王大军
- 作品数：3 被引量：6H指数：1
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- 禽流感(H9N2亚型)酶标抗体的制备及双抗夹心Dot-ELISA检测方法的建立
- 本试验采用AIV灭活油乳苗(H9N2)对AIV非免疫鸡进行接种并获取高免血清,取高免血清采用饱和硫酸铵沉淀法,经过Sephadex G25层析柱提纯后可获得纯度很好的鸡IgG纯品。把提取的IgG应用过碘酸钠法标记辣根过氧...
- 张春杰吴庭才程相朝李银聚王臣王大军
- 关键词：禽流感酶标抗体
- 禽流感(H9N2亚型)酶标抗体的制备及双抗夹心Dot-ELISA检测方法的建立被引量：6
- 2006年
- 采用AIV灭活油乳苗(H9N2)对AIV非免疫鸡进行接种并获取高免血清,取高免血清采用饱和硫酸铵沉淀法,经过Sephadex G25层析柱提纯后可获得纯度很好的IgG。将IgG应用过碘酸钠法标记辣根过氧化酶(HRP),制备禽流感酶标抗体(IgG-HRP),利用所提取的AI-IgG和所制备的禽流感酶标抗体按照双抗夹心Dot-ELISA试验操作步骤,采用方阵法分别摸索包被抗原及酶标抗体的最佳浓度,以及各步反应时间等最佳反应条件,以建立一种优化的AIV双抗夹心Dot-ELISA检测法。结果表明,所制备的AI高免血清HI效价为10log2;AI酶标抗体克分子比值为2.45;优化的Dot-ELISA各条件为:包被AI-IgG最佳稀释倍数为1∶50;最佳封闭剂为1%牛血清白蛋白;AI酶标抗体最佳稀释倍数为1∶100;待检抗原与2种抗体的感作时间均为0.5h(37℃)。优化后的检测方法可在2.5h内诊断结果,制备好的包被膜在4℃下保存2个月不影响其效果。而且敏感性提高了3倍,与新城疫病毒液、传染性支气管炎及减蛋综合症病毒液无交叉反应。
- 张春杰王大军吴庭才李银聚余祖华程相朝
- 关键词：禽流感酶标抗体
- TGEV-PEDV二重RT-PCR检测方法的建立及应用
- 2016年
- 本试验旨在建立能同时检测猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)的二重RT-PCR检测方法。首先根据Gen Bank收录的TGEV和PEDV的基因序列,设计扩增猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)的特异性引物,然后通过优化二重PCR的体系建立一个二重RT-PCR检测方法。用该方法对临床收集的10份粪便样品进行检测,初步表明本研究建立的二重PCR方法具有良好的特异性和灵敏度,能用于临床诊断及流行病学调查。
- 江毅杨佰雨孔维欢王大军赵月龙刘盼召冉大鹏赵浩周刘涛何雷
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒猪流行性腹泻病毒多重PCR
