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楚庸烈
作品数:
1
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H指数:0
供职机构:
西安交通大学医学院
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发文基金:
Scientific Research Foundation for the Returned Overseas Chinese Scholars, State Education Ministry
国家自然科学基金
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相关领域:
生物学
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合作作者
卫萍
西安医学院
伦永志
大连大学医学院
洪源
北京地坛医院
张黎颖
北京地坛医院
成军
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2010
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应用酵母双杂交技术筛选与前S1蛋白反式激活蛋白3结合的肝细胞蛋白基因
2010年
目的用酵母双杂交技术筛选白细胞中乙型肝炎病毒(HBV)前S1蛋白反式激活蛋白3(PS1TP3)的结合蛋白。方法通过聚合酶链反应扩增获得的PS1TP3基因,构建诱饵质粒pGBKT7-PS1TP3,转化酵母细胞AH109并在其内表达,然后与转化了人肝细胞文库的质粒pACT2的单倍体酵母细胞Y187进行配合,在涂有X-α-Gal营养缺陷型培养基(SD/-Trp-Leu-His-Ade)上进行双重筛选,提取阳性酵母克隆的质粒转化大肠杆菌经BglII酶切后测序,进行生物信息学分析。结果筛选出30个与PS1TP3相互作用的蛋白,其中包括泛素蛋白酶E2、丝裂原活化蛋白激酶、β2-微球蛋白、磷酸酯酶张力蛋白等已知功能基因及4个未知功能序列,以及拼接新基因1个。结论成功克隆出PS1TP3蛋白的结合蛋白,为研究PS1TP3的分子生物学功能及HBV的致病机制提供了新的思路和线索。
卫萍
成军
楚庸烈
伦永志
张黎颖
洪源
关键词:
乙型肝炎病毒
酵母双杂交
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