少73.0%和增加1.96倍(P<0.05)。结论miR-140在OA软骨细胞中表达显著下降,且随病情加重而进一步减少;转染ds-miR-140 mimic可增加SOX9和COL2A1的表达,同时降低COL10A1的表达。
