魏利
- 作品数：6 被引量：0H指数：0
- 供职机构：安徽安科生物工程(集团)股份有限公司更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 不同CHO工程细胞株表达的VEGFR-Fc唾液酸化修饰的研究
- 2016年
- 目的比较中国仓鼠卵巢细胞（CHO）工程细胞株表达的VEGFR-Fc的唾液酸化程度的差异,为CHO工程细胞株的筛选提供参数依据。方法从唾液酸单糖、寡糖链这两个层次分析VEGFR-Fc的唾液酸化程度。唾液酸单糖的定量：酸水解释放出的唾液酸用荧光试剂1,2-diamino-4,5-methylenedioxybenzene（DMB）衍生后,采用荧光-亲水保留液相色谱（HILIC-FLD）检测。寡糖链的结构分析：糖苷酶PNGase F释放出的寡糖链经邻氨基苯甲酰胺（2-AB）衍生后,一部分利用阴离子交换色谱原理分析寡糖链上唾液酸的平均数;一部分经HILIC原理分析VEGFR-Fc寡糖链指纹图谱。结果 6株工程细胞株表达的VEGFR-Fc唾液酸含量在3-12 mol NANA/mol蛋白之间,参考品Aflibercept为10.46 mol NANA/mol蛋白;每个寡糖链的唾液酸平均数在0.28-1.0之间;寡糖链的特征指纹谱图显示VEGFR-Fc有12个共有峰,各样品、参考品均有以上共有峰,但各峰的峰高有差异。结论不同的CHO工程细胞株所表达的糖蛋白的唾液酸化程度存在差异。
- 刘培宋礼华范清林刘道琴张伟魏利赵婷
- 关键词：唾液酸唾液酸化糖基化
- 一种抗PD-L1/TIGIT双特异性抗体注射液及其配方筛选方法
- 本发明公开了一种抗PD‑L1/TIGIT双特异性抗体注射液及其配方筛选方法，属于医药制剂技术领域，所述注射液中含有抗PD‑L1/TIGIT双特异性抗体、L‑组氨酸、L‑组氨酸盐酸盐、蔗糖和Tween 80；所述抗PD‑L...
- 于雪莲魏利任亮刘柏云高海鸰刘道琴陈楚楚王文静徐婷黄伟范清林宋礼华
- 复合模式层析在双特异性抗体纯化工艺开发中的应用
- 2025年
- 目的利用复合模式层析技术去除双特异性抗体(bispecific antibody,BsAb,简称双抗)生产过程中的聚集体,在保证目的蛋白回收率的前提下,尽可能提高产品纯度、去除杂质残留。方法利用复合模式层析(阴离子和疏水)结合实验设计(Design of Experiments,DoE)方法对一种IgG-like的对称型双抗在流穿模式下的纯化工艺进行开发,建立高纯度、高回收率的纯化工艺,明确复合模式层析在流穿模式中的关键工艺参数——上样样品和平衡液的pH和电导、保留时间、上样载量,以及关键工艺参数对聚集体去除的影响趋势、聚集体在收获液不同出峰时间点的分布情况等。结果经CHO细胞培养收获的含双抗蛋白的细胞上清进行3步层析工艺纯化后,目的双抗蛋白的体积排阻高效液相色谱(size exclusion high-performance liquid chromatography,SEC-HPLC)纯度>99%,宿主细胞蛋白(host cell protein,HCP)残留<20 ppm,宿主DNA残留低于检测下限。结论复合模式层析在去除约7%聚集体的同时仍能保持93%以上的目的蛋白回收率,在双抗纯化工艺开发中具有广阔的应用前景。
- 魏利刘道琴于雪莲徐婷陈楚楚高海鸽王春艳吴婷婷王如意窦颖辉范清林宋礼华
- 关键词：双特异性抗体聚集体
- 重组人生长激素-Fc融合蛋白注射液制剂配方
- 本发明公开了重组人生长激素‑Fc融合蛋白注射液制剂配方，属于生物医药技术领域，包括组分重组人生长激素‑Fc融合蛋白25‑35mg/mL，L‑组氨酸1.24‑1.86mg/mL，蔗糖30‑60mg/mL，泊洛沙姆1880....
- 魏利于雪莲刘道琴任亮刘柏云俞安安陈楚楚范清林宋礼华
- 长效生长激素生产用工程细胞株稳定性分析
- 2024年
- rhGH-Fc融合蛋白(AK2017)是治疗生长激素缺乏症的长效化生长激素药物,通过其C端融合Fc蛋白来延长药物的半衰期,从而达到长效化的目的。建立适合生产的稳定的CHO工程细胞株是rhGH-Fc融合蛋白商业化生产的前提,也是所有重组蛋白类药物在开发的过程中所面临的重要问题。为了分析rhGH-Fc融合蛋白生产用工程细胞株CHO-rhGH-Fc的稳定性,通过细胞株筛选的单克隆源性、传代稳定性和GMP条件下三批次样品生产质量一致性的三个维度来对生产用工程细胞株CHO-rhGH-Fc的稳定性进行评估。结果表明CHO-rhGH-Fc细胞株的单克隆源性约96.7%,传代过程中细胞形态和倍增速率与传代前工作细胞库细胞一致;传代至G54代目的蛋白表达量和目的基因拷贝数分别为G8代的78%和87.8%,培养过程中不同代次细胞生长趋势稳定,目的基因核苷酸序列与原始理论序列保持一致;GMP条件下连续三批次200 L生物反应器规模培养的细胞生长和代谢趋势均相似,纯化后的三批rhGH-Fc融合蛋白样品的纯度、翻译后修饰和相对生物学活性相似。数据显示长效生长激素生产用工程细胞株CHO-rhGH-Fc的传代稳定性和批间稳定性良好,细胞在商业化生产规模的培养周期内保持稳定,可满足商业化生产需要。
- 魏利刘道琴徐婷黄伟唐瑜俞安安于雪莲杨文静叶洪涛许文娟倪旭婷范清林
- 关键词：稳定性分析拷贝数翻译后修饰
- 重组人生长激素-Fc融合蛋白注射液制剂配方
- 本发明公开了重组人生长激素‑Fc融合蛋白注射液制剂配方，属于生物医药技术领域，包括组分重组人生长激素‑Fc融合蛋白25‑35mg/mL，L‑组氨酸1.24‑1.86mg/mL，蔗糖30‑60mg/mL，泊洛沙姆1880....
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