李百文
- 作品数：7 被引量：8H指数：2
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 胰腺实性假乳头状瘤的临床病理分析被引量：3
- 2008年
- 背景:胰腺实性假乳头状瘤(SPNP)是一种并非罕见的低度恶性胰腺肿瘤,近年报道的例数明显增多。目的:总结SPNP的临床病理特点,探讨其生物学行为。方法:回顾性分析2003年1月～2007年6月上海瑞金医院收治的13例SPNP患者的临床病理资料,并采用免疫组化方法检测肿瘤细胞α1-抗胰蛋白酶(AT)、α1-抗胰凝乳蛋白酶(ACT)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、波形蛋白、CD56、CD10、胰岛素、胰高血糖素、胃泌素、生长抑素等的表达。结果:526例胰腺肿瘤患者中,13例(2.5%)诊断为SPNP,男女比例为1∶5.5,平均年龄31.5岁,瘤体平均直径8.0cm。术前影像学诊断SPNP者6例(46.2%)。组织形态学显示瘤细胞大小一致,排列成实性片状区和假乳头结构。影像学显示4例浸润血管和周围组织,其中1例发生肝转移。免疫组化示α1-AT、α1-ACT、波形蛋白均呈阳性,11例NSE阳性,无胰岛素和胃泌素阳性者。所有患者均行手术完整切除肿瘤,术后平均随访24个月,均无复发或转移。结论:SPNP好发于年轻女性,具有低度恶性潜能,免疫组化检测对其诊断和鉴别诊断具有较重要的价值,手术治疗对SPNP的疗效较好。
- 贲其稳曹海霞李百文王华枫袁耀宗王建承
- 关键词：胰腺实性假乳头状瘤免疫组织化学
- 三元复合因子Net基因的克隆及其真核表达被引量：1
- 2009年
- 目的克隆人Net基因,构建Net基因表达载体并诱导融合蛋白表达。方法从正常人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中抽提总RNA,经逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增出人全长Net cDNA,构建pEGFP-N1/Net重组体质粒,并将其转染入高表达原癌基因c-fos的人胰腺癌细胞PANC-1中,分析转染细胞的Net表达水平和对细胞增殖力的影响。结果从人胰腺癌细胞PANC-1中克隆出长约1 224 bp的Net基因目的片段,成功构建了重组质粒pEGFP-N1/Net,诱导表达目的蛋白后,Net抑制原癌基因c-fos的表达,进而抑制人胰腺癌细胞的增殖。结论构建重组质粒pEGFP-N1/Net并表达Net融合蛋白,其抑制了细胞的增殖,为进一步研究Net的各种生物学活性及作用机制奠定了基础。
- 李百文倪培华诸琦徐洪
- 关键词：NET克隆融合蛋白
- 人类真核延伸因子1A2对胰腺癌细胞侵袭、转移能力的影响被引量：3
- 2008年
- 目的探讨外源性人类真核延伸因子（EEF）1A2基因导入人胰腺癌SW1990细胞株后，细胞侵袭转移能力的改变。方法应用腺病毒载体将EEFlA2基因导入人胰腺癌SW1990细胞中，采用划痕实验、Transwell小室、细胞粘附实验检测转染前后细胞运动、侵袭、转移及粘附能力的改变。结果Ad5／F35-EEF1A2转染后继续培养48h的SW1990细胞，可见预期大小的特异性条带。实验组24h后细胞迁移率为（74．43±2．12）％，与阴性对照组和空白对照组比较差异有统计学意义[（44．08±5．92）％和（48．09±3．54）％，P〈0．05]。实验组48h后穿膜细胞数为（65．42±8．24）个，与阴性对照组和空白对照组相比差异有统计学意义[（20．10±5．82）个和（23．25±5．23）个，P〈0．05]。实验组48h后穿膜细胞数为（61．30士5．68）个，与阴性对照组和空白对照组相比差异有统计学意义[（32．04±3．60）个和（32．33±2．51）个，P〈0．05]，且对Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅳ型胶原、纤维结合蛋白、粘蛋白的粘附力增强（P〈0．05）。结论腺病毒介导的EEF1A2高表达能明显增强胰腺癌SW1990细胞的运动、侵袭、转移及粘附能力。提示EEF1A2可能通过改变胰腺癌细胞的生物学特性影响胰腺癌的发生发展。
- 诸琦曹海霞黄佳丁健青张愫李百文姚玮艳章永平
- 关键词：胰腺肿瘤细胞株肿瘤
- 三元复合因子Net对人胰腺癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用
- 2012年
- 目的:探讨三元复合因子Net对人胰腺癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法:以聚合酶链反应(PCR)扩增Net基因全长片段,应用基因重组技术构建Ad5/F35-Net重组腺病毒载体。建立24只人胰腺癌裸鼠移植瘤模型,并随机分为PBS组、绿色荧光蛋白(GFP)组和Net组,3组分别注射0.1 mL的PBS、Ad5/F35-GFP(1×108PFU)和Ad5/F35-Net(1×108PFU),干预3周后,测定各组的移植瘤体积和质量,并应用免疫组化法检测各组移植瘤增殖细胞核抗原(PCNA)表达及移植瘤组织原位细胞凋亡情况。结果:本研究成功构建了表达Net的重组腺病毒载体。与PBS组及GFP组相比,Net组裸鼠移植瘤体积和质量明显减小(P均<0.05),而其PCNA表达显著降低(P<0.01),原位细胞凋亡明显增加(P<0.01)。结论:Net可明显抑制人胰腺癌裸鼠移植瘤的生长,抑制移植瘤细胞的增殖,促进移植瘤细胞原位凋亡。
- 李百文倪培华
- 关键词：移植瘤细胞增殖细胞凋亡
- 三元复合因子Net嵌合型重组腺病毒载体的构建及鉴定
- 2012年
- 目的:克隆人三元复合因子Net全长基因,构建其重组腺病毒载体。方法 :抽提正常人胰腺组织中总RNA,经RT-PCR扩增出全长Net基因,利用同源重组的方法将腺病毒骨架质粒pBHG35和穿梭质粒pDC316-Net共转染293细胞,获得腺病毒重组质粒Ad5/F35-Net,在293细胞中包装和扩增后,获得高滴度的腺病毒重组质粒Ad5/F35-Net。采用PCR和蛋白印迹法检测Net基因的表达。结果 :用RT-PCR方法 ,从人胰腺癌组织中扩增出1224 bp的cDNA片段,经测序证实为人Net基因。最终构建及包装出高滴度的重组腺病毒载体Ad5/F35-Net。结论:成功克隆了人Net全长基因,并构建其重组腺病毒表达载体,为进一步研究人Net基因在相关肿瘤疾病中的生物学作用奠定了基础。
- 李百文倪培华
- 关键词：腺病毒载体克隆293细胞
- 三元复合因子Net对人胰腺癌细胞株BxPC3增殖的影响被引量：1
- 2009年
- 目的研究三元复合因子Net转染人胰腺癌细胞株BxPC后的表达状态及对原癌基因c—fos表达的影响。方法采用脂质体2000将重组人pEGFP—Net质粒和空质粒pEGFP转染人胰腺癌BxPC3细胞株，建立稳定高表达Net的细胞系。应用MTT、流式细胞仪等方法检测胰腺癌细胞的增殖，应用实时定量PCR和Western blotting检测Net及c—fos mRNA和蛋白的表达。结果BxPC3细胞低表达Net，转染pEGFP-Net后稳定高表达Net，并抑制c-fos的表达。转染pEGFP—Net的细胞生长缓慢，转染后第3、5、7天的抑制率分别为38．8％、55．3％、56．9％，显著高于空质粒转染组的5．1％、12．4％、8．6％（P〈0．05）；G0／G1期细胞占（61．8±5．7）％，显著高于空质粒转染组的（45．1±3．4）％。结论三元复合因子Net能抑制人胰腺癌BxPC3细胞的增殖，其机制可能与抑制c—fos表达有关。
- 诸琦李百文倪培华曹海峡黄佳张愫
- 关键词：胰腺肿瘤NET细胞增殖
- 三元复合因子Net对c-fos基因转录的调节作用
- 2009年
- Net是三元复合因子家族中的一员,是一种重要的转录调节因子,尤其对原癌基因c-fos的转录具有重要的调节作用,而c-fos基因与细胞的增殖、分化以及某些肿瘤的发生密切相关。c-fos启动子是Net的调节靶点,Net在c-fos启动子的血清反应元件上与血清反应因子结成三元复合体,从而实现其调节功能;且随着细胞内生物环境不同,其表现的调节功能亦不同。
- 李百文诸琦
- 关键词：NETC-FOS转录调节
