李守杰
- 作品数:3 被引量:5H指数:2
- 供职机构:中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 猪瘟C株疫苗诱导PBMCs中SLA等位基因差异性表达分析被引量:2
- 2018年
- 猪主要组织相容性复合体(SLA)广泛参与机体免疫应答与调节,具有重要的免疫学研究意义。在转录水平上对猪瘟C株疫苗免疫后猪外周血单个核细胞(PBMCs)中SLA的表达情况进行了初步研究。猪瘟C株疫苗免疫试验猪后,在0、3、5、9d分别采集4头猪的抗凝血分离外周血单个核细胞,通过逆转录荧光定量PCR技术(RT-qPCR)对外周血单个核细胞中的SLA进行转录水平的相对定量检测;并对试验猪SLA上调表达明显的cDNA模板进行了SLAⅡ类分子的克隆、测序及其系统发育树分析。结果显示,猪瘟C株疫苗免疫后,PBMCs中SLAⅠ、SLAⅡ类分子在短时间内均出现上调表达,一段时间后发生回降;测序分析发现,上调表达的SLA-DRA、SLA-DRB分子中存在高频表达序列。结果提示,猪瘟C株疫苗能够刺激机体产生猪瘟病毒相关的免疫应答,并存在SLA等位基因优势选用现象,这种优势选用可为猪瘟表位肽疫苗的研制提供理论依据。
- 李守杰贾怀杰成温玉王春燕金启旺景志忠
- 高原型实验小型猪——合作小型猪的培育与应用被引量:3
- 2021年
- 近交系小型猪(Sus scrofa)的培育是大型动物实验动物化的重点方向和趋势,中国农业科学院兰州兽医研究所以1对合作猪为系祖,采用“近亲交配”和异地实验动物化培育,历时18年培育成功了国际上首个高原型近交系小型猪。该研究成果填补了国内外高原型小型猪的研究空白,为大型哺乳动物实验动物化培育和应用提供了理论依据和技术基础。本文介绍了实验用合作小型猪的基本特性与利用优势,培育过程与遗传控制,以及其在抗病免疫研究中的应用。
- 景志忠房永祥陈国华贾怀杰何小兵李军成高真贞莫斯科冯海燕王春燕李守杰曾爽杨帆高建平姚文娟李政厅景伟曹健民张春祥
- 关键词:近交系实验动物
- 猪瘟病毒C株特异的TCR Vα5和Vβ6真核表达载体的构建及共转染研究被引量:1
- 2016年
- 本实验室前期研究发现猪瘟病毒C株特异的TCR Vα5和TCR Vβ6基因家族,为进一步研究其体外表达情况,应用RT-PCR从猪外周血单个核细胞中扩增其全长基因序列,并构建TCR Vα5-pIRES2-EGFP和TCR Vβ6-pIRES2-EGFP重组质粒,将其转染293T细胞。结果显示,TCR Vα5和TCR Vβ6全长基因分别为816bp和945bp,双酶切和核酸序列测定证实TCR Vα5-pIRES2-EGFP和TCR Vβ6-pIRES2-EGFP重组质粒构建正确;转染293T细胞24h后荧光显微镜下可以看到70%以上的细胞表达EGFP蛋白。此外,实时荧光定量PCR可检测到TCR Vα5和TCR Vβ6基因的表达,单独转染组和共同转染组Western blot均可检测到EGFP蛋白的表达,且蛋白杂交带强度相似。研究结果表明,CSFV-C株特异性的TCR Vα5-pIRES2-EGFP和TCR Vβ6-pIRES2-EGFP真核表达质粒可同时转染到293T细胞中,实现体外共表达。
- 王春燕陈国华何小兵曾爽贾怀杰房永祥冯园李守杰景志忠
- 关键词:TCR